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Detection of parasite antigens in Leishmania infantum infected spleen tissues by piezoelectric based immunosensorsMiranda, Gustavo Cabral de 10 June 2013 (has links)
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Dissertação_ICS_Gustavo Miranda.pdf: 1853807 bytes, checksum: f9a1c2b796442124414bba8e163ac719 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-06-10T19:36:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Dissertação_ICS_Gustavo Miranda.pdf: 1853807 bytes, checksum: f9a1c2b796442124414bba8e163ac719 (MD5) / Doenças como a leishmaniose é uma importante causa de morbidade e mortalidade no
Brasil e seus diagnósticos devem ser melhoradas. A produção de anticorpos
monoclonbais anti-L. infantum e acoplamento ao sensor piezoelétrico, para formar um
dispositivo bioeletrônicos capaz de detectar rapidamente antígenos de Leishmania sp,
tanto qualitativa como quantitativamente, é uma alternativa promissora para o
diagnóstico da leishmaniose, devido à sua alta especificidade e sensibilidade,
portabilidade e baixo custo, em comparação aos métodos convencionais. Objetivo:
Desenvolver um imunossensor capaz de detectar antígenos de L. infantum em tecidos de
animais infectados. Material e Método: Quatro hibridomas produtores de anticorpos
monoclonais anti-amastigota de L. infantum teve sua especificidade confirmada por
ELISA. Esses anticorpos foram imobilizados sobre um cristal piesoelétrico de quartzo
através de uma fina camada de 2-aminoetanotiol (cisteamina) e glutaraldeído, e
submetidos a injeções de extratos de baço de hamster infectados e não-infectados com
L. infantum. Resultados: Quatro anticorpos (5A9H8, 2B7B8, 4B6F7 e 5AB3A10B4),
todos da classe IgG, foram acoplados à superfície do transdutor e foram capazes de
reagir contra extrato de baço de hamster infectado com L. infantum. A metodologia
desenvolvida foi capaz de detectar 3,5x10
4
amastigotas por grama de tecido infectado
com os anticorpos 5A9H8, 4B6F7 e 5AB3A10B4, e 1,75x10
4
com o anticorpo 2B7B8.
Conclusões: Os resultados demonstraram que este teste pode ser útil para quantificar
amastigotas de L. infantum em órgãos de animais experimentais para estudos sobre a
patogênese da leishmaniose visceral americana e é uma ferramenta promissora para
desenvolver um diagnóstico de leismanioses humana e canina. / Salvador
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