Made available in DSpace on 2016-08-15T20:27:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AntonioCLC_TESE.pdf: 1302444 bytes, checksum: e465e8b76dbdec077ba3f1534f5d9898 (MD5) Previous issue date: 2015-04-16 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Gossypol is a polyphenol compound produced by the pigment glands of cotton plants (Gossypium spp.) and presents proven deleterious action on spermatogenesis, rodent´s estrous cycle, granulosa cells steroidogenesis in pigs, early termination of pregnancy and embryonic development. However, the effects on sheep ovaries were not yet studied. This study was divided into two stages and aimed to determine in vitro and in vivo effect of gossypol on sheep ovarian follicles. In the first stage, eight ovarian fragments from each ewe were cultured in &#945;-MEM supplemented culture and subjected to three concentrations of gossypol-acetic acid (5, 10 and 20 µg/mL) for periods of 24 hours and seven days. In vitro action of gossypol resulted in a significant reduction in the number of viable ovarian follicles of all development stages, and a significant increase in the number of atretic follicles after 24 hours and seven days of cultivation (p < 0,01). In the latter it was remarkable the absence of viable antral follicles and the primordial follicles presented less than 50% of viability. In the second stage, we used twelve crossbred ewes, which were randomly divided into two groups and fed diets containing cottonseed cake or not (control group). Concentrate feed was offered at a rate of 1.5% of body weight of the animal for 63 days. Concentrations of total and free gossypol in cottonseed cake was 3.28 mg/g and 0.11 mg/g, respectively. Throughout the trial period no animal showed clinical signs of toxicosis. There was no interference on progesterone concentrations, weight, weight gain and ovaries measurements. Only occasional changes on vaginal cytology, hematological and biochemical parameters were noted. However, treatment with gossypol was responsible for significant reduction in the number of viable ovarian follicles (20.6% in treated sheep and 65.1% the control group) and significant increase in the number of atretic follicles (79.4% in treated sheep and 34.9% in control group), interfering at all stages of follicular development (p < 0,01). In conclusion, the gossypol promotes direct damage to the ovarian follicles of sheep, resulting in an increase on the proportion of atretic follicles and reduction of viable follicles both in vitro and in vivo / O gossipol é um composto polifenólico produzido pelas glândulas de pigmento do algodoeiro (Gossypium spp.); apresentando ação deletéria comprovada sobre a espermatogênese, ciclo estral de roedores, esteroidogênese nas células da granulosa em suínos, interrupção precoce da gestação e desenvolvimento embrionário inicial. No entanto, os efeitos sobre os ovários de ovelhas ainda não havia sido estudado. O presente estudo foi dividido em duas etapas: determinar o efeito in vitro e in vivo do gossipol sobre folículos ovarianos de ovelhas. Na primeira etapa, oito fragmentos ovarianos de cada animal foram cultivados em Meio &#945;-MEM suplementado e submetidas a cultivo em três concentrações de gossipol-ácido acético (5, 10 e 20 &#956;g/mL) por períodos de 24h e sete dias. A ação do gossipol in vitro proporcionou redução significativa no número de folículos viáveis em todos os estágios de desenvolvimento folicular; e aumento significativo no número de folículos atrésicos após 24h e sete dias de cultivo (p < 0,01). Neste último também foi notório a ausência de folículos antrais viáveis, e, os folículos primordiais apresentaram viabilidade inferior a 50%. Na segunda etapa, foram utilizadas doze ovelhas mestiças, que foram aleatoriamente separadas em dois grupos e alimentadas com rações contendo torta de algodão ou não (grupo controle). A ração foi oferecida na proporção de 1,5% do peso vivo do animal por 63 dias. As concentrações de gossipol total e livre na torta de algodão foram 3,28 mg/g e 0,11 mg/g, respectivamente. Durante todo o período experimental, nenhum animal apresentou qualquer sinal clínico de intoxicação. Não houve interferência sobre as concentrações de progesterona, peso, ganho em peso e medidas ovarianas. Apenas alterações ocasionais sobre a citologia vaginal, parâmetros hematológicos e bioquímicos foram evidenciadas. Entretanto, o tratamento com gossipol foi responsável por redução significante no número de folículos ovarianos viáveis (20,6% nas ovelhas tratadas e 65,1% no grupo controle) e aumento significante no número de folículos atrésicos (79,4% nas ovelhas tratadas e 34,9% no grupo controle), com interferência em todas as fases de desenvolvimento folicular (p < 0,01). Em conclusão, o gossipol promove danos diretos aos folículos ovarianos de ovelhas, resultando em aumento na proporção de folículos atrésicos e redução dos folículos viáveis tanto in vitro como in vivo

Submitted by RAFAELA MORANDO null (rafaelamorando@hotmail.com) on 2017-10-27T11:45:16Z No. of bitstreams: 1 TESE VERSÃO FINAL_RAFAELA MORANDO.pdf: 1537101 bytes, checksum: c1ed77081821aca470041ac04e92a88b (MD5) / Approved for entry into archive by Monique Sasaki (sayumi_sasaki@hotmail.com) on 2017-10-31T19:29:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 morando_r_dr_bot.pdf: 1537101 bytes, checksum: c1ed77081821aca470041ac04e92a88b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-31T19:29:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 morando_r_dr_bot.pdf: 1537101 bytes, checksum: c1ed77081821aca470041ac04e92a88b (MD5) Previous issue date: 2017-08-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O algodoeiro Gossypium spp. se destaca como uma importante fonte de recursos renováveis, produzindo a fibra de origem vegetal mais consumida pela indústria têxtil mundial. Para a maioria dos países produtores de algodão, o ataque de insetos-praga como o pulgão Aphis gossypii Glover (Hemiptera: Aphididae), é considerado um dos principais fatores de redução de produtividade na cultura. O inseto pode ocasionar danos diretos às plantas de algodão, por meio da sucção contínua de seiva, além de indiretos, devido ao favorecimento de fumagina e transmissão de vírus. O controle desse afídeo tem sido realizado principalmente através de aplicações sucessivas de inseticidas, o que têm acelerado a seleção de populações resistentes aos ingredientes ativos. Dentre as táticas alternativas ao manejo químico, o uso de cultivares resistentes se destaca como uma valiosa estratégia para o manejo integrado de pragas (MIP). O objetivo deste trabalho foi caracterizar possíveis categorias de resistência de genótipos de algodão frente ao ataque do pulgão A. gossypii, por meio de ensaios de casa de vegetação e laboratório. Inicialmente, foi realizado um screening com 78 genótipos de algodão, a partir do qual, foram selecionados 15 materiais para ensaios de capacidade de infestação e determinação do número acumulado diário de afídeos (CAD). Posteriomente, esses genótipos selecionados foram também avaliados por meio de ensaios de antixenose e de antibiose. Na última etapa, realizou-se um ensaio com EPG (Electrical Penetration Graph) utilizando-se quatro genótipos de algodão portadores de diferentes categorias de resistência, além da análise química de taninos desses materiais, visando estabelecer correlações. No ensaio de capacidade de infestação, os genótipos G. hirsutum punctatum, IAC PV010-1664 e Acala 4-42 foram os menos colonizados, indicando a ocorrência de antixenose e/ou antibiose. Com base no ensaio de antixenose, os genótipos Deltapine Smooth Leaf (7,82 afídeos) e Variedade Reba= BTK-12 (8,54 afídeos) foram significativamente menos infestados, indicando a expressão de antixenose sobre A. gossypii. No ensaio de antibiose, G. arboreum 1 apresentou as menores médias para número total de ninfas (27,11 indivíduos), ninfas por adulto/dia (1,44 indivíduos) e ninfas até os 10 dias (18,63 indivíduos), além de reduzir a fase reprodutiva (19,84 dias), a viabilidade ninfal (79,17%), a longevidade de adultos (26,68 dias) e o período de ninfa-adulto de A. gossypii (5,68 dias), sugerindo elevados níveis de resistência por antibiose e/ou antixenose. Em FM 910 o número de ninfas produzidas por dia e aos 10 dias foi reduzido, também indicando a expressão de resistência. Para o ensaio com EPG, verificou-se que afídeos confinados ao genótipo FM 910 necessitaram de maior tempo (10,94 %) até o início da fase de ingestão floemática, sugerindo a presença de fatores antixenóticos. Em Deltapine Smooth Leaf, os afídeos apresentaram maior tempo na fase de não prova e menores períodos no primeiro vaso floemático e de ingestão em E2, indicando a expressão de antixenose e/ou antibiose. A análise química revelou maior concentração de taninos nas folhas de Deltapine Smooth Leaf em relação aos demais, sugerindo que esses compostos pode ter atuado como fatores químicos de resistência, reduzindo o tempo de alimentação do afídeo nos vasos do floema desse genótipo. A resistência de G. arboreum 1 está provavelmente mais relacionada à expressão de antibiose, visto que o afídeo se alimentou nos vasos desse material de maneira similar ao observado com o genótipo suscetível FMT 707. Os resultados obtidos neste estudo podem ser explorados em programas de melhoramento genético visando o desenvolvimento de genótipos de algodoeiro resistentes a A. gossypii. / Cotton, Gossypium spp., stands out as an important source of renewable resources, producing the most consumed vegetal fiber by the world textile industry. For most cotton producing countries, the attack of pest insects, such as the aphid Aphis gossypii Glover (Hemiptera: Aphididae), is considered one of the main productivity reducing factors in the crop. This insect can cause direct damages to cotton plants through of the continuous sucking of sap as well as indirect damages by favoring sooty mold and transmitting the virus. The control of this aphid has been done mainly through successive applications of insecticides, which have accelerated the selection of populations that are resistant to the active ingredients. Among the alternative strategies of the chemical management, the utilization of resistant cultivars is considered valuable for integrated pest management (IPM). The purpose of this work was characterize possible resistance categories of cotton genotypes against an attack of the aphid A. gossypii through greenhouse and laboratory assays. Initially, a screening was carried out with 78 cotton genotypes, and 15 materials were selected for infestation ability assays and determination of the cumulative aphid-day number (CAD). Posteriorly, these selected genotypes were also evaluated by antixenosis assays and antibiosis. In the last step, an assay with EPG (Electrical Penetration Graph) was carried out using four cotton carrier genotypes from different resistance categories besides the chemical analysis of tannins of these materials to establish correlations. In the infestation ability assay, genotypes G. hirsutum punctatum, IAC PV010-1664 and Acala 4-42 were the least colonized ones, indicating the occurrence of antixenosis and/or antibiosis. Based on the antixenosis assay, genotypes Deltapine Smooth Leaf (7.82 aphids) and Variedade Reba= BTK-12 (8.54 aphids) were significantly less infested, indicating the expression of antixenose on A. gossypii. In the antibiosis assay, G. arboreum 1 showed the lowest averages for total number of nymphs (27.11 individuals), nymphs per adult/day (1.44 individuals) and nymphs at 10 days (18.63 individuals), besides reducing the reproductive periods (19.84 days), the nymphal viability (79.17%), the adult longevity (26.68 days) and the nymph-adult period of A. gossypii (5.68 days), suggesting high levels of resistance by antibiosis and/or antixenosis. In FM 910 the number of produced nymphs per day and at 10 days was decreased, which also show resistance expression. For the assay with EPG, it was verified that aphids confined to the FM 910 genotype required a longer time (10.94%) until the beginning of the phloem ingestion phase, suggesting the presence of antioxenotic factors. In Deltapine Smooth Leaf, the aphids presented longer time in the non-probing phase and shorter periods in the first phloematic vessel and E2 ingestion, indicating the expression of antixenosis and/or antibiosis. The chemical analysis presented higher concentration of tannins in Deltapine Smooth Leaf leaves in relation to the others, suggesting that these compounds may have acted as chemical resistance factors, reducing the aphid feeding time on the vessels of this genotype phloem. The resistance of G. arboreum 1 is probably more related to the expression of antibiosis, since the aphid fed on the vessels of this material similarly to the one observed in FMT 707 susceptible genotype. The results obtained in this study can be explored in breeding programs to develop A. gossypii-resistant cotton genotypes. / CNPq: 141953/2014-4