Introduction. Ototoxicity refers to medication-caused auditory and/or vestibular system dysfunction resulting in hearing loss or dysequilibrium. The potential damage that antibiotics eardrops can produce when placed directly into the middle ear in some cases is still unknown. / Objectives. To determine the safety of use of the new ciprofloxacin/dexamethasone otic drops in patients without an intact tympanic membrane. / Materials and methods. Ciprodex/dexamethasone eardrops were tested in an animal and human model. The animal part was performed in 13 adult chinchillas; Auditory Brainstem Response (ABR) was used. For the human part, twenty subjects were enrolled in the study; Distortion Products Otoacoustic Emissions (DPOAE) testing was used. / Results. Animal Part: after the tube insertion ABR threshold mean value was 19.6+/-13.3 dB for all the animals. On the last evaluation (day 60), the mean threshold was 19+/-13 dB for the experimental ears, and 13.7+/-12.2 dB for the control ears, this overall analysis showed no significant effect (p-value = 0.661). Human Part: the mean thresholds for the pre-treatment test were 4.87+/-6,34 dB for the DP value and -0.87+/-7.93 dB for the Ns value. In the post-treatment evaluation the mean thresholds were 3.48+/-4.40 dB for the DP value and -8.02+/-7.57 dB for the Ns value. / Conclusions. The use of CiprodexTM eardrops seems to be safe when instilled in ears without an intact tympanic membrane.

Background. The mechanism by which tracheal occlusion (TO) induces lung growth is unknown. The sonic hedgehog (Shh) is a signaling protein essential for bronchial branching and lung maturation in rats. Shh expression is delayed in nitrofen-induced congenital diaphragmatic hernia (CDH). The aim of this study was to see if TO could up-regulate Shh expression in CDH. / Methods. To create CDH in fetal rats, time-dated pregnant rats were gavaged 100 mg of nitrofen on day 9.5 post-conception. TO was performed on day 19 of gestation (term=22 days). Animals were sacrificed on day 20 and 21. Lung growth was measured by lung to body weight ratio (LW/BW) and histology. The expression of Shh was measured by immunohistochemistry (IHC) and by quantitative real time polymerase chain reaction (qRT-PCR). / Results. TO induced growth in nitrofen-affected lungs in comparison to controls. Higher levels of Shh mRNA expression were observed in the nitrofen-affected lungs on day 21. TO in the nitrofen-affected animals lowered the mRNA expression levels and brought them to control levels. / Conclusions. The nitrofen-induced hypoplasia of CDH is reversible with TO. Shh-mRNA expression in the nitrofen-affected lungs is delayed and peaks later during gestation. TO decreases Shh-mRNA expression levels and brings them to control levels.

BACKGROUND: Multiple studies have demonstrated increased risk of lung cancer in the presence of emphysema, independent of smoking history and airflow obstruction, but the relationship of emphysema to specific histologic subtypes remains uncertain. OBJECTIVE: To determine the extent to which emphysema on chest computed tomography (CT) is associated with lung cancer histology. METHODS: Cross-sectional analysis of consecutive lung cancer patients referred to the Jewish General Hospital was performed (2001-2009). All those with demographic data, smoking history (pack-years), documented histology and chest CT were included. Emphysema was graded on CT by three readers, using a standardized rubric. Odds of each lung cancer subtype were compared between patients with and without emphysema, and adjusted for age, sex and smoking history by multiple logistic regression. RESULTS: Complete data were available for 498 lung cancer patients (mean age 68 years; 221 [44%] female; 78 [16%] never smokers; 263 [53%] without emphysema on CT). The most common histologies were adenocarcinoma (242 [49%]), squamous (71 [14%]), undifferentiated (48 [10%]) and small cell carcinoma (42 [8%]). The remaining 19% included bronchioloalveolar, large cell, pleomorphic and basaloid carcinomas. Presence of emphysema was associated with increased odds of squamous (OR 3.1 95%CI 1.8-5.3) and small cell (OR 2.1 95%CI 1.1-4.1) carcinoma. After adjustment for age, sex and smoking history, emphysema was associated with squamous (OR 2.7 95%CI 1.5-4.9) but not small cell (OR 1.5 95%CI 0.8-3.1) carcinoma. CONCLUSIONS: Relative to other histologic subtypes, the odds of squamous carcinoma were significantly increased among lung cancer patients with emphysema after adjustment for smoking history. This was not true of small cell carcinoma, although confidence intervals were wide so an association cannot be entirely excluded. Other common subtypes were not independently associated with emphysema. / CONTEXTE: Plusieurs études ont démontré un risque accru de cancer du poumon en présence d'emphysème, indépendamment des antécédents de tabagisme et d'obstruction, mais la relation entre l'emphysème et les types histologiques spécifiques demeure incertaine. OBJECTIF: Déterminer la mesure dans laquelle l'emphysème sur la tomodensitométrie thoracique (TDM) est associé à l'histologie du cancer du poumon. MÉTHODES: L'analyse transversale de patients consécutifs de cancer du poumon référés à l'Hôpital général juif a été réalisée de 2001 à 2009. Tous ceux avec des données démographiques, des antécédents de tabagisme (paquets-années), une histologie documentée et un TDM thoracique ont été inclus. L'emphysème a été évalué sur TDM par trois lecteurs, en utilisant une méthode standardisée. Les proportions de chaque sous-type de cancer du poumon ont été comparées entre les patients avec et sans emphysème, et ajustées selon l'âge, le sexe et les antécédents de tabagisme par régression logistique multiple. RÉSULTATS: Des données complètes étaient disponibles pour 498 patients atteints de cancer du poumon (moyenne d'âge 68 ans; 221 [44%] des femmes; 78 [16%] qui n'ont jamais fumé; 263 [53%] sans emphysème sur TDM). Les histologies les plus fréquentes étaient l'adénocarcinome (242 [49%]), l'épidermoïde (71 [14%]), les indifférenciées (48 [10%]) et le carcinome à petites cellules (42 [8%]). La présence de l'emphysème était associée à une probabilité accrue de carcinomes épidermoïdes (OR 3,1 IC 95%: 1,8-5,3) et de carcinomes à petites cellules (OR 2,1 IC 95% 1,1-4,1). Après ajustement selon l'âge, le sexe et les antécédents de tabagisme, l'emphysème était associé au cancer de type épidermoïde (OR 2,7 IC 95%: 1,5-4,9), mais pas au cancer à petites cellules (OR 1,5 IC 95%: 0,8-3,1). CONCLUSIONS: Comparativement à d'autres sous-types histologiques, la probabilité de carcinome épidermoïde est significativement augmentée chez les patients atteints de cancer du poumon avec emphysème, après ajustement selon les antécédents de tabagisme. Ce n'est pas le cas pour le carcinome à petites cellules, bien que les intervalles de confiance étaient larges, donc une association ne peut pas être entièrement exclue. D'autres sous-types de cancer pulmonaire n'ont pas été indépendamment associés à l'emphysème.

The use of calcineurin inhibitors (CNI) is the basis of many immunosuppressive regimens because of its clinical success and contribution to the remarkable increase in the rate of allograft survival. However, standard recommended doses of cyclosporine and tacrolimus are associated with nephrotoxicity, resulting in long term renal dysfunction. An ideal strategy would employ a CNI-free regimen. Attempts to convert heart and liver transplant patients to rapamycin resulted in an improvement in renal function however the incidence of side effects lead to dose reduction or drug discontinuation in many cases. Anti-CD25 monoclonal antibodies (mAb) have been used in induction immunosuppression and have been shown to reduce the incidence of acute rejection in solid organ transplantation. We have used anti-CD25 mAb for maintenance immunosuppression as a substitute to CNI in patients with chronic kidney disease. It was of our particular interest to examine the impact of immunosuppressive medications such as CNI, rapamycin and anti-CD25 monoclonal antibody on naive T helper cell differentiation. We hypothesize that as a result of their diverse mechanisms of action, the effect of immunosuppressive medication on CD4 T helper cells (Th1, Th2 and Th17) results in variability. We found that Th1 and Th17 cells as a proportion of CD4 cells and total lymphocytes in heart transplant patients are lower in CNI patients when compared to anti-CD25 mAb patients and healthy controls. We also found that Th17 cells as a proportion of CD4 cells in liver transplant patients are higher in patients on anti-CD25 mAb and rapamycin when compared to healthy controls. We wanted to determine if this variability had implications for graft rejection as well as two common complications of immunosuppression which are infection and malignancy however we did not find any correlation between proportions of T helper cells and rates of rejection, infection and malignancy. / L'utilisation des inhibiteurs de la calcineurine (ICN) est la base de plusieurs traitements immunosuppresseurs en raison de son succès clinique et de sa contribution à l'augmentation remarquable du taux de survie des allogreffes. Cependant, les doses standards recommandées de cyclosporine et de tacrolimus sont associées à des néphrotoxicités, résultant en un dysfonctionnement rénal à long terme. Une stratégie idéale serait d'employer un régime sans ICN. Des tentatives de transférer les patients ayant subis des transplantations cardiaques et hépatiques à la rapamycine ont entraîné une amélioration de la fonction rénale. Cependant, l'incidence des effets secondaires a conduit à la réduction de la dose ou l'arrêt du médicament dans beaucoup de cas. Les anticorps monoclonaux anti-CD25 (AcM anti-CD25) ont été utilisés dans l'immunosuppression initiale et se sont dévoilés comme réducteurs du risque de rejet aigu lors de transplantations d'organes solides. Nous avons utilisé AcM anti-CD25 pour des fins d'immunosuppression de maintien comme substitut aux inhibiteurs de la calcineurine chez les patients atteints de maladie rénale chronique. Il était particulièrement dans notre intérêt d'examiner l'impact des médicaments immunosuppresseurs comme les ICN, la rapamycine et AcM anti-CD25 sur la différenciation des cellules T helper CD4. Nous émettons l'hypothèse que, suite à leurs diverses mécanismes d'action, les effets des médicaments immunosuppresseurs sur les lymphocytes T CD4 helper (Th1, Th2 et Th17) sont variables. Nous avons trouvé que les cellules Th1 et Th17 comme une proportion de cellules CD4 et lymphocytes totaux, chez les patients a transplantation cardiaque, sont moins élevées chez les patients ICN comparativement aux patients AcM anti-CD25 et les contrôles sains. Nous avons aussi trouvé que les cellules Th17 comme une proportion de cellules CD4 chez les patients a transplantation hépatique sont plus élevées chez les patients sur AcM anti-CD25 et la rapamycine, par rapport aux contrôles sains. Nous voulions déterminer si cette variabilité a des implications dans le rejet du greffon ainsi que dans deux complications fréquentes de l'immunosuppression, qui sont les infections et la malignité. Toutefois, nous n'avons pas trouvé de corrélation entre les proportions de cellules T helper et les taux de rejet, d'infection et la malignité.

Vitamin D is a key regulator of mineral and bone homeostasis. The enzyme CYP24A1 is responsible for transforming vitamin D into 24,25(OH)2D. The putative biological activity of 24,25(OH)2D remains unclear. Previous studies showed an increase in the circulating levels of this metabolite following a fracture in chicks. Our laboratory has engineered a mouse model deficient for the Cyp24a1 gene for studying the role of 24,25(OH)2D. We set out to study the role of 24,25(OH)2D in endochondral and intramembranous bone formation in mammalian fracture repair in this mouse model. Methods: Wild-type and Cyp24a1-deficient mice were subjected to two surgical procedures to simulate bone development and fracture repair. To mimic endochondral ossification, we devised a modified technique to perform intramedullary nailing of a tibia followed by an osteotomy. To evaluate intramembranous ossification, we applied distraction osteogenesis to tibiae using a mini Ilizarov external fixator. Histomorphometric parameters and gene expression differences in fracture repair between the mutant mice and the wild-type controls were measured using micro computed tomography, histology and reverse-transcription quantitative PCR. Results: Quantitative histomorphometric results showed a delay in endochondral fracture repair in the mutant as compared to wild-type mice. In the same model, gene expression of collagen type X in the callus was lower in the mutant mice. These significant differences were fully rescued by injecting the mutant mice with exogenous 24,25(OH)2D. In the intramembranous bone formation model, we found a trend towards reduced bone formation in the gap created by the distraction process in the mutant mice as compared to the wild-type mice. Conclusions: Our results support a role for CYP24A1 and its product 24,25(OH)2D in fracture repair which is more dominant in a chondrocyte-mediated bone formation pathway like endochondral ossification. Further study of the role of 24,25(OH)2D in bone healing has the potential to support novel approaches in accelerating bone formation and fracture repair. / La vitamine D est un régulateur important de l'homéostasie minérale et osseuse. L'enzyme CYP24A1 métabolise la vitamine D en 24,25(OH)2D. L'activité biologique de la 24,25(OH)2D demeure imprécise. Des études ont démontré que la 24,25(OH)2D est un métabolite important pour la réparation des fractures chez le poulet. Notre laboratoire a conçu un modèle de souris déficientes pour le gène Cyp24a1 afin d'étudier le rôle de la 24,25(OH)2D. Nous avons entrepris d'étudier le rôle de ce métabolite dans l'ossification endochondrale et intramembranaire pendant la réparation des fractures dans ce modèle de souris. Méthodes: les souris sauvages et Cyp24a1-mutantes ont été soumises à deux différentes procédures chirurgicales pour simuler la formation d'os pendant la réparation des fractures. Pour imiter l'ossification endochondrale, nous avons utilisé un clou intramédullaire afin de stabiliser le tibia après la fracture. Pour évaluer l'ossification intramembranaire, nous avons appliqué l'ostéogénèse par distraction sur le tibia à l'aide d'un appareil de fixation externe. Les paramètres histomorphométriques et l'expression génique au cours de la réparation de la fracture chez les souris mutantes et sauvages ont été mesurés par microtomographie, histologie et PCR quantitative (qRT-PCR), respectivement. Résultats: l'analyse histomorphométrique démontre un retard dans la réparation des fractures stabilisée par clou intramédullaire chez les souris mutantes par rapport au type sauvage. Dans le même modèle, l'expression du collagène de type X était plus élevée chez les souris de type sauvage. Ces différences significatives ont été entièrement corrigées par l'injection de 24,25(OH)2D exogène chez les souris mutantes. Dans le modèle d'ostéogénèse par distraction, nous avons trouvé une tendance vers la formation osseuse réduite chez les souris mutantes comparativement aux souris de type sauvage. Cependant, les différences observées n'étaient pas statistiquement significatives. Conclusion: Nos résultats suggèrent un rôle pour CYP24A1 et la 24,25(OH)2D dans la réparation des fractures par ossification endochondrale. Une étude plus approfondie du rôle de la 24,25(OH)2D pourrait conduire à l'utilisation de ce métabolite afin d'accélérer la formation osseuse et la réparation des fractures.

Introduction:Internal fixation of fractures in the presence of osteopenia has been associated with a failure rate as high as 25%. Enhancing bone formation and osseointegration of orthopaedic hardware is a priority when treating patients with impaired bone regenerative capacity. Fibroblast Growth Factor (FGF) 18 regulates skeletal development and could therefore have applications in implant integration. This study was designed to determine if FGF 18 promotes bone formation and osseointegration in the osteopenic FGFR3-/- mouse and to examine its effect on bone marrow derived mesenchymal stem cells (MSCs).Methods: In Vivo: Intramedullary implants were fabricated from 0.4 x 10mm nylon rods coated with 300nm of titanium by physical vapour deposition. Skeletally mature, age matched female FGFR3-/- and wild type mice received bilateral intramedullary femoral implants. Left femurs received an intramedullary injection of 0.1μg of FGF 18 (courtesy Merck Serono), and right femurs received saline only. Six weeks later, femurs were harvested, radiographed, scanned by micro CT, and processed for undecalcified for histology.In Vitro: MSCs were harvested from femurs and tibiae of skeletally mature age matched FGFR3-/- and wild type mice. Cells were cultured in Alpha Modified Eagle's Medium (αMEM) to monitor proliferation or αMEM supplemented with ascorbic acid and sodium beta-glycerophosphate to monitor differentiation. Proliferation was assessed through cell counts and metabolic activity at days 3, 6 and 9. Differentiation was assessed through staining for osteoblasts and mineral deposition at days 6, 9 and 12.Results: Wild type mice exhibited more peri-implant bone formation compared to FGFR3-/- mice. Peri-implant bone formation at the proximal metaphyseal-diaphyseal junction was increased in FGF18 treated femurs compared with contralateral control femurs in wild type (p = NS) and FGFR3-/- (p = 0.04) mice. Histological analysis corroborated micro CT findings, with FGF 18 treated FGFR3-/- femurs forming peri-implant bone instead of the fibrous response seen in controls. In vitro studies showed that FGF18 significantly increased MSC proliferation and metabolism in a dose dependent manner in wild type and FGFR3-/- mice. Osteoblast differentiation was inhibited by FGF18 in wild type MSCs, while no significant effect was observed in cells harvested from FGFR3-/- mice.Conclusion: FGF 18 increases bone formation and osseointegration of intramedullary implants in osteopenic mice and increases MSC proliferation in both the presence and absence of FGFR3. FGF18 also inhibits early osteoblast differentiation in the presence of FGFR3. FGF 18 mediated MSC proliferation and osteogenesis is likely due to signalling through an alternate FGFR, likely FGFR1 or 2. Additional work is needed to confirm the identity of the alternate FGFR and to evaluate its capacity to improve osseous healing in unfavourable in-vivo environments. / Introduction: La fixation interne de fractures dans la présence de l'ostéopénie a été associée à un taux d'échec aussi élevé que 25%. Amélioration de la formation osseuse et l'ostéo-intégration de matériel orthopédique est une priorité pour le traitement de patients. Facteur de croissance des fibroblastes (FGF) 18 régit le développement squelettique et pourrait donc avoir des applications dans intégration de l'implant. Cette étude a été conçue pour déterminer si le FGF 18 favorise la formation osseuse et l'ostéo-intégration dans le ostéopénique FGFR3-/- souris et d'examiner son effet sur la moelle osseuse provenant de cellules souches mésenchymateuses (CSM).Méthodes: Implants intramédullaires ont été fabriqués à partir de tiges de nylon 10mm x 0,4 revêtus de 300nm de titane par dépôt de vapeur physique. Les souris de type FGFR3-/- et souris de type sauvage a reçu des implants intramédullaires au femurs. Les fémurs gauche ont reçu une injection intra-médullaire de 0.1μg de FGF 18 (Merck Serono), et les fémurs droit ont reçu une solution saline seule. Après six semaines, les fémurs ont été récoltés, analysé par les micro CT, et préparé pour l'histologie. Les CSM ont été récoltées à partir de fémurs et les tibias de souris de type FGFR3-/ - et de type sauvage. Les cellules ont été cultivées dans 'Alpha Modified Eagle's Medium' (aMEM) pour surveiller la proliferation, ou cultivées dans un milieu 'aMEM' complété avec de l'acide ascorbique et de sodium bêta-glycérophosphate pour surveiller la différenciation. La prolifération a été évaluée par dénombrement des cellules et l'activité métabolique aux jours 3, 6 et 9. Différenciation a été évaluée par coloration pour les ostéoblastes et les dépôts minéraux aux jours 6, 9 et 12.Résultats: Les souris de type sauvage ont produit plus d'os péri-implantaire par rapport à FGFR3-/ - souris. La formation osseuse péri-implantaire à la jonction proximale métaphysodiaphysaire a été augmenté en fémurs traités avec FGF18 par rapport aux fémurs de contrôle controlatéraux dans de type sauvage (p > 0.05) et FGFR3-/ - (p = 0.04). L'analyse histologique a corroboré les conclusions micro CT. Les femurs FGFR3-/ - qui ont recus FGF 18 traités fémurs ont formé l'os autour de l'implant au lieu de la réponse fibreuse vu dans les contrôles. Des études in vitro ont montré que la proliferation du MSC ont été augmenté avec FGF18 d'une manière dose-dépendante pour les type sauvage et les type FGFR3-/ -. La différenciation des ostéoblastes a été inhibée par FGF18 pour les CSM du type sauvage. Aucun effet significatif sur la différenciation a été observé dans les cellules récoltées à partir de souris FGFR3-/ -.Conclusion: FGF 18 augmente la formation osseuse et l'ostéo-intégration des implants intramédullaires chez la souris ostéopéniques. FGF 18 augmente la prolifération des CSM à la présence et l'absence de FGFR3. FGF18 inhibe également la différenciation ostéoblastique a la présence de FGFR3. Les effets de FGF 18 sur le prolifération des CSM et l'ostéogenèse est probablement dû à la signalisation grâce à un FGFR alternative, probablement FGFR1 ou 2. Des travaux in vivo supplémentaires sont nécessaires pour confirmer l'identité de l'autre FGFR et d'évaluer sa capacité à améliorer la cicatrisation de l'os en environnements défavorable

Temozolomide (TMZ) is a DNA methylating agent currently used for the treatment of several types of glial tumours, including glioblastomas (GBM). While improved patient response has been observed with concomitant TMZ and radiotherapy followed by adjuvant TMZ treatment following surgical resection in GBM, increased TMZ treatment showed no benefits in overall survival. This indicates that intrinsic factors such as DNA injury and repair may be crucial to patient response. The first purpose of this research was to develop an assay to quantitatively detect N7-methylguanine (N7-MeG) and O6-methylguanine (O6-MeG) using Liquid Chromatography and Mass Spectrometry (LC/MS). We then were able to detect N7-MeG and O6-MeG in human glial tumours and normal tissue regions of 31 patients with grade II to grade IV gliomas treated neoadjuvantly with 75 mg/m2/day for 14 days prior to surgery. In addition, N7-MeG and O6-MeG levels were also assessed in tumour regions of 6 untreated control patients. In all, 114 treated tumour samples, 12 treated normal and 19 untreated tumour samples were analyzed. There were significantly higher N7-MeG and O6-MeG levels detected in treated patient tumour samples when compared to untreated tumour samples. We observed intra- and inter-patient variability in N7-MeG and O6-MeG levels in all grades. In treated tumour samples, a negative correlation was seen between N7-MeG and O6-MeG levels across all grades. Increased N7-MeG levels and decreased O6-MeG levels were observed with increased malignancy. Astrocytoma samples showed significantly higher O6-MeG/N7-MeG ratios, than oligodendrogliomas, anaplastic astrocytomas and GBM tissues. No correlation was observed between MGMT protein repair activity and N7-MeG and O6-MeG levels. Samples with methylated MGMT promoters however showed significantly higher O6-MeG and O6-MeG/N7-MeG levels when compared to samples with unmethylated promoters. These results are the first in the literature to detect N7-MeG and O6-MeG induced DNA injury in human gliomas and human normal tissues and provides an experimental paradigm to help in the determination of patient response to TMZ. / Le témozolomide (TMZ) est un agent alkylant actuellement utilisé pour traiter plusieurs types de tumeurs cérebrales, dont les glioblastomes (GBM). Suivant une résection chirurgicale de la tumeur, les patients atteints de GBM sont ensuite traités par radiothérapie standard et chimiothérapie avec le TMZ. Malgré les progrès observés chez ces patients, une augmentation de la dose de TMZ lors de la chimiothérapie n'a pas démontré d'amélioration du devenir des patients. Ceci pourrait indiquer que l'accumulation des lésions cytotoxiques et leurs réparations sont importantes pour l'évolution des tumeurs ou la survie du patient. Dans cette étude, nous avons pour objectif de développer une méthode sensible et stable pour la détection quantitative du N7-methylguanine (N7-MeG) et O6-methylguanine (O6-MeG) par chromatographie liquide et spectrométrie de masse. Chez 31 patients atteints de tumeurs gliales de grade II à IV, nous avons été capable de détecter le niveau de N7-MeG et O6-MeG dans les échantillons des substances grises, blanches et de plusieurs régions du tissus cancéreux. Ces patients ont été traités quotidiennement avec 75 mg/m2/de TMZ pendant 14 jours avant d'être opérés. Nous avons aussi détectés N7-MeG et O6-MeG dans plusieurs régions de tissus tumoraux de 6 patients non-traités. Au total, nous avons analysés au total 114 échantillons de tumeurs traitées, 12 échantillons de tissus cérébraux traités et 19 échantillons de tumeurs non-traitées. Suite à cette analyse, nous avons observé des niveaux de N7-MeG et O6-MeG supérieurs dans les échantillons des patients traités comparativement aux patients non-traités. D'importantes variations du niveau intra- et inter-patients de N7-MeG et O6-MeG ont été détectées. Dans les échantillons traités, nous avons observé une corrélation négative entre les niveaux de N7-MeG et O6-MeG. Nous avons observé qu'une croissance de la malignité est associée avec une augmentation du niveau de N7-MeG et une diminution du niveau de O6-MeG. De plus, nous avons noté que le ratio de O6-MeG/N7-MeG est significativement plus élevé dans les échantillons d'astrocytomes traités en comparaison avec les oligodendrogliomes, astrocytomes anaplastiques et GBM traités. Nous n'avons pas observé de corrélation entre le niveau de O6-MeG ou de O6-MeG/N7-MeG et l'activité réparative du MGMT. Toutefois, nous avons pu détecter des niveaux de O6-MeG et O6-MeG/N7-MeG plus élevés dans les échantillons avec un promoteur de MGMT méthylé en comparaison avec les échantillons non-méthylés. Ces résultats démontrent pour la première fois l'accumulation des lésions N7-MeG et O6-MeG due au traitement par le TMZ dans des tissus cérébraux et des tumeurs gliales.

Human cartilage does not have the capacity for parent-like regeneration; instead, following injury, there is a programmed attempt at regeneration that ultimately results in fibrocartilage formation. This lack of intrinsic repair has been attributed to the avascular state of the tissue and chondrocyte dedifferentiation towards a cell incapable of type II collagen production and with altered responsiveness to the structural and regulatory mediators within its microenvironment. For several decades, debate has existed regarding the role Transforming Growth Factor-Beta (TGF-P) plays in modulating articular cartilage. Blocking of TGF-p signaling in mice by a dominant negative type II TGF-p receptor and transgenic knockouts of Smad 3, a central mediator of TGF-p signaling, result in osteoarthritic-like phenotypes, whereas local up-regulation of TGF-p promotes cartilage healing in degenerative joint disease models. Despite TGF-p being implicated as a key player In the regulation of chondrocyte phenotype and extracellular matrix (ECM), little is known about TGF-p action in human chondrocytes. These investigations have established a critical link between variation in TGF-p receptor expression at the cell surface and TGF-p action in cartilage. In addition to the TGF-p signaling receptors, the presence of betaglycan and RIIB (a spliced variant of the type II signaling receptor) was confirmed on human chondrocytes. Moreover, the expression of three novel TGF-p receptors was identified, namely Sol RI (a soluble form of the type I receptor), Alk-l, and endoglin. These receptors formed a variety of heteromeric complexes and regulated TGF-p signaling. More importantly, RIIB and endoglin were demonstrated to regulate type II collagen levels and evidence was provided that they likely represent chondrocyte phenotypic markers. A critical link between endoglin expression, cell phenotype, TGF-~ responsiveness, and ECM was established. These results demonstrate the formation of TGF-~ receptor heteromeric complexes of various subtype composition on chondrocytes suggesting that such complexes may regulate TGF-~ signaling pathways in those cells. Cell surface TGF-~ binding proteins, acting as phenotypic markers in human cartilage, are potential modulators of complex interactions between the cell and its microenvironment. Therefore, novel TGF-~ receptors may provide an avenue to regulate the effects ofTGF-~ locally and establish new insights into cartilage regeneration or repair.

Aging is the consequence ofan array of phenotypic variations that appear to involve intrinsic or constitutional properties in all cells and systems, including qualitative and quantitative alterations in development, maturational structure and function. The aging process in bone involves a set ofchanges in bone cells differentiation, interaction and premature death. Osteoblasts are the cells most affected during the aging process in bone due to their complex mechanisms ofdifferentiation, their interaction with honnones and growth factors and their progression to apoptosis.

Multiple Organ Dysfunction Syndrome (MODS) is associated with high mortality in patients admitted to the surgical intensive care unit (SICU). MODS begins with a systemic response described as Systemic Inflammatory Response Syndrome (SIRS). Studies on SIRS patients may provide an insight into the mechanisms by which SIRS progresses to MODS. In this thesis, the interactions between circulating polymorphonuclear neutrophils (PMNs) from patients with SIRS and endothelial cells (ECs) from human umbilical veins were measured in order to elucidate the mechanism for PMN adhesion and subsequent cytotoxicity of the ECs. PMNs from patients with SIRS were compared to PMNs from pre-operative surgical patients without SIRS and with healthy control subjects, in vitro. The results showed that PMNs adherence to ECs increased progressively from healthy controls to patients with SIRS. PMN-HUVE cytotoxicity, however, did not show this trend. PMNs from SIRS patients treated with lipopolysaccharide, unlike PMNs from patients without SIRS or healthy controls, showed no increase in PMN-EC adhesion. The results also showed that EC activation with TNF-$ alpha$ and Il-1$ beta$ led to high levels of PMN-EC adhesion and cytotoxicity, whereas PMN treatment with lipopolysaccharide played a lesser role. Autologous plasma provided significant protection from PMN mediated EC damage. From this data I conclude that activation of the EC by cytokines associated with SIRS is far more important in promoting PMN-EC adhesion and subsequent cytotoxicity than PMN stimulation with lipopolysaccharide and that there are host factors in plasma that modulate this response.