Saccharomyces cerevisiae mielės yra vienas plačiausiai rekombinantinių baltymų gamybai, todėl šio darbo metu buvo kuriamos mielių S. cerevisiae raiškos sistemos, skirtos sintetinti tioredoksino geną arba gliukozės dehidrogenazės geną sujungtą su Abeta peptidu. Atrinkus stabilius hibridinių baltymų producentus, jie buvo auginami įvairiose kultyvavimo terpėse, keičiant temperatūrą bei indukcijos laiką. Tokiu būdu parenkamos optimalios kultūrų auginimo sąlygos, užtikrinančios didžiausias gaminamo baltymo kiekius. Šio darbo metu sukonstruoti mielių raiškos vektoriai, kuriuose hibridinių baltymų - tioredoksino sujungto su Abeta peptidu (Trx-ab) bei ir gliukozės dehidrogenazės sujungtos su Abeta peptidu (GDH-ab) - raiška yra reguliuojama galaktoze indukuojamu GAL-CYC1 promotoriumi. Atlikus sėkmingą Saccharomyces cerevisiae 21PMR mielių kamieno transformaciją rekombinantinėmis plazmidėmis, atrinkti optimalūs heterologinių baltymų gamintojai. Ištyrus sukonstruotas DNR plazmides, nustatytas didelis (90-95%) auksotrofinių markerių stabilumas ir tik apie 50% Trx-ab arba GDH-ab genų išsilaikymas mielėse. Sukonstruotos viduląstelinės ir ekstraląstelinės mielių ekspresijos sistemos, užtikrinančios tioredoksino sujungto su Abeta peptidu sintezę. Optimizuotos mielių auginimo sąlygos bei baltymų gryninimo procedūros ir nustatyta, kad didžiausias hibridinio darinio lygis stebimas viduląstelinio gamintojo citoplazminėje frakcijoje. Ištirti gliukozės dehidrogenazės geno bei hibridinio darinio... [toliau žr. visą tekstą] / The principal advantages of S. cerevisiae yeast to express recombinant proteins was used to study expression peculiarities of the fused bacterial thioredoxin or glucose dehydrogenase genes with Abeta peptide sequence. In the next step of this work we investigated the growth conditions of stabily persisting yeast transformants in order to achieve a maximal production of the hybrid proteins. In the present work yeast expression vectors bearing either thioredoxin-encoding gene fused with Abeta peptide (Trx-ab) or its mutant sequence or glucose dehydrogenase gene fused with Abeta (GDH-ab) under the control of galactose-inducible GAL-CYC1 promoter were constructed. After successful transformation of yeast Saccharomyces cerevisiae strain 21PMR the eukaryotic producents of the hybrid proteins were isolated. Analysis of stability of heterologous expression plasmids indicated 90-95% maintenance of auxotrofic markers and only 50% - that of Trx-ab or GDH-ab genes. Intracellular and extracellular yeast expression system were designed to ensure synthesis of tioredoxin fused with Abeta peptide. Optimization of yeast cultivation conditions and purification procedures showed that the highest level of hybrid protein is observed in the cytoplasmic fraction of intracellular producent. Expression pecularities of the glucose dehydrogenase gene and its hybrid, bearing an additional Abeta peptide sequence, controlled by constitutive ADH1 and galactose-inducible GAL-CYC1 promoters in yeast S... [to full text]

Darbo objektas – alksnio genties medžiai (juodalksnis (Alnus glutinosa L.), baltalksnis (Alnus incana L.) ir hibridinis (gauruotasis) alksnis (Alnus x hybrida A. Braun ex Rcchb). Darbo tikslas – ištirti hibridinio alksnio (Alnus x hybrida A. Braun ex Rcchb) mikrodauginimo audinių kultūroje sąlygas ir išauginti augalus – regenerantus. Darbo metodai – šiame darbe pasirinktas informacijos rinkimo metodas – eksperimentinis tyrimas. Eksperimentinio tyrimo etapai: 1. eksplantų paruošimas sterilinimui ir sterilinimas; 2. maitinamosios terpės ruošimas; 3. augalų regenerantų kultivavimas; 4. duomenų rinkimas, apdorojimas ir rezultatų analizė. Darbo rezultatai: Dauginamosios medžiagos sterilinimui tinkamiausias yra aseptikas „ACE“ ir sidabro nitratas AgNO3, nes priklausomai nuo genotipo, 89–93 procentai eksplantų išliko be užkrato. Nepaisant genotipo kalius 100 procentų susidarė ant visų mikroūglių, skyrėsi tik jo susidarymo laikas. Nustatyta, kad tinkamiausias mikroūglių regeneracijai yra BAP (citokininas) augimo reguliatorius. Hibridinis alksnis mikroūglių skaičiumi aplenkė juodalksnį ir baltalksnį. Didžiausias dauginimo galimybes turi alksnio hibridas, nes iš vieno kaliaus išaugusių mikroūglių skaičius buvo didžiausias. / Final work of University Postgraduate Studies studied the hybrid alder tissue culture and micropropagation of plants–regenerants grown. Research subject – genus alder trees (alder (Alnus glutinosa L.), gray alder (Alnus incana L.) and hybrid (Woolly) alder (Alnus x hybrida A. Braun ex Rcchb). Research aim – to investigate the hybrid alder (Alnus x hybrida A. Braun ex Rcchb) micropropagation conditions in the culture of tissue and to grow crops–regenerants. The experimental phases of the study: 1. the preparation to sterilized explants and sterilization; 2. the preparation of nutrient medium; 3. the cultivation of regenerants–plants; 4. collection, processing of data and analysis of the results. The results – The aseptic „ACE“ and silver nitrate AgNO3 is the most suitable for the sterilization, because depending on the genotype, 89-93 percent of the explants remained free of infection. Despite of genotype callus formed 100 percent on the every microshoots, only in the different time of life. It was found out the best growth regulator of microshoots regeneration is BAP (cytokinin). Hybrid alder by the number of microshoots outsriped alder and gray alder. The biggest opportunities of propagation has hybrid alder because the biggest number of microshoots grown from a single callus.

Šiame darbe nagrinėjama negiljotininio, dvimačio, stačiakampių pjaustymo uždavinio atliekų minimizavimo problema ir jos sprendimo metodai. Dėl uždavinio kombinatorinio sudėtingumo neįmanoma tiksliai ir visais atvejais pateikti optimalų jo sprendinį, todėl pasirinkti apytiksliai sprendimo metodai. Uždavinys sprendžiamas metaeuristiniais hibridiniais genetiniu ir modeliuojamo atkaitinimo algoritmais apjungtais su euristiniais „Žemiausio kairėn užpildymo“ ir „Žemiausio tarpo“, kuris yra originali „Geriausiai tinkamo“ metodo modifikacija. Taip pat realizuojami minėti euristiniai algoritmai atskirai nuo hibridinių. Atliekama šių metodų lyginamoji analizė bei jų parametrų ir pradinių sąlygų parinkimo įtakos tyrimas sprendinio kokybei. Suformuojama ir pateikiama metodika pjaustymo uždavinių sprendimui. / A non – guillotinable, two – dimensional, rectangular cutting stock problem is being introduced in this paper and its solving methods either. Due to the combinatorial complexity of a problem, it is impossible to solve it optimally for every instance. Consequently an aproximate methods have been chosen. The problem is solved by metaheuristic genetic and simulated annealing methods hybridised with heuristic „Bottom Left Fill“ and „Lowest Gap“, which is an originally modified version of „Best Fit“ algorithm. The same heuristic algorithms are implemented separately from hybridised ones. A comparation analysis of these methods is done and the influence on solution quality depending on the selection of algorithms parameters and its initial conditions is considered. The methodology of solving cutting stock problems is being formulated and presented.

Lietuvoje, tvarkant nedidelius nuotekų kiekius iškyla nemažai sunkumų. Labai svarbu parinkti tokią technologiją, kurią taikant nuotekos būtų išvalomos iki nustatytų normų, ji būtų nesudėtinga ir pigi.. Anaerobinėse nuotekų valyklose nenaudojama elektra. Tai yra šių nuotekų valyklų privalumas, tačiau jose iškyla problemų valant nuotekas iki leistinų koncentracijų. Magistrantūros baigiamąjame darbe apibendrinti 2004 – 2006 m. atlikti Šilutės r. Žemaičių Naumiesčio nuotekų valyklos veikimo efektyvumo tyrimai ir analizuojamos priežastys, dėl kurių nepakankamai išvalomos nuotekos. Nustatyta nuotekų išbuvimo anaerobiniame hibridiniame įrenginyje trukmė ir apskaičiuotas jo tūrio panaudojimo koeficientas. Gauta, kad panaudojama tik maža įrenginio tūrio dalis dėl netolygaus nuotekų pasiskirstymo anaerobinio įrenginio talpykloje. / In Lithuania the problem of low wastewater treatment efficiency in anaerobic hybrid reactors also rised. It was determined that one of main reasons of bad wastewater treatment quality in anaerobic hybrid reactors was insufficient volume of equipment and the equipment would be cheap and not complicated. In anaerobic wastewater are not used an electricity. And it is an advantage of wastewater, but there are also problems in cleaning wastewater until permissible concentrations. In the article are generalized 2004-2006 year researches Silutes area in Zemaiciu Naumiestis about wastewater treatment efficiency and analysed reasons for which are insufficient cleaned wastewater treatment. In anaerobic hybrid reactor the efficiency of wastewater treatment depends on volume load. There are found, that are used just small part of volumetric load because of uneven wastewater repartition in anaerobic reactor repository.