Nous avons utilisé la lignée épithéliale intestinale de crypte de rat IEC-6 afin de mieux comprendre le rôle des C/EBPs dans la différenciation et la prolifération de l'intestin. Nous avons vérifié l'expression des ARNm de C/EBP$\alpha$, C/EBP$\beta$ et C/EBP$\delta$ suite à la stimulation des cellules IEC-6 par la forskoline et l'IBMX qui stimulent la PKA, le TPA qui stimule la PKC et la thapsigargine qui augmente la concentration de Ca$\sp{2+}$ cytoplasmique. La forskoline et l'IBMX induisent les niveaux d'ARNm des trois C/EBPs avec différentes cinétiques tandis que le TPA induit seulement les niveaux d'ARNm de C/EBP$\alpha$ et de C/EBP$\beta.$ La thapsigargine induit les niveaux d'ARNm des trois isoformes par un mécanisme de régulation post-transcriptionnel sans affecter les niveaux de protéines. Les variations des niveaux d'ARNm, induits par les trois voies de signalisation, étaient indépendantes d'une synthèse nouvelle de protéines. Les analyses des niveaux de protéine par Western nous ont permis de constater une induction des trois isoformes en accord avec celle des ARNm suite à une stimulation par la forskoline et l'IBMX. Nous avons observé que le patron d'expression des protéines C/EBP$\alpha$ et C/EBP$\beta$ concorde avec celui des ARNm après une stimulation par le TPA. La capacité de liaison à l'ADN des C/EBPs n'est pas affectée significativement par les voies de la PKA, de la PKC et du Ca$\sp{2+}.$ Les voies de la PKA et de la PKC peuvent moduler l'expression de certains gènes de la réponse inflammatoire comme l'haptoglobine et le thiostatin. La stimulation de ces différentes voies inhibe la prolifération cellulaire des cellules IEC-6 en absence et en présence de sérum. Finalement, nous avons observé que ces différentes voies pouvaient induire à des niveaux variables l'ARNm de p21, un gène très important dans l'arrêt de la prolifération cellulaire. [Résumé abrégé par UMI] [Symboles non conformes]

Regeneration of adult skeletal muscle relies upon a population of quiescent myogenic progenitor cells, called satellite cells (SCs). Upon injury, SCs activate, proliferate, differentiate and fuse to make new myofibers or to repair damaged ones. SCs can also self-renew to repopulate the SC niche. The balance between differentiation and self-renewal is critical to maintain muscle homeostasis and changes in this equilibrium can lead to chronic muscle degeneration. For example, Duchenne’s muscular dystrophy (DMD) is characterized by rounds of muscle degeneration and regeneration leading to increased muscle wasting. One approach to treat DMD is transplantation of SCs. For this treatment to be viable, transplanted cells must contribute to repairing injured muscle and repopulating the SC niche. Here, we show that the transcription factor CCAAT/Enhancer Binding Protein beta (C/EBPβ) regulates SC function. C/EBPβ is down-regulated during differentiation and persistent expression of C/EBPβ inhibits differentiation and expression of the myogenic regulatory factors MyoD and Myogenin. C/EBPβ also promotes Pax7 expression by directly binding to and regulating Pax7 transcription. Using genetic tools to conditionally excise C/EBPβ expression in SCs, we found that C/EBPβ-null SCs lose quiescence and precociously differentiate at the expense of self-renewal. After a single injury, C/EBPβ-deficient SCs failed to self-renew, resulting in impaired muscle repair after a second injury. C/EBPβ-induced quiescence also requires upregulation of caveolin-1. Furthermore, pharmacological manipulation of C/EBPβ expression with the phosphodiesterase inhibitor, isobutylmethylxanthine (IBMX), increased the number of cells available for transplantation into dystrophic muscle and enhanced the expression of stem cell markers in a C/EBPβ-dependent fashion. IBMX treatment improved cell survival and migration, engraftment into the SC niche and repair of dystrophic muscle. Together, these results demonstrate that C/EBPβ is an important regulator of SC function and that pharmacological manipulation of C/EBPβ improves culture conditions for the expansion and selection of SCs available for cell therapy for the treatment of muscular dystrophies.