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Validation de méthodes de transfert de cellules souches embryonnaires humaines pour la thérapie de la cardiomyopathie associée à la dystrophie musculaire de Duchenne / Validation of methods to transfer human embryonic stem cells for the therapy of the cardiomyopathy associated with Duchenne muscular dystrophy

Pouillot, Séverine 25 November 2008 (has links)
La cardiomyopathie associée à la DMD est une atteinte pour laquelle il n’existe pas actuellement de traitement. Les cellules souches embryonnaires humaines (hES), par leurs propriétés d’autorenouvellement et de différenciation, sont envisagées comme outil thérapeutique. Pour une recherche sur l’implantation de cellules, il n’existait pas de modèle in vitro au long cours. Nous avons ainsi développé un modèle de culture organotypique de tranches de cœur dans lequel nous avons, plusieurs mois après transplantation, retrouvé les cellules hES greffées, différenciées en cardiomyocytes. Par ailleurs, nous avons optimisé la différenciation cardiaque pour améliorer le rendement en cardiomyocytes, en induisant la différenciation cardiaque et en cultivant les cellules hES en bioréacteur. Le modèle d’étude au long terme permettant le suivi des cellules greffées dérivées de cellules hES nous permettra de valider les premières étapes précédant les études in vivo dans des modèles pathologiques. / Cardiomyopathy associated with DMD is a frequent occurrence with no treatment. Human embryonic stem cells (hESC), because of their self-renew differentiation properties are the best candidates to cardiac cellular therapy. To investigate cells implantation, there was no long term in vitro model. Thus, we have developed an organotypic model of heart slices in which we have, several months after transplantation, found grafted hES cells with evidence of cardiac differentiation. In addition, we have optimised cardiac differentiation to improve cardiac yield, inducing cardiac differentiation and cultivating hES cells in bioreactors. During long term culture model allows the study of grafted hES cells, combines to hESC-derived cells in reasonable number and purity, will constitute validation of the first steps before in vivo studies in pathological models.

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