Orientador: Rafael Henrique Nóbrega / Resumo: Dentre os aspectos hormonais que influenciam o desenvolvimento dos vertebrados, pode-se destacar o papel dos hormônios tireoidianos (Hts). Esses hormônios (T4/T3) mediam funções imprescindíveis para a homeostase dos organismos, modulando processos fisiológicos como a regulação do crescimento, metabolismo e reprodução. Pensando nisso o presente trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos do hipotireoidismo in vivo e in vitro na função testicular de machos adultos de D. rerio e a relação dos Hts no eixo hipotalâmico-hipofisário. No presente trabalho nós mostramos que in vivo o hipotireoidismo induzido pelo methimazole afetou a espermatogênese de zebrafish levando ao acúmulo de células pré-meióticas, atraso na diferenciação e meiose, reduzindo a quantidade de espermatozoides formados. in vitro foi observado que os efeitos biológicos do hormônio folículo estimulante (Fsh) na função testicular são dependentes dos hormônios tireoidianos, assim como os efeitos estimulatórios da gonadotropina coriônica humana (hCG) e inibitório do hormônio inibidor de gonadotropina (GnIH) necessitam dos Hts. Além disso, a expressão de genes hipotalâmicos e hipofisários foram afetados de modo antagônico quando na ausência ou presença dos Hts. Portanto nossos resultados indicam que os hormônios tireoidianos são essenciais na manutenção da espermatogênese e do eixo hipotalâmico-hipofisário em adultos de zebrafish. / Mestre

Four experiments were conducted to test the hypothesis that RF-amide related peptide 3 (RFRP3) negatively regulate the secretion of LH in mares. In Exp. 1, mares received native gonadotropin-releasing hormone (GnRH) continuously at a rate of 20 microgram/h, delivered subcutaneously using Alzet osmotic pumps during the luteal phase of the estrous cycle. Mares were treated with i.v. bolus injections of 0, 500 and 1,000 microgram eRFRP3 on days 4, 6 and 8 of cycle. Mean concentrations of LH in the peripheral circulation averaged 1.2 +/- 0.2 ng/mL and did not differ among groups before or following RFRP3 treatment. In Exp. 2, pituitary venous effluent was sampled for characterization of episodic release of LH. Mares received either saline or eRFRP3 (250 microgram) i.v. every 10 min for 6 h beginning 2 h after onset of sampling. At hour 6, each mare was challenged with 1 mg GnRH. Neither mean ICS concentrations of LH (1.3 +/- 0.2 ng/ml), nor frequency (3.6 +/- 0.55 episodes/h), amplitude (0.2 +/- 0.03 ng/ml), or duration (36.3 +/- 3.5 min) of individual secretory episodes, differed between groups before or after eRFRP3 treatment. Area under the GnRH-induced LH curve (arbitrary units) also did not differ between control and RFRP3 treated mares (175.9 +/- 11.4 vs. 192.6 +/- 10.6). In Exp. 3, winter anovulatory mares (n=6) were treated continuously for 7 d with GnRH (100 microgram/h) to stimulate synthesis of LH and increase circulating concentrations of LH to values similar to the breeding season. The ICS was catheterized for blood sampling and mares were treated with saline or RFRP3 (5 mg) in a replicated Latin square design. Treatment with RFRP3 failed to alter ICS mean concentration of LH (0.95 +/- .03 ng/ml). Finally in Exp. 4, mares in the follicular phase of the estrous cycle were assigned randomly to receive either saline (n=3) or 10 microgram/kg BW of oRFRP3 (n=3) in a single injection. No effect on mean concentration of LH was observed. In contrast to observations in birds and other mammals, results of the current experiments fail to provide evidence for functional activity of eRFRP3 or oRFRP3 in regulating LH release in the mare.

Orientador: Renata Guimarães Moreira Whitton / Resumo: O eixo hipotálamo-hipófise-gônadas (HHG) modula o processo reprodutivo nos vertebrados e pode ser alvo de diversas substâncias que podem de alguma forma alterar a reprodução em diferentes espécies, dentre elas os teleósteos. Em condições favoráveis, ocorre a sinalização do hormônio liberador de gonadotropinas (GnRH), produzido e liberado por neurônios hipotalâmicos, que atua nas células gonadotrópicas da adeno-hipófise, estimulando a síntese e liberação do hormônio folículo-estimulante (Fsh) e o hormônio luteinizante (Lh). Esses, por sua vez, chegam às gônadas, promovendo a produção dos esteroides gonadais, maturação e liberação dos gametas. Enquanto o GnRH exerce papeis estimuladores, as ações do GnIH (hormônio inibidor de gonadotropinas) permanecem controversas para muitas espécies de teleósteos. Sabe-se que alguns compostos químicos podem interferir no funcionamento do eixo HHG dos peixes e os anti-inflamatórios não esteroidais (AINEs) podem atuar como desreguladores endócrinos e afetar a produção das gonadotropinas. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos in vitro do GnRH e do GnIH, além dos AINEs – diclofenaco e ibuprofeno, na regulação da expressão gênica das gonadotropinas utilizando explantes de hipófise, e o efeitos dos AINEs sob a liberação dos esteroides gonadais em explantes de testículos, de uma espécie neotropical, Astyanax altiparanae. Nossos resultados mostraram que o cGnRH2 (chicken GnRH2) aumentou os níveis de expressão de fshb e lhb, e o zGnIH-3 (zeb... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The hypothalamus-pituitary-gonads (HPG) axis modulates the reproductive process in vertebrates and may be the target of several substances that may in some way alter reproduction in different species, including teleosts. Under favorable conditions, the gonadotropin releasing hormone (GnRH), produced and released by hypothalamic neurons acts in the adenohypophysis gonadotropic cells stimulates the synthesis and release of the follicle-stimulating hormone (Fsh) and the luteinizing hormone (LH), that act in the gonads promoting the production of gonadal steroids, for maturation and release of gametes. While GnRH exerts stimulatory roles, GnIH (gonadotropin inhinitory hormone) actions remain controversial for many species of teleosts. Some chemical compounds may interfere in the HPG axis in fish, and nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) may act as endocrine disrupters and affect the production of gonadotropins. The objective of this study was to evaluate the in vitro effects of GnRH and GnIH and NSAIDs - diclofenac and ibuprofen - on the regulation of gonadotropins gene expression using pituitary explants and the effects of NSAIDs on the release of gonadal steroids in testicular explants from a Neotropical species, Astyanax altiparanae. Our results showed that in males, cGnRH2 (chicken GnRH2) increased the expression levels of fshb and lhb, and zGnIH-3 (zebrafish GnIH-3) had no direct effect on gonadotropin expression. However, zGnIH-3 stimulated the decrease of the expr... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor