Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-08-26T14:45:40Z No. of bitstreams: 1 Wellington Marques da Silva.pdf: 838955 bytes, checksum: 5c601201dc688914f0da042a97074570 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-26T14:45:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Wellington Marques da Silva.pdf: 838955 bytes, checksum: 5c601201dc688914f0da042a97074570 (MD5) Previous issue date: 2015-02-26 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The Tuta absoluta is a key pest of tomato crops and the use of insecticides is still the main method of control. However, overuse of them has contributed to the development of resistant populations. Although the pyrethroid resistance mechanism in this species has been described, there is no information on their status in Brazilian populations. Regarding the spinosyns, despite the reports of resistance to these molecules, the underlying mechanisms are unknown. The objective of this research was to characterize the resistance to pyrethroids and spinosad in Brazilian populations of T. absoluta by conventional methods (bioassays), enzymatic and molecular assays. All populations tested were resistant to pyrethroids. The GSTs activity and cytochrome P450-mediated N-demethylation was significantly correlated with the level of resistance to deltamethrin and permethrin suggesting that these enzymes can play a role in resistance. TaqMan assays demonstrated that the mutation in L1014F sodium channel is fixed in all populations and is associated with other mutations T929I and M918T. Spinosad synergism (synergistic with PBO, DEF, and DEM) indicated that the metabolic enzymes are not involved in resistance. Comparison of the nucleotide sequence of the subunit of the nicotinic receptor α6 T. absoluta susceptible and resistant to the point spinosad allowed identification nucleotide change resulting in the substitution of a glycine (G) in the susceptible insects by glutamic acid (E) resistant insects (G275E). The TaqMan assays revealed that the frequency of the resistant allele in the population is low. The diagnostic dose bioassays correlated with the resistant allele frequency. The T. absoluta Brazilian populations are resistant to pyrethroid insecticides and the main mechanism of resistance is the L1014F mutation, while for spinosad insecticide, most people are sensitive and the G275E mutation can lead to the loss of efficiency of this product for control of this plague. / A Tuta absoluta é uma praga importante para a cultura do tomateiro e o uso de inseticidas ainda é principal método de controle. No entanto, a utilização indiscriminada destes tem contribuído para seleção de populações resistentes. Embora o mecanismo de resistência à piretroides nessa espécie tenha sido descrito, não há informações sobre seu status em populações brasileiras. Com relação a espinosinas, apesar dos relatos de resistência a estas moléculas, os mecanismos envolvidos são desconhecidos. O objetivo desta pesquisa foi caracterizar a resistência a piretroides e espinosade em populações brasileiras de T. absoluta por métodos convencionais (bioensaios), ensaios enzimáticos e moleculares. Todas as populações testadas foram resistentes a piretroides. A Atividade de GSTs e citocromo P450 mediado por N-desmetilação correlacionou-se significativamente com o nível de resistência a deltametrina e permetrina sugerindo que estas enzimas podem desempenhar um papel na resistência. Ensaios TaqMan demonstraram que a mutação L1014F no canal de sódio está fixa em todas as populações e foi associada com outras mutações M918T e T929I. Sinergismo de espinosade com PBO, DEF, DEM indicou que as enzimas metabólicas não estão envolvidas na resistência. A comparação da sequência de nucleotídeos da subunidade α6 do receptor nicotínico de T. absoluta suscetíveis e resistentes a espinosade possibilitou a identificação de alteração pontual de nucleotídeo, resultando na substituição de uma glicina (G) nos insetos suscetíveis por um ácido glutâmico (E) em insetos resistentes (G275E). Os ensaios de TaqMan revelaram que a frequência do alelo resistente está baixa nas populações. Os bioensaios de dose diagnóstica correlacionaram com frequência do alelo resistente. As populações brasileiras de T. absoluta são resistentes aos inseticidas piretroides e o principal mecanismo de resistência é a mutação L1014F, enquanto para o inseticida espinosade, a maioria das populações são sensíveis e a mutação G275E pode acarretar a perda da eficiência deste produto.