O clareamento dental é um procedimento que está diretamente relacionado à estética dental e cabe ao profissional de odontologia conhecer e dominar os diferentes materiais, métodos de ativação e técnicas de clareamento. Este estudo ¨In Vitro¨ avaliou comparativamente o aumento de temperatura intra-câmara pulpar durante o clareamento em consultório ativado com diferentes fontes de luz com e sem gel clareador. Foi selecionado 1 incisivo central superior humano, seccionado na porção radicular 3 mm abaixo da junção cemento-esmalte. O canal radicular foi alargado para permitir a introdução do sensor do termômetro dentro da câmara pulpar. A câmara pulpar foi preenchida com uma pasta térmica (C.N.P.J. 52.891. 405/0001-60, Implastec Electroquímica, Votorantim, SP), a fim de permitir a transferência de calor das paredes dentárias para o sensor de um termômetro digital com termopar tipo K (MT- 401A) durante o clareamento. A porção radicular do dente foi submersa em água a 37º C elevando a câmara pulpar a mesma temperatura. Um agente clareador fotossensível à base de peróxido de hidrogênio a 35% (Lase Peroxide DMC Equipamentos) foi utilizado. Para a ativação do gel foram empregados quatro aparelhos com diferentes fontes de luz: luz halógena (Spectrum Dentsply); luz híbrida à base de LED e Laser Diodo (Ultra Blue IV DMC Equipamentos); LED (Smart Lite PS Dentsply) e LED verde (D Light Green - Kondortech). As ativações foram feitas de acordo com as especificações do fabricante. com seis aplicações para cada grupo. Os resultados foram submetidos a ANOVA a dois critérios e teste de Tukey (p 0,05). Os grupos estudados e as medias do aumento da temperatura foram: D - Light Green sem gel (37ºC) A, D - Light Green com gel (37,17ºC) A, Smart Lite sem gel (39,17ºC) C, Smart Lite com gel (40ºC) D, Ultra Blue IV sem laser sem gel (38ºC) B, Ultra Blue IV sem laser com gel (39,17ºC) C, Ultra Blue IV com laser sem gel (38, 17ºC) B, Ultra Blue IV com laser com gel (39,33ºC) C, Spectrum sem gel (39,17ºC) C e Spectrum com gel (40,83ºC) E. Todas as lâmpadas apresentaram aumento da temperatura intracâmara pulpar, com exceção do D - Green Light, sem atingir a temperatura crítica de 5,5ºC. A fonte de luz halógena com gel apresentou o maior aumento de temperatura. / The purpose of this In Vitro study was to measure the intrapulpal temperature rise induced by various light sources and a bleaching gel. The root portion of an intact human maxillary central incisor was sectioned with a diamond disk 3 mm below the cement enamel junction. The apical foramen of the root was enlarged and remaining pulp tissue was removed. The empty pulp chamber was filled with a heat sink compound and a thin K-type thermocouple was introduced into the pulp chamber. The root surface of the tooth was partially submerged in a water bath during the testing procedure at 37°C elevating the pulp chamber at the same temperature. A 35% hydrogen peroxide bleaching gel (Lase Peroxide - DMC Equipamentos) containing heat enhanced colorants was applied to the vestibular tooth surface. Light units used were a conventional tungsten quartz halogen (Spectrum Dentsply), a LED/Laser device (Ultra Blue IV DMC Equipamentos), a high intensity LED (Smart Lite PS Dentsply) and a green LED light (D Light Green - Kondortech). A pilot study and a statistical analysis were made to determine the number of application needed. Six applications were made for each system and gel combination. Differences between the starting temperature and final temperature reading were taken and the calculated temperature changes were averaged to determine the mean value in temperature rise. Temperature rise values were compared using two-way analysis of variance (ANOVA) at a preset alfa of 0.05. Temperature rise varied significantly depending on the type of light used and in presence or absent of bleaching gel. The conventional tungsten quartz halogen lamp with bleaching gel induced significantly higher temperature increases than any other curing unit (3,83°C). The green light-emitting diode unit without gel produced no temperature changes. Almost as a rule, the presence of bleaching gel resulted in a significant intrapulpal temperature increase (approximately 1ºC) over that reached using no gel. However, light bleaching systems thus increase intrapulpal temperature, all the procedures used in this study were below the critical level of 5,5ºC.

A terapia fotodinâmica antimicrobiana é uma promissora alternativa para sanificação de tecidos infectados. Entretanto, esta modalidade terapêutica apresenta diferenças quanto à sua eficiência sobre diferentes microrganismos, de acordo com sua morfologia e fisiologia. A associação de H2O2 e PDT pode aumentar a eficiência de ambos os tratamentos, principalmente em infecções provocadas por microrganismos Gram negativos. O objetivo deste trabalho é investigar o efeito antimicrobiano sinérgico existente na reação fotodinâmica em presença do peróxido de hidrogênio e esclarecer os mecanismos envolvidos neste processo fotobioquímico. O efeito fotodinâmico foi avaliado, in vitro, através da redução microbiana de três microrganismos: Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa e Candida albicans na presença e ausência de H2O2, resultando no aumento de eficiência quando associada ao H2O2. Para elucidar os mecanismos envolvidos no aumento da redução microbiana observada, foram avaliadas, por detecção direta e indireta, a produção de superóxido, radical hidroxila e oxigênio singleto na presença de H2O2 e em sua ausência. Os resultados mostraram que na presença de H2O2 ocorre uma supressão nos mecanismos fotoquímicos, resultado em uma menor produção de espécies reativas de oxigênio. Comparando-se a redução bacteriana em Escherichia coli provocada pelo uso das terapias em separado, ou agindo em conjunto, e confrontando a quantidade de fotossensibilizador captado pelo microrganismo após condicionamento com H2O2 e após PDT, os resultados indicam que os mecanismos de ação da associação PDT e H2O2 podem ser bioquímicos. Os resultados obtidos mostram que em associação com H2O2, a PDT antimicrobiana tem sua eficiência aumentada, produzindo maior redução microbiana em diferentes microrganismos, entretanto, a dinâmica de formação de espécies reativas de oxigênio na presença do peróxido mostrou menor eficiência, tanto para reação tipo I como para reação tipo II. A avaliação dos mecanismos bioquímicos envolvidos neste processo mostra que há um aumento da captação do fotossensibilizador pelo microrganismo após condicionamento prévio da célula com H2O2. / Antimicrobial photodynamic therapy is a promising approach for tissue disinfection. However, this therapy does not have the same efficiency over different microorganisms, according to their morphology and physiology. The use of PDT associated to H2O2 could be able to improve the efficiency of both therapies and achieve better results, mainly over Gram negative infections. The aim of this study is to demonstrate the antimicrobial effect in the photodynamic reaction in the presence of H2O2 and clarify the mechanisms involved in this photo-chemical-biological process. The photodynamic process was evaluated, in vitro, through the microbial killing of Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa and Candida albicans in the presence and absence of H2O2. The association resulted in an improvement of the phototherapy when it was associated with H2O2. To elucidate the mechanisms responsible for the more efficient microbial killing, the process was directly and indirectly evaluated regard to the production of superoxide, hydroxyl radicals and singlet oxygen when the photosensitizer was in H2O or H2O2 solution. The results showed that in the presence of H2O2, the photo-chemical process was decreased and the production of reactive oxygen species was lower than expected. Comparing the microbial killing of Escherichia coli using the therapies alone or together and facing to the photosensitizer uptake after H2O2 incubation, the results indicated a biochemical mechanism instead a photochemical improvement. The data demonstrated that the association of H2O2 and antimicrobial PDT achieved higher microbial reduction over different microorganisms, but conversely than expected, the production of reactive oxygen species in the presence of H2O2 was lower for type I reaction and also for type II reaction. The evaluation of the biochemical mechanisms involved in this association showed an improvement in the photosensitizer uptake after previous conditioning of the cell with H2O2.

A terapia fotodinâmica antimicrobiana é uma promissora alternativa para sanificação de tecidos infectados. Entretanto, esta modalidade terapêutica apresenta diferenças quanto à sua eficiência sobre diferentes microrganismos, de acordo com sua morfologia e fisiologia. A associação de H2O2 e PDT pode aumentar a eficiência de ambos os tratamentos, principalmente em infecções provocadas por microrganismos Gram negativos. O objetivo deste trabalho é investigar o efeito antimicrobiano sinérgico existente na reação fotodinâmica em presença do peróxido de hidrogênio e esclarecer os mecanismos envolvidos neste processo fotobioquímico. O efeito fotodinâmico foi avaliado, in vitro, através da redução microbiana de três microrganismos: Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa e Candida albicans na presença e ausência de H2O2, resultando no aumento de eficiência quando associada ao H2O2. Para elucidar os mecanismos envolvidos no aumento da redução microbiana observada, foram avaliadas, por detecção direta e indireta, a produção de superóxido, radical hidroxila e oxigênio singleto na presença de H2O2 e em sua ausência. Os resultados mostraram que na presença de H2O2 ocorre uma supressão nos mecanismos fotoquímicos, resultado em uma menor produção de espécies reativas de oxigênio. Comparando-se a redução bacteriana em Escherichia coli provocada pelo uso das terapias em separado, ou agindo em conjunto, e confrontando a quantidade de fotossensibilizador captado pelo microrganismo após condicionamento com H2O2 e após PDT, os resultados indicam que os mecanismos de ação da associação PDT e H2O2 podem ser bioquímicos. Os resultados obtidos mostram que em associação com H2O2, a PDT antimicrobiana tem sua eficiência aumentada, produzindo maior redução microbiana em diferentes microrganismos, entretanto, a dinâmica de formação de espécies reativas de oxigênio na presença do peróxido mostrou menor eficiência, tanto para reação tipo I como para reação tipo II. A avaliação dos mecanismos bioquímicos envolvidos neste processo mostra que há um aumento da captação do fotossensibilizador pelo microrganismo após condicionamento prévio da célula com H2O2. / Antimicrobial photodynamic therapy is a promising approach for tissue disinfection. However, this therapy does not have the same efficiency over different microorganisms, according to their morphology and physiology. The use of PDT associated to H2O2 could be able to improve the efficiency of both therapies and achieve better results, mainly over Gram negative infections. The aim of this study is to demonstrate the antimicrobial effect in the photodynamic reaction in the presence of H2O2 and clarify the mechanisms involved in this photo-chemical-biological process. The photodynamic process was evaluated, in vitro, through the microbial killing of Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa and Candida albicans in the presence and absence of H2O2. The association resulted in an improvement of the phototherapy when it was associated with H2O2. To elucidate the mechanisms responsible for the more efficient microbial killing, the process was directly and indirectly evaluated regard to the production of superoxide, hydroxyl radicals and singlet oxygen when the photosensitizer was in H2O or H2O2 solution. The results showed that in the presence of H2O2, the photo-chemical process was decreased and the production of reactive oxygen species was lower than expected. Comparing the microbial killing of Escherichia coli using the therapies alone or together and facing to the photosensitizer uptake after H2O2 incubation, the results indicated a biochemical mechanism instead a photochemical improvement. The data demonstrated that the association of H2O2 and antimicrobial PDT achieved higher microbial reduction over different microorganisms, but conversely than expected, the production of reactive oxygen species in the presence of H2O2 was lower for type I reaction and also for type II reaction. The evaluation of the biochemical mechanisms involved in this association showed an improvement in the photosensitizer uptake after previous conditioning of the cell with H2O2.

Uroguanilina (UGN) é um peptídeo normalmente sintetizado no intestino que modula o balanço de sódio através de ações renais. Investigamos os efeitos e os mecanismos de sinalização envolvidos na ação da UGN sobre a secreção de H+, em túbulos renais de ratos e em células LLC-PK1 (proximais) e MDCK-C11 (distais). Nos estudos in vivo foi utilizada a técnica de microperfusão estacionária, na qual medimos a secreção de H+ em túbulos proximais e distais de rins de rato, utilizando um microeletrodo sensível a H+. Nos estudos in vitro, para medir a atividade de NHE3 e H+-ATPase, utilizamos microscopia de fluorescência, usando BCECF como sonda sensível a pH. Nossos dados indicam que UGN inibe a secreção de hidrogênio em túbulos proximais e em células LLC-PK1 por um mecanismo dependente da inibição do permutador NHE3, envolvendo a ativação de PKG e PKA. Nosso estudo também sugere que UGN inibe a secreção de hidrogênio em túbulos distais de rato e em células MDCK-C11, envolvendo a inibição da atividade da H+-ATPase por um mecanismo dependente de PKG / Uroguanylin (UGN) is a peptide usually synthesized in the intestine that modulates sodium balance through actions on the kidney. We investigate the effects and signaling mechanisms involved in the UGN action on hydrogen secretion in rat renal tubules and in LLC-PK1 and MDCK-C11 cells. In the in vivo studies we used the stationary microperfusion method, measuring hydrogen secretion in proximal and distal tubules by a H+ sensitive microelectrode. In the in vitro studies, we used fluorescence microscopy to measure the activity of NHE3 and H+-ATPase, using BCECF as pH sensitive dye. Our data indicate that UGN inhibits the hydrogen secretion in proximal tubules and in LLC-PK1 cells by a mechanism dependent on the inhibition of NHE3, involving the activation of PKG and PKA. Our study also suggests that UGN inhibits hydrogen secretion in distal tubules and MDCK-C11 cells., and the inhibition of H+-ATPase by a mechanism dependent on PKG is involved in this distal effect of UGN.

COELHO, Marcelo Nunes. Espectroscopia Raman de policristais de clorohidrato de L-cisteína sob altas pressões. 2010. 65 f. Dissertação (Mestrado em Física) - Programa de Pós-Graduação em Física, Departamento de Física, Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2010. / Submitted by Edvander Pires (edvanderpires@gmail.com) on 2015-05-20T20:21:35Z No. of bitstreams: 1 2010_dis_mncoelho.pdf: 7414214 bytes, checksum: 1516b206d2a72c00866229ec255a2361 (MD5) / Approved for entry into archive by Edvander Pires(edvanderpires@gmail.com) on 2015-05-22T20:07:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_dis_mncoelho.pdf: 7414214 bytes, checksum: 1516b206d2a72c00866229ec255a2361 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-22T20:07:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_dis_mncoelho.pdf: 7414214 bytes, checksum: 1516b206d2a72c00866229ec255a2361 (MD5) Previous issue date: 2010 / Neste trabalho foi feito o estudo do comportamento dos modos vibracionais presentes nos espectros Raman de policristais de cloridrato de L-cisteína, submetidos a condições diversas de press~ao entre 0 e 6,86 GPa. Para as medidas de pressão foi utilizada uma célula de pressão com extremos de diamante do tipo National Bureau of Standard. Veri ficou-se uma mudança significativa em praticamente todas as regiões do espectro Raman da amostra, por volta de 0,8 GPa, inclusive na região relacionada aos modos da rede. Essa alteração nos espectros é um indicativo de que uma transição de fase estrutural ocorreu nesse valor de pressão. Neste valor de pressão também foi observado o surgimento de uma banda que foi associada a uma vibração de estiramento CC e uma banda entre 3300 e 3400cm-1. Entre 1,66 e 2,31 GPa ocorrem mudanças em alguns modos internos, embora não estejam associadas a alguma transicão de fase. Veri cou-se também, que algums espectros apresentam mudanças suaves entre 3,5 e 4,5 GPa. Embora elas não ocorram na região dos modos externos e, portanto, não estejam associadas à mudança de simetria do cristal. Finalmente, fazendo-se um estudo de descompressão, compreende-se que a transição de fase é reversível.

Uroguanilina (UGN) é um peptídeo normalmente sintetizado no intestino que modula o balanço de sódio através de ações renais. Investigamos os efeitos e os mecanismos de sinalização envolvidos na ação da UGN sobre a secreção de H+, em túbulos renais de ratos e em células LLC-PK1 (proximais) e MDCK-C11 (distais). Nos estudos in vivo foi utilizada a técnica de microperfusão estacionária, na qual medimos a secreção de H+ em túbulos proximais e distais de rins de rato, utilizando um microeletrodo sensível a H+. Nos estudos in vitro, para medir a atividade de NHE3 e H+-ATPase, utilizamos microscopia de fluorescência, usando BCECF como sonda sensível a pH. Nossos dados indicam que UGN inibe a secreção de hidrogênio em túbulos proximais e em células LLC-PK1 por um mecanismo dependente da inibição do permutador NHE3, envolvendo a ativação de PKG e PKA. Nosso estudo também sugere que UGN inibe a secreção de hidrogênio em túbulos distais de rato e em células MDCK-C11, envolvendo a inibição da atividade da H+-ATPase por um mecanismo dependente de PKG / Uroguanylin (UGN) is a peptide usually synthesized in the intestine that modulates sodium balance through actions on the kidney. We investigate the effects and signaling mechanisms involved in the UGN action on hydrogen secretion in rat renal tubules and in LLC-PK1 and MDCK-C11 cells. In the in vivo studies we used the stationary microperfusion method, measuring hydrogen secretion in proximal and distal tubules by a H+ sensitive microelectrode. In the in vitro studies, we used fluorescence microscopy to measure the activity of NHE3 and H+-ATPase, using BCECF as pH sensitive dye. Our data indicate that UGN inhibits the hydrogen secretion in proximal tubules and in LLC-PK1 cells by a mechanism dependent on the inhibition of NHE3, involving the activation of PKG and PKA. Our study also suggests that UGN inhibits hydrogen secretion in distal tubules and MDCK-C11 cells., and the inhibition of H+-ATPase by a mechanism dependent on PKG is involved in this distal effect of UGN.

Orientador: Roseana da Exaltação Trevisan / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Mecanica / Made available in DSpace on 2018-08-15T00:22:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PereaCorimaya_RodrigoLuis_M.pdf: 2032359 bytes, checksum: 4a5d338de38fffae7ef6f96cce297aaa (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: No desenvolvimento deste trabalho utilizou-se o ensaio de auto-restrição TEKKEN com o propósito de adequar este teste para a avaliação do trincamento da junta soldada do aço API X80. Para a execução das soldas foi usado o processo de soldagem a arco com eletrodo tubular (FCAW), utilizando o aço API X80 e os eletrodos E71T-1 e E 71T8-K6. O desenvolvimento experimental realizou-se através do planejamento fatorial 23 (PF); as variáveis de influência estudadas foram: a temperatura de preaquecimento, o tipo de arame tubular e o tipo de chanfro do teste. Como variável de resposta foi avaliada a presença de trincas na junta soldada. Os resultados obtidos foram discutidos em função de duas energias de soldagem definidas em 2,0 kJ/mm e 1,0kJ/mm. A variação do insumo de calor teve como propósito aumentar a taxa de resfriamento e, consequentemente, aumentar a restrição do teste, induzindo ao trincamento a frio na junta soldada. Também foram avaliados o teor de hidrogênio residual, a microestrutura e a dureza resultantes. Neste trabalho concluiu-se que, apesar do alto teor de hidrogênio residual encontrado, da elevada taxa de resfriamento imposta durante o processo de soldagem e da presença de microestrutura suscetível, não foi observada a formação de trincas nos corpos de prova. Estes resultados foram atribuídos a inadequação do teste TEKKEN sobre o estudo da suscetibilidade ao trincamento do aço API X80. / Abstract: In the development of this work was used the self-restraint TEKKEN test with the purpose to adequate this test for the evaluation of the cracking in the welded joint of API X80 steel. The Flux Cored Arc Welding (FCAW) process and the cored wires E71T-1 and E 71T8-K6 were used for the accomplishment in the welds of API X80 steel. The experimental were carried out with a factorial design 23 (PF); the input variables studied were: preheat temperature, the wire cored kind and the groove kind of the test. The output variable was always the presence of cracking in the weld joint. The results obtained were discussed in function of two heat input defined in: 2,0 kJ/mm and 1,0kJ/mm. The variation of the heat input was have the purpose of increase the cooling rate and, consequently increased the restraint of the test, to induced cold cracking in the weld joint. It was also evaluated the content of residual hydrogen, the microstructure and the hardness obtained. In this work can be concluded that, in the spite of, high content of residual hydrogen founded, and the high cooling rate, during the welding and the presence of susceptibility microstructure was not observed the formation of cracks in the test pieces. These results were attributed to the inadequate TEKKEN test over the susceptibility cracking API X80 steel studied. / Mestrado / Materiais e Processos de Fabricação / Mestre em Engenharia Mecânica

O clareamento dental é um procedimento que está diretamente relacionado à estética dental e cabe ao profissional de odontologia conhecer e dominar os diferentes materiais, métodos de ativação e técnicas de clareamento. Este estudo ¨In Vitro¨ avaliou comparativamente o aumento de temperatura intra-câmara pulpar durante o clareamento em consultório ativado com diferentes fontes de luz com e sem gel clareador. Foi selecionado 1 incisivo central superior humano, seccionado na porção radicular 3 mm abaixo da junção cemento-esmalte. O canal radicular foi alargado para permitir a introdução do sensor do termômetro dentro da câmara pulpar. A câmara pulpar foi preenchida com uma pasta térmica (C.N.P.J. 52.891. 405/0001-60, Implastec Electroquímica, Votorantim, SP), a fim de permitir a transferência de calor das paredes dentárias para o sensor de um termômetro digital com termopar tipo K (MT- 401A) durante o clareamento. A porção radicular do dente foi submersa em água a 37º C elevando a câmara pulpar a mesma temperatura. Um agente clareador fotossensível à base de peróxido de hidrogênio a 35% (Lase Peroxide DMC Equipamentos) foi utilizado. Para a ativação do gel foram empregados quatro aparelhos com diferentes fontes de luz: luz halógena (Spectrum Dentsply); luz híbrida à base de LED e Laser Diodo (Ultra Blue IV DMC Equipamentos); LED (Smart Lite PS Dentsply) e LED verde (D Light Green - Kondortech). As ativações foram feitas de acordo com as especificações do fabricante. com seis aplicações para cada grupo. Os resultados foram submetidos a ANOVA a dois critérios e teste de Tukey (p 0,05). Os grupos estudados e as medias do aumento da temperatura foram: D - Light Green sem gel (37ºC) A, D - Light Green com gel (37,17ºC) A, Smart Lite sem gel (39,17ºC) C, Smart Lite com gel (40ºC) D, Ultra Blue IV sem laser sem gel (38ºC) B, Ultra Blue IV sem laser com gel (39,17ºC) C, Ultra Blue IV com laser sem gel (38, 17ºC) B, Ultra Blue IV com laser com gel (39,33ºC) C, Spectrum sem gel (39,17ºC) C e Spectrum com gel (40,83ºC) E. Todas as lâmpadas apresentaram aumento da temperatura intracâmara pulpar, com exceção do D - Green Light, sem atingir a temperatura crítica de 5,5ºC. A fonte de luz halógena com gel apresentou o maior aumento de temperatura. / The purpose of this In Vitro study was to measure the intrapulpal temperature rise induced by various light sources and a bleaching gel. The root portion of an intact human maxillary central incisor was sectioned with a diamond disk 3 mm below the cement enamel junction. The apical foramen of the root was enlarged and remaining pulp tissue was removed. The empty pulp chamber was filled with a heat sink compound and a thin K-type thermocouple was introduced into the pulp chamber. The root surface of the tooth was partially submerged in a water bath during the testing procedure at 37°C elevating the pulp chamber at the same temperature. A 35% hydrogen peroxide bleaching gel (Lase Peroxide - DMC Equipamentos) containing heat enhanced colorants was applied to the vestibular tooth surface. Light units used were a conventional tungsten quartz halogen (Spectrum Dentsply), a LED/Laser device (Ultra Blue IV DMC Equipamentos), a high intensity LED (Smart Lite PS Dentsply) and a green LED light (D Light Green - Kondortech). A pilot study and a statistical analysis were made to determine the number of application needed. Six applications were made for each system and gel combination. Differences between the starting temperature and final temperature reading were taken and the calculated temperature changes were averaged to determine the mean value in temperature rise. Temperature rise values were compared using two-way analysis of variance (ANOVA) at a preset alfa of 0.05. Temperature rise varied significantly depending on the type of light used and in presence or absent of bleaching gel. The conventional tungsten quartz halogen lamp with bleaching gel induced significantly higher temperature increases than any other curing unit (3,83°C). The green light-emitting diode unit without gel produced no temperature changes. Almost as a rule, the presence of bleaching gel resulted in a significant intrapulpal temperature increase (approximately 1ºC) over that reached using no gel. However, light bleaching systems thus increase intrapulpal temperature, all the procedures used in this study were below the critical level of 5,5ºC.

Orientador: Valeria Maia Merzel / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-22T20:30:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tomazetto_Geizecler_D.pdf: 2728814 bytes, checksum: 5ca8845e4db01805f12ccff354b0a0b0 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: O hidrogênio é apontado como o candidato mais promissor para substituição do combustível fóssil devido a sua maior eficiência na conversão de energia útil e ausência de emissão de substâncias tóxicas. A produção de hidrogênio a partir de resíduos orgânicos é realizada por meio de digestão anaeróbica, tornando-se uma alternativa ecologicamente correta para atender à futura demanda por hidrogênio. No entanto, os micro-organismos e os processos metabólicos envolvidos estão longe de serem exaustivamente caracterizados. Nesse trabalho, amostras de uma planta de tratamento de esgoto doméstico foram analisadas em dois estudos complementares visando à caracterização de sua diversidade filogenética e a descrição de novas hidrogenases. O primeiro trabalho combinou a análise dos genes de RNAr 16S e FeFehidrogenase (hydA) com ferramentas estatísticas para estimar a riqueza e diversidade da comunidade procariótica em nível filogenético e funcional. As análises filogenéticas e de diversidade das bibliotecas gênicas demonstraram que todas as sequências de arquéias foram afiliadas a Euryarchaeota não cultivadas e, com relação ao Dominio Bactéria, Proteobacteria foi grupo filogenético predominante apresentando os maiores índices de diversidade e riqueza. As sequências putativas de hydA foram identificadas como sequências de genes de FeFehidrogenases ainda não descritas. Na segunda abordagem, a biblioteca metagenômica de fosmideo construída nesse estudo foi analisada empregando a tecnologia de pirosequenciamento 454 e resultou em aproximadamente 218 Mb de dados. Os três diferentes classificadores aplicados permitiram uma visão geral dos grupos taxonômicos mais abundantes devido ao enorme número de sequências metagenômicas não classificadas. Contudo, análises taxonômicas revelaram Gammaproteobacteria e Deltaproteobacteria, respectivamente, como as classes taxonômicas predominantes, enquanto que as espécies do gênero Methanospirillum foram dominantes entre as arquéias metanogênicas. A análise do metabolismo da comunidade microbiana através das bases de dados COG e Carma revelou que a degradação da biomassa depende de diferentes grupos filogenéticos, como por exemplo, Bacteroidia e Gammaproteobacteria, os quais foram indicados como envolvidos na degradação de carboidratos e proteínas, respectivamente. Além disso, as análises sugerem Clostridia e Methanomicrobiales e Methanosarcinales como principais micro-organismos produtores de hidrogênio e metano, respectivamente. As análises das seis sequências codificantes de FeFehidrogenase identificadas no conjunto de dados metagenômicos revelaram que essas representam novas sequências do gene alvo. Contudo, quatro dessas sequências foram identificadas na biblioteca de fosmídeo pela triagem gênica baseada no uso de PCR. O conjunto de resultados obtido nesse estudo permitiu elucidar a composição e o potencial metabólico dos micro-organismos residentes na planta de tratamento de esgoto analisada e sugere esse ambiente como um reservatório potencial de novos genes de hidrogenases para a exploração biotecnológica / Abstract: Hydrogen appears to be the most promising candidate for the replacement of fossil fuel due to its potentially higher efficiency of conversion to usable power and no toxic emission production. The production of hydrogen from organic wastes is performed through the anaerobic digestion, making it an environmentally friendly alternative for satisfying future hydrogen demands. Nonetheless, the microorganisms and metabolic processes involved are far from being exhaustively characterized. In this work, samples of a domestic sewage treatment plant were analyzed in two complementary studies aiming at the characterization of its phylogenetic diversity and the description of new hydrogenases. The first one, combined the analysis of 16S rRNA and [FeFe]-hydrogenase (hydA) genes with statistical tools to estimate richness and diversity of the prokaryotic community at the phylogenetic and functional levels. Phylogenetic analysis showed that all archaeal sequences were affiliated with yet uncultured Euryarchaeota and that Proteobacteria were the most predominant and diversified phylogenetic group within the bacterial library. The putative hydA sequences were identified as hitherto undetected [Fe-Fe]- hydrogenase gene sequences. Diversity statistical analysis confirmed a great richness and diversity of bacterial and hydA sequences retrieved from the sewage sludge sample. In the second approach, a fosmid metagenomic library was constructed and analyzed employing 454- pyrosequencing technology, resulting in approximately 218 Mb of data. Three different classifiers applied allowed a broad overview of the most abundant taxonomic groups due to a huge number of metagenome reads remained unidentified. However, taxonomic analysis revealed Gammaproteobacteria and Deltaproteobacteria, respectively, as the most abundant classes, whereas species of the genus Methanospirillum were dominant among methanogenic Archaea. The analyzes of the microbial community metabolism by means of COG and Carma databases revealed that the degradation of biomass depends on different phylogenetic groups, for instance, Bacteroidia and Gammaproteobacteria were indicated as involved into the degradation of carbohydrate and proteins. Furthermore, the analysis suggested Clostridia and Methanomicrobiales and Methanosarcinales as the main microorganisms producing hydrogen and methane, respectively. Analysis of the six coding sequences of FeFe-hydrogenases identified into the dataset revealed that they represented novel target gene sequences. However, only four of these coding sequences could be detected into the fosmid library by PCR screening. The combined results obtained in this study allowed us to have an insight of the composition and potential metabolism of the microbes residing in the analyzed domestic sewage treatment plant and suggested such environment as a potential reservoir for new hydrogenase genes to biotechnological exploration / Doutorado / Genetica de Microorganismos / Doutora em Genética e Biologia Molecular

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / In this work, the ammonium salt of acid and a new polymeric compound of Cadmium, ligand 1,4-phenylene bis phenylphosphinic acid already reported by Herring at 1967 (Herring, L., D.; United States Patent, 3, 341-576, 1967) were synthesized and characterized. The reaction between an organometallic and a protector group aminephosphine gave rise to a diaminphenylphosphine which was subsequently oxided generating a white powder 1,4-phenylene bis phenylphosphinic acid. Acid when submitted at solvothermics conditions of methanol, led to colorless needle shaped crystals of 1. The dissolution of phenylene 1,4-phenylphosphinic acid in alcoholic medium followed by slow evaporation of the solvent generated needle-shaped crystals 2. The reaction between the ammonium salt of the acid in ethanol and cadmium chloride originated under conditions solvothermic colorless crystals plate-shaped to a compound of cadmium 3. Three compounds were first analyzed by infrared spectroscopy. Thermogravimetric analysis was performed for compound 1. Compounds 1, 2 and 3 were analyzed by X-ray diffraction of single crystal. Compound 1 is presented in the form of a two-dimensional network formed by hydrogen bonds, from strong to moderate, forming chains along the direction [010]. Compound 2 presents a rare two-dimensional array consisting of ammonium and hydronium. Structure is arranged by a complex network based on hydrogen bonds, with growth in the directions of a and b, being made available by alternating organic and inorganic layers. The coordination polymer 3 is two-dimensional and stretches along the [100], by double ligand bridges bisphenylphosphinate. Along [010], chains are connected by bridges of simple ligand, also occur in this direction, weak hydrogen bonds between-OH groups of ligands and deprotonated oxygen atoms of the protonated ligands. Each oxygen of the ligand connects so bismonodentate the cadmium atoms that exhibit octahedral geometry. Hydrogen bonds in these three compounds were important in maintaining their solid state structures. / Neste trabalho, foram sintetizados e caracterizados o ligante ácido benzeno 1,4-bisfenilfosfínico, já relatado por Herring em 1967 (Herring, L., D.; United States Patent, 3, 341-576, 1967), o sal de amônio do ácido e um novo composto polimérico de cádmio. A reação entre um organolítio e um grupo protetor organocloroaminofosfina deu origem a uma diaminafenilfosfina que foi posteriormente oxidada gerando um pó branco do ácido benzeno 1,4-bisfenilfosfínico. O ácido, quando submetido a condições solvotérmicas em metanol, originou cristais em forma de agulhas 1. A dissolução de 1 em solução alcoólica de amônio, seguida de evaporação lenta do solvente gerou cristais em forma de agulhas 2. A reação entre 1 e cloreto de cádmio em metanol sob condições solvotermais originou cristais incolores em forma de placas para um composto de cádmio 3. Os três compostos foram analisados primeiramente por espectroscopia de infravermelho. Análise termogravimétrica foi realizada para o composto 1. A análise estrutural dos compostos 1, 2 e 3 foi realizada através de difração de raios-X de monocristal. O composto 1 apresenta-se na forma de uma rede bidimensional formada por ligações de hidrogênio de forte a moderadas que formam cadeias ao longo da direção [010]. O composto 2 apresenta um raro arranjo bidimensional constituído por íons amônio e hidrônio. Sua estrutura é formada por uma complexa rede baseada em ligações de hidrogênio, com crescimento nas direções de a e b, sendo composta pela disposição alternada de camadas inorgânicas e orgânicas. O polímero de coordenação 3 é bidimensional e se estende na direção [100], através de pontes duplas do ligante bisfenilfosfinato. Na direção [010], as cadeias são conectadas por pontes simples do ligante, também nesta direção, ocorrem fracas ligações de hidrogênio entre grupos -OH de ligantes e átomos de oxigênio dos ligantes neutros. Cada oxigênio do ligante conecta-se de forma bismonodentada aos átomos de cádmio, que apresentam geometria octaédrica. As ligações de hidrogênio nestes três compostos mostraram-se importantes na manutenção de suas estruturas no estado sólido.