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Seleção de plantas hospedeiras experimentais para ensaios de transmissão da estirpe de citros de Xylella fastidiosa / Selection of experimental host plants for transmission tests of citrus strain of Xylella fastidiosa

Esteves, Mariana Bossi 26 January 2015 (has links)
A clorose variegada dos citros (CVC) é uma das principais doenças que afeta a citricultura brasileira, causada pela bactéria Xylella fastidiosa (Wells), que coloniza o xilema de culturas de interesse econômico, além de plantas ornamentais e daninhas, sendo transmitida por cigarrinhas (Hemiptera: Cicadellidae: Cicadellinae). A compreensão do patossistema CVC é fundamental para planejar táticas eficazes de controle da doença. Entretanto, as pesquisas sobre interações patógeno-planta-vetores são escassas, devido à falta de plantas hospedeiras adequadas para ensaios de transmissão da bactéria, visto que citros não é um bom hospedeiro experimental. Assim, nesta pesquisa objetivou-se identificar espécies herbáceas que permitam a colonização sistêmica da estirpe de X. fastidiosa de citros, e avaliar seu uso como plantas-fonte e plantas-teste (indicadoras) em testes de transmissão por Bucephalogonia xanthophis (Berg). Para tal foram escolhidas as plantas Bidens pilosa L., Catharanthus roseus L., Citrus sinensis (L.) Osbeck, Medicago sativa L., Nicotiana tabacum L., Ocimum basilicum L., Parthenium hysterophorus L., Phaseolus vulgaris L., Sida rhombifolia L. e Solanum americanum Mill, que foram inoculadas mecanicamente com isolados de X. fastidiosa de citros e posteriormente avaliadas quanto à infecção por isolamento primário e reação de cadeia da polimerase (PCR). As espécies que permitiram colonização bacteriana foram posteriormente avaliadas em experimentos de transmissão por B. xanthophis, sendo divididos em duas etapas. Na primeira delas, variaram-se as espécies de plantas-fonte para aquisição da bactéria e fixou-se C. roseus como planta-teste para inoculação. Na segunda etapa, fixou-se C. roseus como planta-fonte e variaram-se as espécies de planta-teste. Durante os experimentos de transmissão, foram avaliados dois parâmetros biológicos de B. xanthophis: mortalidade (%) e volume de honeydew excretado (medida indireta de ingestão). Entre 30 a 90 dias após a inoculação, as plantas-testes foram analisadas quanto à infecção bacteriana por meio de PCR e isolamento. As inoculações mecânicas mostraram colonização sistêmica e multiplicação de X. fastidiosa em sete espécies vegetais (B. pilosa, C. roseus, C. sinensis, M. sativa, N. tabacum, O. basilicum e S. americanum), com maiores taxas de infecção e populações bacterianas em C. roseus e N. tabacum. As espécies C. roseus, M. sativa e O. basilicum, quando usadas como plantas-fonte de X. fastidiosa, propiciaram maiores volumes de excreção e menores taxas de mortalidade (15, 20 e 20%) da cigarrinha após 48 h de acesso à aquisição da bactéria. No experimento de transmissão com variação de espécies de plantas-teste, detectou-se a inoculação pelo vetor em C. roseus, M. sativa, O. basilicum e S. americanum, com maior proporção de plantas positivas (cerca de 20%) para as duas primeiras. Dentre essas espécies, C. roseus e M. sativa são as indicadoras mais adequadas para ensaios de transmissão de X. fastidiosa por B. xanthophis, sendo a primeira também adequada como planta-fonte. / Citrus variegated chlorosis (CVC) is a major disease that affects the Brazilian citrus industry, caused by the xylem-limited bacterium Xylella fastidiosa (Wells), which colonizes several crop plants, ornamentals and weeds, and is transmitted by sharpshooter leafhoppers (Hemiptera: Cicadellidae: Cicadellinae). A better understanding of the CVC pathossystem is critical for developing effective tactics to control the disease. However, research on the relationships among pathogen strains, host plants and insect vectors associated with CVC is scarce, partly because of the lack of adequate host plants for transmission assays, since citrus is not a suitable experimental host for this purpose. Thus, the present study aimed to identify herbaceous plants that allow systemic colonization of citrus strains of X. fastidiosa, and evaluate them as source and test (indicator) plants in transmission assays by the sharpshooter Bucephalogonia xanthophis (Berg). Ten plant species, Bidens pilosa L., Catharanthus roseus L., Citrus sinensis (L.) Osbeck, Medicago sativa L., Nicotiana tabacum L., Ocimum basilicum L., Parthenium hysterophorus L., Phaseolus vulgaris L., Sida rhombifolia L. and Solanum americanum Mill were mechanically inoculated with citrus isolates of X. fastidiosa and then evaluated for bacterial infection by primary isolation in culture medium and polymerase chain reaction (PCR). Those plant species that allowed bacterial colonization were later evaluated in two transmission experiments by B. xanthophis, In the first experiment, different plant species were tested as source plants for bacterial acquisition and transmission to C. roseus (test plant). In the second one, C. roseus was used as a source plant and different plant species were evaluated as test (indicator) plants for bacterial inoculation. During the transmission experiments, two biological parameters of B. xanthophis were evaluated: mortality rate (%) and honeydew excretion (as an indirect measure of ingestion). Between 30 and 90 days after inoculation, the test plants were analyzed for X. fastidiosa infection by PCR and culturing. The mechanical inoculation experiments showed systemic colonization and multiplication of X. fastidiosa in seven plant species (B. pilosa, C. roseus, C. sinensis, M. sativa, N. tabacum, O. basilicum and S. americanum), with higher rates of infection and bacterial populations of C. roseus and N. tabacum. The species C. roseus, M. sativa and O. basilicum, when used as source plants of X. fastidiosa, allowed higher ingestion (honeydew excretion) rates and lower mortality (15, 20 and 20%) of B. xanthophis during the 48-h acquisition access period. In the transmission experiment with different species of test plants, X. fastidiosa inoculation by the vector was detected in C. roseus, M. sativa, O. basilicum and S. americanum, with a higher rate of infected plants (about 20%) in the former two species. Among the herbaceous plant species evaluated in this research, C. roseus and M. sativa are the most appropriate indicator hosts of X. fastidiosa infection for transmission assays by B. xanthophis, whereas the former species is also suitable as a source plant.
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Aspectos bioecológicos do pulgão-gigante-do-pinus, Cinara atlantica (Wilson, 1919) (Hemiptera: Aphididae), em Pinus spp. (Pinaceae)

Ottati, Angelo Luiz Tadeu [UNESP] 17 February 2004 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004-02-17Bitstream added on 2014-06-13T18:45:55Z : No. of bitstreams: 1 ottati_alt_dr_botfca.pdf: 651467 bytes, checksum: a1b92614d7fbcfa2a73dbf3cf0eb427b (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Empresa Privada / Os afídeos são um dos grupos de pragas amplamente distribuídos, causando perdas consideráveis em sistemas agrícolas e florestais. O pulgão-gigante-do-pinus, Cinara atlantica, é atualmente a espécie de pulgão mais disseminada nos plantios de Pinus no Brasil. Devido à sua importância econômica, esse trabalho objetivou avaliar o efeito de diferentes temperaturas e da espécie hospedeira no desenvolvimento de ninfas e na longevidade e capacidade reprodutiva de adultos de C. atlantica, sob condições de laboratório, e determinar a flutuação populacional, a estrutura etária e a caracterização da estrutura espacial do afídeo em áreas florestadas com Pinus taeda e P. caribaea var. caribaea. A determinação do efeito de diferentes temperaturas (18o C, 22o C, 26o C e 30o C) e de hospedeiros (P. taeda e P. caribaea var. hondurensis) no desenvolvimento de C. atlantica foi conduzida sob fotofase de 12 h e umidade relativa do ar de 70 10%. Utilizaram-se 20 insetos (repetições) para cada combinação dos fatores temperatura e hospedeiro e obtiveram-se resultados para variáveis nos estágios ninfal e adulto e ciclo de vida. A determinação da flutuação populacional e da caracterização espacial (50 árvores/avaliação) e da estrutura etária (cinco colônias/avaliação) de C. atlantica foi realizada em áreas de 1 ha com P. taeda e P. caribaea var. caribaea nos municípios de Buri e Nova Campina/SP em 21 avaliações entre julho de 2001 e agosto de 2002. Concluiu-se que o desenvolvimento de ninfas e a longevidade e potencial reprodutivo dos adultos de C. atlantica não foram influenciados pelos hospedeiros P. taeda e P. caribaea var. hondurensis. Entretanto, as temperaturas constantes de 18o C e 22o C conferem as melhores condições, enquanto a de 30o C as piores condições de desenvolvimento aos insetos mantidos em P. taeda e P. caribaea var. hondurensis. C. atlantica... . / Aphids are one of the most widespread groups of pests, causing severe damages on agricultural and forestry systems. Nowadays, the giant conifer aphid, C. atlantica, is widely distributed on pine forests in Brazil. Due to its economic importance, this study aimed to evaluate the effects of different constant temperatures and host plants on the development of nymphs and adults and reproductive capacity in adult of C. atlantica in laboratory, monitoring the populational fluctuation, the age structure and to characterize spatial pattern of C. atlantica in Pinus taeda and P. caribaea var. caribaea plantations. The effect of constant temperatures (18o C, 22o C, 26o C e 30o C) and host plants (P. taeda and P. caribaea var. hondurensis) on the development of C. atlantica was carried out at 12 h of photophase (12 h) and 70 + 10% relative humidity. Twenty nymphs (replications) were tested for each treatment (temperature x host plant) to estimated biological variables of nymph and adult stages and life span. The study of the populational fluctuation, the spatial characterization (50 trees sampled per sampling date) and the age structure (5 aphid colonies per sampling date) of C. atlantica was carried out on P. taeda and P. caribaea var. caribaea plantations in 1 ha area in Buri and Nova Campina municipalities (SP, Brazil), between July 2001 and August 2002 (21 sampling dates). This research indicated that nymph and adult development and reproductive capacity of C. atlantica were not affected by host plants. However, temperatures of 18o C and 22o C provided better conditions for aphid development than 30o C when reared on P. taeda and P. caribaea var. hondurensis. In the field, C. atlantica had highest peaks of abundance in the winter and spring and lowest during the summer. The age structure study can give support to predict population peaks and the occurrence of stable populations indicates a low... (Complete abstract, click electronic address below).
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Seleção de plantas hospedeiras experimentais para ensaios de transmissão da estirpe de citros de Xylella fastidiosa / Selection of experimental host plants for transmission tests of citrus strain of Xylella fastidiosa

Mariana Bossi Esteves 26 January 2015 (has links)
A clorose variegada dos citros (CVC) é uma das principais doenças que afeta a citricultura brasileira, causada pela bactéria Xylella fastidiosa (Wells), que coloniza o xilema de culturas de interesse econômico, além de plantas ornamentais e daninhas, sendo transmitida por cigarrinhas (Hemiptera: Cicadellidae: Cicadellinae). A compreensão do patossistema CVC é fundamental para planejar táticas eficazes de controle da doença. Entretanto, as pesquisas sobre interações patógeno-planta-vetores são escassas, devido à falta de plantas hospedeiras adequadas para ensaios de transmissão da bactéria, visto que citros não é um bom hospedeiro experimental. Assim, nesta pesquisa objetivou-se identificar espécies herbáceas que permitam a colonização sistêmica da estirpe de X. fastidiosa de citros, e avaliar seu uso como plantas-fonte e plantas-teste (indicadoras) em testes de transmissão por Bucephalogonia xanthophis (Berg). Para tal foram escolhidas as plantas Bidens pilosa L., Catharanthus roseus L., Citrus sinensis (L.) Osbeck, Medicago sativa L., Nicotiana tabacum L., Ocimum basilicum L., Parthenium hysterophorus L., Phaseolus vulgaris L., Sida rhombifolia L. e Solanum americanum Mill, que foram inoculadas mecanicamente com isolados de X. fastidiosa de citros e posteriormente avaliadas quanto à infecção por isolamento primário e reação de cadeia da polimerase (PCR). As espécies que permitiram colonização bacteriana foram posteriormente avaliadas em experimentos de transmissão por B. xanthophis, sendo divididos em duas etapas. Na primeira delas, variaram-se as espécies de plantas-fonte para aquisição da bactéria e fixou-se C. roseus como planta-teste para inoculação. Na segunda etapa, fixou-se C. roseus como planta-fonte e variaram-se as espécies de planta-teste. Durante os experimentos de transmissão, foram avaliados dois parâmetros biológicos de B. xanthophis: mortalidade (%) e volume de honeydew excretado (medida indireta de ingestão). Entre 30 a 90 dias após a inoculação, as plantas-testes foram analisadas quanto à infecção bacteriana por meio de PCR e isolamento. As inoculações mecânicas mostraram colonização sistêmica e multiplicação de X. fastidiosa em sete espécies vegetais (B. pilosa, C. roseus, C. sinensis, M. sativa, N. tabacum, O. basilicum e S. americanum), com maiores taxas de infecção e populações bacterianas em C. roseus e N. tabacum. As espécies C. roseus, M. sativa e O. basilicum, quando usadas como plantas-fonte de X. fastidiosa, propiciaram maiores volumes de excreção e menores taxas de mortalidade (15, 20 e 20%) da cigarrinha após 48 h de acesso à aquisição da bactéria. No experimento de transmissão com variação de espécies de plantas-teste, detectou-se a inoculação pelo vetor em C. roseus, M. sativa, O. basilicum e S. americanum, com maior proporção de plantas positivas (cerca de 20%) para as duas primeiras. Dentre essas espécies, C. roseus e M. sativa são as indicadoras mais adequadas para ensaios de transmissão de X. fastidiosa por B. xanthophis, sendo a primeira também adequada como planta-fonte. / Citrus variegated chlorosis (CVC) is a major disease that affects the Brazilian citrus industry, caused by the xylem-limited bacterium Xylella fastidiosa (Wells), which colonizes several crop plants, ornamentals and weeds, and is transmitted by sharpshooter leafhoppers (Hemiptera: Cicadellidae: Cicadellinae). A better understanding of the CVC pathossystem is critical for developing effective tactics to control the disease. However, research on the relationships among pathogen strains, host plants and insect vectors associated with CVC is scarce, partly because of the lack of adequate host plants for transmission assays, since citrus is not a suitable experimental host for this purpose. Thus, the present study aimed to identify herbaceous plants that allow systemic colonization of citrus strains of X. fastidiosa, and evaluate them as source and test (indicator) plants in transmission assays by the sharpshooter Bucephalogonia xanthophis (Berg). Ten plant species, Bidens pilosa L., Catharanthus roseus L., Citrus sinensis (L.) Osbeck, Medicago sativa L., Nicotiana tabacum L., Ocimum basilicum L., Parthenium hysterophorus L., Phaseolus vulgaris L., Sida rhombifolia L. and Solanum americanum Mill were mechanically inoculated with citrus isolates of X. fastidiosa and then evaluated for bacterial infection by primary isolation in culture medium and polymerase chain reaction (PCR). Those plant species that allowed bacterial colonization were later evaluated in two transmission experiments by B. xanthophis, In the first experiment, different plant species were tested as source plants for bacterial acquisition and transmission to C. roseus (test plant). In the second one, C. roseus was used as a source plant and different plant species were evaluated as test (indicator) plants for bacterial inoculation. During the transmission experiments, two biological parameters of B. xanthophis were evaluated: mortality rate (%) and honeydew excretion (as an indirect measure of ingestion). Between 30 and 90 days after inoculation, the test plants were analyzed for X. fastidiosa infection by PCR and culturing. The mechanical inoculation experiments showed systemic colonization and multiplication of X. fastidiosa in seven plant species (B. pilosa, C. roseus, C. sinensis, M. sativa, N. tabacum, O. basilicum and S. americanum), with higher rates of infection and bacterial populations of C. roseus and N. tabacum. The species C. roseus, M. sativa and O. basilicum, when used as source plants of X. fastidiosa, allowed higher ingestion (honeydew excretion) rates and lower mortality (15, 20 and 20%) of B. xanthophis during the 48-h acquisition access period. In the transmission experiment with different species of test plants, X. fastidiosa inoculation by the vector was detected in C. roseus, M. sativa, O. basilicum and S. americanum, with a higher rate of infected plants (about 20%) in the former two species. Among the herbaceous plant species evaluated in this research, C. roseus and M. sativa are the most appropriate indicator hosts of X. fastidiosa infection for transmission assays by B. xanthophis, whereas the former species is also suitable as a source plant.
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Aspectos bioecológicos do pulgão-gigante-do-pinus, Cinara atlantica (Wilson, 1919) (Hemiptera: Aphididae), em Pinus spp. (Pinaceae)/

Ottati, Angelo Luiz Tadeu. January 2004 (has links)
Orientador: Carlos Frederico Wilcken / Banca: Carlos Alberto Hector Flechtmann / Banca: Célia Regina Lopes Zimback / Banca: Sonia Maria Noemberg Lazzari / Banca: Carlos Alberto Fleichmann / Banca: Edson Tadeu Iede / Resumo: Os afídeos são um dos grupos de pragas amplamente distribuídos, causando perdas consideráveis em sistemas agrícolas e florestais. O pulgão-gigante-do-pinus, Cinara atlantica, é atualmente a espécie de pulgão mais disseminada nos plantios de Pinus no Brasil. Devido à sua importância econômica, esse trabalho objetivou avaliar o efeito de diferentes temperaturas e da espécie hospedeira no desenvolvimento de ninfas e na longevidade e capacidade reprodutiva de adultos de C. atlantica, sob condições de laboratório, e determinar a flutuação populacional, a estrutura etária e a caracterização da estrutura espacial do afídeo em áreas florestadas com Pinus taeda e P. caribaea var. caribaea. A determinação do efeito de diferentes temperaturas (18o C, 22o C, 26o C e 30o C) e de hospedeiros (P. taeda e P. caribaea var. hondurensis) no desenvolvimento de C. atlantica foi conduzida sob fotofase de 12 h e umidade relativa do ar de 70 10%. Utilizaram-se 20 insetos (repetições) para cada combinação dos fatores temperatura e hospedeiro e obtiveram-se resultados para variáveis nos estágios ninfal e adulto e ciclo de vida. A determinação da flutuação populacional e da caracterização espacial (50 árvores/avaliação) e da estrutura etária (cinco colônias/avaliação) de C. atlantica foi realizada em áreas de 1 ha com P. taeda e P. caribaea var. caribaea nos municípios de Buri e Nova Campina/SP em 21 avaliações entre julho de 2001 e agosto de 2002. Concluiu-se que o desenvolvimento de ninfas e a longevidade e potencial reprodutivo dos adultos de C. atlantica não foram influenciados pelos hospedeiros P. taeda e P. caribaea var. hondurensis. Entretanto, as temperaturas constantes de 18o C e 22o C conferem as melhores condições, enquanto a de 30o C as piores condições de desenvolvimento aos insetos mantidos em P. taeda e P. caribaea var. hondurensis. C. atlantica... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: Aphids are one of the most widespread groups of pests, causing severe damages on agricultural and forestry systems. Nowadays, the giant conifer aphid, C. atlantica, is widely distributed on pine forests in Brazil. Due to its economic importance, this study aimed to evaluate the effects of different constant temperatures and host plants on the development of nymphs and adults and reproductive capacity in adult of C. atlantica in laboratory, monitoring the populational fluctuation, the age structure and to characterize spatial pattern of C. atlantica in Pinus taeda and P. caribaea var. caribaea plantations. The effect of constant temperatures (18o C, 22o C, 26o C e 30o C) and host plants (P. taeda and P. caribaea var. hondurensis) on the development of C. atlantica was carried out at 12 h of photophase (12 h) and 70 + 10% relative humidity. Twenty nymphs (replications) were tested for each treatment (temperature x host plant) to estimated biological variables of nymph and adult stages and life span. The study of the populational fluctuation, the spatial characterization (50 trees sampled per sampling date) and the age structure (5 aphid colonies per sampling date) of C. atlantica was carried out on P. taeda and P. caribaea var. caribaea plantations in 1 ha area in Buri and Nova Campina municipalities (SP, Brazil), between July 2001 and August 2002 (21 sampling dates). This research indicated that nymph and adult development and reproductive capacity of C. atlantica were not affected by host plants. However, temperatures of 18o C and 22o C provided better conditions for aphid development than 30o C when reared on P. taeda and P. caribaea var. hondurensis. In the field, C. atlantica had highest peaks of abundance in the winter and spring and lowest during the summer. The age structure study can give support to predict population peaks and the occurrence of stable populations indicates a low... (Complete abstract, click electronic address below). / Doutor

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