Orientador: José Antônio Dell'aqua Junior / Resumo: A refrigeração de sêmen é importante ferramenta para disseminação de material genético de garanhões. Essa técnica é possível pela correta diluição do sêmen em meios específicos e pelo uso de caixas próprias para refrigeração passiva a 5 ou 15ºC. A maior parte dos diluentes para refrigeração de sêmen equino utilizados no mundo são a base de leite. Entretanto, um dos entraves da utilização deste produto biológico é o grande número de substâncias contidas, levando a não padronização entre partidas. Visando solucionar esta problemática, o desenvolvimento de meios diluentes quimicamente definidos que proporcionem proteção aos espermatozoides durante o arrefecimento, mantendo a fertilidade após a refrigeração deve ser considerado. O uso de frações do leite pode otimizar seu potencial benéfico, tendo em vista que é possível aumentar a concentração dos componentes que favorecem a proteção espermática. A caseína é a fração do leite descrita como a mais eficaz para manutenção da viabilidade espermática e com capacidade de proteger a membrana plasmática. Considerando essas informações, este estudo tem como objetivo avaliar os efeitos de meios diluentes para sêmen equino a base de caseina (CS), caseina com pentoxifilina (CSP), caseina com colesterol (CSC) e seus equivalentes a base de leite desnatado (LD), leite desnatado com pentoxifilina (LDP) e leite desnatada com colesterol (LDC) sobre os parâmetros espermáticos in vitro e fertilidade do sêmen submetido a refrigeração passiva a 5ºC p... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciencias Agrarias / Made available in DSpace on 2012-10-16T10:59:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / A espécie Penaeus paulensis é cultivada principalmente na região Sul do Brasil. Foram realizadas e observadas 56 inseminações artificiais e 13 cópulas nas instalações do Laboratório de Camarões Marinhos (UFSC). O estádio de muda das fêmeas do camarão foi determinado pela observação microscópica dos endopoditos dos pleópodes. O espermatóforo foi inserido no télico através de um estilete de ponta plana sendo imobilizada a fêmea com a mão. As comparações entre as distribuições libres das taxas de eclosão por inseminação artificial e cópula e nos estádios A, B ou C e cópula não mostraram diferença estatisticamente significativa (teste de Mann-Whitney e de Kruskal-Wallis, respectivamente P>0,05). O valor médio da taxa de eclosão para a primeira desova de fêmeas inseminadas artificialmente foi de 68,83% e de 74,85% para as fêmeas inseminadas através de cópula. Conclui-se que a inseminação artificial em Penaeus paulensis produz desovas viáveis e descendência compatível com os objetivos de um laboratório de produção de náuplios a nível comercial. Razões econômicas e de disponibilidade de reprodutores decidirão a utilização rotineira da inseminação artificial para a especie.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-10-17Bitstream added on 2014-06-13T18:46:36Z : No. of bitstreams: 1 medeiros_asl_dr_botfmvz.pdf: 343957 bytes, checksum: a5f91ddebc1a044146e32c17193d268b (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / The sperm osmotic stress induced by the cryprotectors during cryopreservation is an important factor involved on sperm viability. The present study aimed to study the viability and fertility after induction of osmotic stress using different amides and glycerol. Experment 1 aimmed to study the semen freezability of 27 stallions with the utilization of the cryoprotectors dimetilacetamida (DA), metilformamida (MF), dimetilformamida (DF) e glicerol (GL), the amidas based cryoprotectors were superior to glycerol in the ability to preserve pos thaw motility and membrane integrity (p<0,001). From these 27 stallions 9 were selected and classified with acceptable freezability and 12 as non acceptable freezabilty based on post thaw quality after frozen with GL. No differences were observe on total motility (TM), progressive motility (PM) and membrane integrity (MI) for the acceptable and non acceptable freezabilty groups. Four stallions with higher freezabilty were selected from the acceptable group and no differences between amides and glicerol were observed (p>0.05). From the non acceptable group 6 stallions with lower freezability were sellected, and amides were superior to GL for all post thaw evaluated parameters. (p<0,0001). On Experiment II, the same 10 stallions were used to evaluated the effect of the osmotic stress on the viability of fresh semen. The semen was incubated for 10 minuts in a 1 Molar solution of each studied cryoprotector. A significant decrease on total motility were observed after the incubation on the hypertonic solution (12,93l15,22d; 61,53l16,17b; 44,67l22,68c; 41,73l24,28c, DA, MF, DF e GL respective) when compared with the control group (81,4l9,15a). The lower motility was observed on the DA treatment. Also a higher decrease in the membrane integrity was observed in the solution of DA, MF, DF e GL (48,47l9,49bc, 49,20l8,47bc, 53,07l12,04b, 42,33l12,15c respectively) compared with control (61,87l13,62a).

Orientador: Marco Antonio Alvarenga / Banca: Frederico Ozanan Papa / Banca: Maria Denise Lopes / Banca: Rubens Paes de Arruda / Banca: Rodrigo da Costa Mattos / Abstract: The sperm osmotic stress induced by the cryprotectors during cryopreservation is an important factor involved on sperm viability. The present study aimed to study the viability and fertility after induction of osmotic stress using different amides and glycerol. Experment 1 aimmed to study the semen freezability of 27 stallions with the utilization of the cryoprotectors dimetilacetamida (DA), metilformamida (MF), dimetilformamida (DF) e glicerol (GL), the amidas based cryoprotectors were superior to glycerol in the ability to preserve pos thaw motility and membrane integrity (p<0,001). From these 27 stallions 9 were selected and classified with acceptable freezability and 12 as non acceptable freezabilty based on post thaw quality after frozen with GL. No differences were observe on total motility (TM), progressive motility (PM) and membrane integrity (MI) for the acceptable and non acceptable freezabilty groups. Four stallions with higher freezabilty were selected from the acceptable group and no differences between amides and glicerol were observed (p>0.05). From the non acceptable group 6 stallions with lower freezability were sellected, and amides were superior to GL for all post thaw evaluated parameters. (p<0,0001). On Experiment II, the same 10 stallions were used to evaluated the effect of the osmotic stress on the viability of fresh semen. The semen was incubated for 10 minuts in a 1 Molar solution of each studied cryoprotector. A significant decrease on total motility were observed after the incubation on the hypertonic solution (12,93l15,22d; 61,53l16,17b; 44,67l22,68c; 41,73l24,28c, DA, MF, DF e GL respective) when compared with the control group (81,4l9,15a). The lower motility was observed on the DA treatment. Also a higher decrease in the membrane integrity was observed in the solution of DA, MF, DF e GL (48,47l9,49bc, 49,20l8,47bc, 53,07l12,04b, 42,33l12,15c respectively) compared with control (61,87l13,62a). / Doutor

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2009. / Submitted by Allan Wanick Motta (allan_wanick@hotmail.com) on 2010-03-11T18:37:29Z No. of bitstreams: 1 2009_DeborahMendesMaximo.pdf: 1244099 bytes, checksum: 325eb026de4272ed5631a5cfd2a7491d (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-04-13T00:31:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_DeborahMendesMaximo.pdf: 1244099 bytes, checksum: 325eb026de4272ed5631a5cfd2a7491d (MD5) / Made available in DSpace on 2010-04-13T00:31:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_DeborahMendesMaximo.pdf: 1244099 bytes, checksum: 325eb026de4272ed5631a5cfd2a7491d (MD5) Previous issue date: 2009 / O objetivo deste trabalho foi descrever e avaliar, através da análise de aspectos ultraestruturais, o processo de maturação in vitro (MIV) de ovócitos ovinos por um período de 24 horas após a inserção de ovócitos imaturos no meio de maturação. Para isso, foram coletados ovários de abatedouro, sendo os folículos aspirados no laboratório. Os complexos cumulus oophorus (CCO) selecionados foram divididos em grupos e transferidos para o meio de maturação onde permaneceram por 6, 12, 18 e 24 horas após o início do processo, exceto o tratamento 0 hora. Após a retirada das estruturas nos diferentes tempos de maturação, essas foram processadas para a microscopia eletrônica de transmissão. Foi observado no tratamento 0 hora que os ovócitos possuíam características compatíveis com estruturas imaturas e após 6 horas de MIV ocorria a migração de mitocôndrias e lipídeos para a periferia citoplasmática e início de expansão das células do cumulus. Tais alterações relacionam-se ao processo de aumento de atividade metabólica ovocitária e início do processo de maturação que levará o ovócito até o estágio de metáfase II. Entre 12 e 18 horas de MIV foram observados rearranjos citoplasmáticos de organelas, tais como o alinhamento e aumento dos grânulos da cortical associados à membrana plasmática, que permitiram inferir sobre o processo de maturação nuclear, sugerindo que, nessa espécie, 18 horas de MIV seriam suficientes para o ovócito atingir sua maturação citoplasmática e nuclear e ser fertilizado. Foi observado também a presença de mitocôndrias do tipo hooded em alguns momentos da maturação. Tais estruturas são comumente encontradas em ovócitos de outras espécies e podem estar relacionadas há um aumento da atividade metabólica mitocondrial durante o período de migração de organelas. Após 24 horas de MIV, os ovócitos avaliados apresentavam características de degeneração o que pode estar ligado ao envelhecimento desta célula devido à sua permanência por mais 6 horas no meio MIV depois da aquisição de competência para a fertilização in vitro (FIV). Este trabalho permitiu a avaliação de aspectos ultraestruturais da MIV em ovinos, bem como forneceu conhecimentos a respeito da maturação nuclear. Entretanto, mais estudos devem ser realizados para aprimorar essa importante biotécnica nessa espécie. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The aim of this study was describe and evaluate, by analysis of ultrastructural aspects, the in vitro maturation (IVM) process of the sheep oocytes during 24 hours after insertion of immature oocytes in maturation medium. For this, ovaries were collected from slaughterhouse and its follicles were aspirated on laboratory. The selected cumulus oocyte complex (COC) were divided into groups and transferred to the maturation medium where they were maintained for 6, 12, 18 and 24 hours after the beginning of process, except the 0 hour treatment. The structures were removed after different maturation times and processed to transmission electron microscopy. In 0 hour treatment the oocytes had compatible characteristics with immature structures and, after 6 hours of IVM, there was migration of mitochondrias and lipids to the cytoplasm periphery and the onset of cumulus cells expansion. These alterations were compatible with increasing metabolic activity on oocyte and the onset of maturation process that enable the structure to reach metaphase II. Between 12 and 18 hours of IVM, were observed cytoplasmic rearrangements of organelles, like aligning and increasing of cortical granules associated with plasmatic membrane, that were related to the process of nuclear maturation, suggesting that, in this specie, 18 hours of IVM were enough to the oocyte reach nuclear and cytoplasmic maturation and be fertilized. The presence of hooded mitochondrias in some times of maturation was observed. These structures were commonly found on other species oocytes and could be related to increase of mitochondrial activity metabolic during organelles migration. After 24 hours of IVM, the oocytes had characteristics of degeneration that can be related to cellular aging because of the persistence on the maturation medium after acquisition competence to in vitro fertilization (IVF). This work enabled the evaluation of the ultrastructural aspects of sheep IVM and provide knowledge about the nuclear maturation. However, more studies must be performed to refine this important biotechnique in sheeps.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2006. / Submitted by Érika Rayanne Carvalho (carvalho.erika@ymail.com) on 2010-03-12T17:26:01Z No. of bitstreams: 1 2006_Carlos Alberto da Cruz Júnior.pdf: 3213018 bytes, checksum: adf1ba456b7634f81c72e857431683ed (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-05-18T00:21:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_Carlos Alberto da Cruz Júnior.pdf: 3213018 bytes, checksum: adf1ba456b7634f81c72e857431683ed (MD5) / Made available in DSpace on 2010-05-18T00:21:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_Carlos Alberto da Cruz Júnior.pdf: 3213018 bytes, checksum: adf1ba456b7634f81c72e857431683ed (MD5) Previous issue date: 2006-09-22 / Visando descrever morfologicamente a cérvix de ovelhas da raça Santa Inês foram coletados 100 cérvix no abatedouro municipal de Petrolina - PE. Anatomicamente, a cérvix de ovelhas da raças Santa Inês possui comprimento médio de 4,68 cm e valores mínimo e máximo, respectivamente, de 3,00 e 7,00 cm. Possui cinco tipos de orifício externo (situados na porção caudal), denominados de flap, bico de pato, roseta, espiral e óstio, sendo que a maior ocorrência é do tipo bico de pato (51%). Apresenta em média 5,68 anéis com o formato de funil e valores mínimo e máximo de 3 e 8 respectivamente. O diâmetro interno médio dos anéis é de 2,98±1,21 cm, sendo o diâmetro médio do quarto anel, o menor. A formação de fundos de saco nos anéis da cérvix de ovelhas é um relato inédito, e em 100% das velha da raça Santa Inês ocorre nos 2 primeiros anéis, podendo estar presente em todos. Histologicamente, a cérvix possui em sua luz, predominantemente, epitélio de revestimento simples cilíndrico ciliado, exceto na porção caudal, que também poderá ser revestida por epitélio estratificado pavimentoso sem queratinização. Independente do tipo, o epitélio de revestimento apresenta vilosidades por toda sua extensão. Abaixo do epitélio de revestimento, encontra-se uma faixa de tecido conjuntivo denso modelado, o qual pode variar quanto à largura da área ocupada desde uma larga faixa nos animais mais jovens até uma faixa estreita nos mais velhos. Uma faixa de tecido conjuntivo denso não modelado aparece logo abaixo do tecido conjuntivo denso modelado, podendo estar ausente em alguns animais. O tecido conjuntivo frouxo está localizado abaixo do tecido conjuntivo denso não modelado, quando o mesmo estiver presente, ou abaixo do tecido conjuntivo denso modelado. Vasos e nervos são estruturas presentes. Os resultados obtidos no presente estudo podem contribuir para o desenvolvimento de programas e equipamentos comerciais de IA para a técnica transcervical e devem ser considerados em conjunto. ___________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The aim of the present study was to describe the morphology of the cervix of Santa Ines ewes. One hundred cervix were collected in a slaughter house (Petrilina – PE) and used in this study. Anatomically, the cervices presented an average length of 4.68 cm, with minimum and maximum values of 3 and 7 cm respectively. The cervix presented five types of external orifices: flap, duckbill, spiral, rosette and hole. The duckbill (51%) was the most frequently observed type of external orifice. The mean number of cervical rings was 5.68, with a minimum of 3 and a maximum of 8 and they presented a funnel shape, being wider at both ends and narrower in the middle. The mean internal diameter of the rings was 2.98±1.21 cm, and the smallest diameter was observed in the fourth ring. The finding of “cul-de-sac” in some of the rings was a new information, and appeared in 100% on the first 2 rings. Histologically, the cervix showed a simple ciliated columnar epithelium, although at the caudal region the epithelium sometimes was showed stratified squamous cells. Villi were observed all along the cervix. Just below the epithelium, the connective tissue was divided in 3 layers: the first, closest to the epithelium, was dense and regular, the second was dense and irregular, and the third was loose. Veins, capillaries and nerves were present. In conclusion, the results obteined in thid present study may contribute to the development of commercial devices and programs to artificial insemination technique (transcervical method) and they must de considered alltogether.

Orientador: Aloisio Jose Bedone / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-21T17:15:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sousa_LourivaldoRodriguesde_D.pdf: 2842913 bytes, checksum: 2bb70d08cfbf4cfd1f12f95f12dfc7f4 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Com o objetivo de avaliar os resultados gestacionais de um programa de Inseminação Artificial com Sêmen de Doador (IAD), foi realizado um estudo clínico observacional com 480 casais no Instituto Valenciano de Infertilidade (IV!) - Espanha, utilizando diferentes esquemas' de estimulação ovariana ou não, no período de janeiro de 1990 a dezembro de 1994. Esses casais submeteram-se a 1429 ciclos de inseminações intra¬ uterina (IIU), sendo que 235 eram pacientes cujos maridos apresentavam diagnóstico de azoospermia e 245 mulheres cujos maridos apresentavam esterilidade masculina de causa severa. O tempo médio de esterilidade foi de 4,6 anos e a idade média das mulheres foi de 31,8 anos. Para análise dos dados foi utilizado o modelo estatístico de Kaplan-Meier, sendo considerados significativos valores de P < 0,05. "Foram obtidas um total de 253 gestações, com uma taxa de gestação por paciente de 52,7% e uma taxa acumulada de gestação em seis ciclos de 67,1%. Observamos resultados gestacionais significativamente melhores no grupo com estimulação ovariana (notadamente no grupo com FSHhp) quando comparados com o grupo sem estimulação. Os resultados gestacionais obtidos após três e seis ciclos de inseminações foram muito semelhantes. Os resultados.gestacionais foram melhores no grupo de pacientes azoospérmicos apenas nos ciclos naturais. Não houve influência do fator idade nos resultados analisados. Concluímos que a taxa de gestação por paciente e a taxa acumulada de gestação foram superiores no grupo cuja ovulação fora estimulada com FSHhp e que os resultados gestacionais obtidos com três e seis ciclos não foram diferentes / Abstract: In order to evaluate the outcome pregnancy rate of the IAD program were performed a observationaI c1inic study on Institut Valenciano de InfertiIidad- Valencia - Spain ITom 1990 to 1994. 480 infertiIes coupIes had 1429 cyc1es of IUI inseminations resulting 253 pregnancies. Among this coupIes, 235 were pacients whose husbands presented azoospermia and 245 coupIes whose husbands presented infertiIity of severe male cause. The couples presented and average history of infertility of 4.6 :t 1.1 years. The women average was 31.8 :t 4.2 years oId. For this anaIysis we used the Statical model ITom Kaplan-Meier, using P < 0,05.The pregnancy rate per patient were 52.7% and the accumulated rate ofpregnancy in6 cyc1es of 67,1 %. We observed pregnancy rate significative higher in the ovarian stimulation (namely in the FSHhp group) who compared with natural cyc1es. Similar outcome pregnancy rate were obtained after 3 and 6 inseminations cyc1es. We observed the differences between the results obtained in couples with azoosperm partners and with oligoasthenosperm partners just in the natural cycles group. The age factor had no influence in the results.We conc1uded that the 111 pregnancy rate were superior in the group that received ovarian stimulation rather than the natural cycles, obtained with FSHhp higher pregnancy rate and, similar rates pregnancy with 3 and 6 cycles were observed. / Doutorado / Tocoginecologia / Doutor em Medicina

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-06-25Bitstream added on 2014-06-13T19:59:08Z : No. of bitstreams: 1 ferreira_hn_me_botfmvz.pdf: 1011320 bytes, checksum: 580bc2d954eb7255f8443446beff03ee (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O processo de congelação e descongelação de sêmen induz a diversos efeitos deletérios na célula espermática. Crioprotetores são adicionados aos meios de congelação para minimizar esses danos, entretanto altas concentrações dessas substâncias aumentam sua toxicidade e, conseqüentemente, diminui a fertilidade. É importante o equilíbrio entre habilidade crioprotetora e toxicidade desses componentes. As amidas têm se mostrado um crioprotetor de baixa toxicidade, especialmente para garanhões de má congelabilidade e para outras espécies de animais. O presente estudo objetivou determinar a viabilidade e o efeito contraceptivo dos crioprotetores glicerol (GL) e metilformamida (MF) para congelação de sêmen de garanhões. EXPERIMENTO I: Foi colhido o sêmen de 10 garanhões com uma vagina artificial, diluído (1:1) em meio à base de leite (Botu-sêmen®) e centrifugado (600xg/10min). Foram ressuspendidos os pellets com meio de congelação (INRA82) contendo três concentrações diferentes de GL (2, 3 e 4,5%) e MF (2, 3 e 4,5%) e um grupo controle (Contr.) sem adição de crioprotetor, na concentração de 100x106 espermatozóides/mL. O sêmen foi envasado em palhetas de 0,5mL, resfriado a 5°C/1hora e mantido em vapor de nitrogênio durante 15 minutos e daí imerso em nitrogênio líquido. As amostras foram avaliadas após o período de estabilização (5°C/1hora) bem como após a descongelação (46°C/20seg) pelo sistema computadorizado (HTMA-IVOS-10). Foram avaliados parâmetros de motilidade, e através de Microscopia de Fluorescência, foi avaliada a integridade de membranas (plasmática e acrossomal) e potencial da membrana mitocondrial. A análise estatística foi realizada por ANOVA e teste de Tukey com significância de 5%. No período pós-estabilização a única diferença observada foi no parâmetro de motilidade progressiva, onde o grupo MF2% (25,7%) foi superior... / The frozen thawing semen process induce several damages on sperm cells. The use of cryoprotectors is fundamental to protect the spermatozoa from frozen-thawing damage, however high concentrations of these compounds can decrease the fertility. It is very important to balance the ability to cryoprotect with cryoprotector toxicity. Amidas has been shown to have a low toxicity specially for bad freezer stallions and some other species. The present experiment aimed to determine the effect of exposition on glycerol (GLY) and methylformamida (MF) over viability and fertility of stallion semen. On experiment I one ejaculated from 10 stallions was collected and diluted (1:1) in skim milk extender (Botu-sêmen®) and centrifuged (600g/10min). The sperm pellets were resuspended with a frozen extender (INRA82) containing 3 different concentrations of GLY (2, 3 or 4,5%) and MF (2, 3 or 4,5%) and a control group. (Contr.) using a concentration of de 100x106 esperm/mL. Semen was packaged in 0,5mL straws, cooled at a 5°C/1hour, maintained over nitrogen and finally frozen. The motility parameters were evaluated after stabilization (5°C/1hour) and again after frozen thawing (46°C/20seg) by CASA (HTMA-IVOS-10). Membrane integrity (Plasmatic and Acrossomal) and mitochondrial potential of membrane were also evaluated using fluorescent probes. ANOVA and Tukey test were used for statistical evaluation. After the stabilization time the only parameter that was different was the progressive motility (PM) that was higher on MF2% group (25,7%) when compared with Control Group (13,5%). No differences (p>0.05) were observed on Total Motility (TM) when concentrations of the same cryoprotector were compared, however differences favorable to MF were detected when comparisons were...(Complete abstract, click electronic access below)

Orientador: Marco Antonio Alvarenga / Banca: Frederico Ozanam Papa / Banca: Rubens Paes de Arruda / Resumo: O processo de congelação e descongelação de sêmen induz a diversos efeitos deletérios na célula espermática. Crioprotetores são adicionados aos meios de congelação para minimizar esses danos, entretanto altas concentrações dessas substâncias aumentam sua toxicidade e, conseqüentemente, diminui a fertilidade. É importante o equilíbrio entre habilidade crioprotetora e toxicidade desses componentes. As amidas têm se mostrado um crioprotetor de baixa toxicidade, especialmente para garanhões de má congelabilidade e para outras espécies de animais. O presente estudo objetivou determinar a viabilidade e o efeito contraceptivo dos crioprotetores glicerol (GL) e metilformamida (MF) para congelação de sêmen de garanhões. EXPERIMENTO I: Foi colhido o sêmen de 10 garanhões com uma vagina artificial, diluído (1:1) em meio à base de leite (Botu-sêmen®) e centrifugado (600xg/10min). Foram ressuspendidos os pellets com meio de congelação (INRA82) contendo três concentrações diferentes de GL (2, 3 e 4,5%) e MF (2, 3 e 4,5%) e um grupo controle (Contr.) sem adição de crioprotetor, na concentração de 100x106 espermatozóides/mL. O sêmen foi envasado em palhetas de 0,5mL, resfriado a 5°C/1hora e mantido em vapor de nitrogênio durante 15 minutos e daí imerso em nitrogênio líquido. As amostras foram avaliadas após o período de estabilização (5°C/1hora) bem como após a descongelação (46°C/20seg) pelo sistema computadorizado (HTMA-IVOS-10). Foram avaliados parâmetros de motilidade, e através de Microscopia de Fluorescência, foi avaliada a integridade de membranas (plasmática e acrossomal) e potencial da membrana mitocondrial. A análise estatística foi realizada por ANOVA e teste de Tukey com significância de 5%. No período pós-estabilização a única diferença observada foi no parâmetro de motilidade progressiva, onde o grupo MF2% (25,7%) foi superior... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The frozen thawing semen process induce several damages on sperm cells. The use of cryoprotectors is fundamental to protect the spermatozoa from frozen-thawing damage, however high concentrations of these compounds can decrease the fertility. It is very important to balance the ability to cryoprotect with cryoprotector toxicity. Amidas has been shown to have a low toxicity specially for bad freezer stallions and some other species. The present experiment aimed to determine the effect of exposition on glycerol (GLY) and methylformamida (MF) over viability and fertility of stallion semen. On experiment I one ejaculated from 10 stallions was collected and diluted (1:1) in skim milk extender (Botu-sêmen®) and centrifuged (600g/10min). The sperm pellets were resuspended with a frozen extender (INRA82) containing 3 different concentrations of GLY (2, 3 or 4,5%) and MF (2, 3 or 4,5%) and a control group. (Contr.) using a concentration of de 100x106 esperm/mL. Semen was packaged in 0,5mL straws, cooled at a 5°C/1hour, maintained over nitrogen and finally frozen. The motility parameters were evaluated after stabilization (5°C/1hour) and again after frozen thawing (46°C/20seg) by CASA (HTMA-IVOS-10). Membrane integrity (Plasmatic and Acrossomal) and mitochondrial potential of membrane were also evaluated using fluorescent probes. ANOVA and Tukey test were used for statistical evaluation. After the stabilization time the only parameter that was different was the progressive motility (PM) that was higher on MF2% group (25,7%) when compared with Control Group (13,5%). No differences (p>0.05) were observed on Total Motility (TM) when concentrations of the same cryoprotector were compared, however differences favorable to MF were detected when comparisons were...(Complete abstract, click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-08-22Bitstream added on 2014-06-13T20:20:21Z : No. of bitstreams: 1 akl_ld_me_botfm.pdf: 1320418 bytes, checksum: b218f66903a6b88bbbc8c40a7875a1fd (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Although motile sperm organelle morphology examination (MSOME) was developed only as a selection criterion, its application as a method for classifying sperm morphology may represent an improvement in the evaluation of semen quality. This study aimed to determine the prognostic value of normal sperm morphology by MSOME regarding clinical pregnancy (CP) after intrauterine insemination (IUI). A total of 156 IUI cycles performed in 111 couples were prospectively analyzed. All subjects received 75IU recombinant FSH every other day from the third day of the cycle. On the 10th day of the cycle, follicular development started to be monitored by vaginal ultrasound. When one or two follicles measuring ≥17mm were observed, recombinant hCG was administered and IUI was performed 12-14h and 36-40h after hCG. Before the IUI procedure, sperm samples were analyzed according to MSOME at 8400x magnification with an inverted microscope equipped with DIC/Nomarski differential interference contrast optics. At least 200 motile spermatozoa per semen sample were evaluated and percentages of normal spermatozoa were determined. Pregnancy occurred in 34 IUI cycles (CP rate per cycle: 21.8%, per patient: 30.6%). A statistically significant higher incidence of normal spermatozoa according to the MSOME criterion was found in the group of men in which IUI cycles resulted in pregnancy (2.6±3.1%) compared to the group that did not achieve pregnancy (1.2±1.7%; P=0.019). Logistic regression showed that the percentage of normal cells in the MSOME was determinant for the likelihood of clinical pregnancy (OR: 1.28; 95% CI: 1.08 to 1.51; P=0.003). The ROC curve showed an area under the curve of 0.63 and an optimum cut-off point of 2% of normal sperm form. At this cut-off level, the ability of the percentage of sperm normal form by MSOME to predict pregnancy present 50% sensitivity, 40% positive predictive value, 79%... (Complete abstract click electronic access below)