Graduation date: 1979

Thèses (Ph.D.)--Université de Sherbrooke (Canada), 1998. / Titre de l'écran-titre (visionné le 20 juin 2006). Publié aussi en version papier.

Orientador: Glaucia Maria Pastore / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-23T01:23:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_ViniciusdosSantosRibeiroda_M.pdf: 26148389 bytes, checksum: 078fcf15329fd9b2c0d77014ab873f99 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Nas últimas décadas as Indústrias de Alimentos e Farmacêutica, têm demonstrado grande interesse na aplicação potencial de lipases de diferentes fontes como as de origem animal, as lipases de plantas e especialmente as lipases microbianas por sua capacidade de produção e especificidade. Deste modo, este trabalho teve como objetivo caracterizar bioquimicamente uma lipase fúngica de uma linhagem de Rhizopus ainda não relatada na literatura. A lipase de Rhizopus sp. linhagem n° 14, isolado no laboratório de Bioquímica de Alimentos do Departamento de Ciências de Alimentos (FEA/UNICAMP), foi produzida em meio semi-sólido constituído de farelo de trigo e água na proporção 60 / 40 (p/v). Esta linhagem foi escolhida por ter sido a que melhor produziu a enzima neste meio de fermentação. O extrato enzimático bruto ou lipase bruta foi extraído do meio após 120 horas de incubação a 30°C, por precipitação em sulfato de amônio. A atividade lipolítica foi testada contra os substratos gordura de côco, óleo de oliva, óleo de mamona, gordura do leite de cabra e o substrato sintético p-nitrofenil-laurato. A enzima mostrou maior atividade para hidrolisar gordura de côco, frente aos outros substratos. O extrato enzimático bruto foi parcialmente purificado em coluna de DEAE-Sephadex A-50, sendo obtidas duas frações, as quais foram submetidas a testes bioquímicos para a caracterização de suas propriedades em substrato sintético p-nitrofenil-laurato. As frações apresentaram um perfil de atividade em temperatura na faixa de 40 a 55°C e temperatura de estabilidade na faixa de 24 a 40°C, e, pH ótimo de 6,0 a 6,5 e mostraram-se estáveis na faixa de pH de 5,6 a 7,5, semelhante a enzima bruta. / Abstract: Interest on lipases from different sources (microorganisms, animals and plants), has markedly increased in the last decade due to the potential applications of lipases in Food and Pharmaceutical Industries. The objective of this work was to characterize the biochemical from the lipase of Rhizopus sp fungal. These lipase has not still reported. The lipase from Rhizopus sp,strain n.O 14, isolated in the Food Biochemistry Laboratory (DCA/ FEA/ UNICAMP),was produced in a solid state medium, wich consited of 60% wheat bran and 40% water. This strain was selected based on high activity of extracelular lipase in the broth. The cru de enzyme extract was obtained from the culture medium after 120 hours incubation at 30°C. The lipolytic activity was tested using as substrate cocconut fat, olive oil, castor oil, goat' s milk fat and p-nitrophenylaurate synthetic substrat. The enzyme demonstrated the highest activity on hydrolyzed coconut fat as compared to others substrates. The crude enzyme extract was purified on DEAE-Sephadex A-50 column. two fractions were obtained. These fractions were submitted to biochemical tests to characterize their properties on p-nitrophenylaurate synthetic substrate. The fractions presented activity in the range of 40°C to 55°C and thermostability in the range of 24 'DEGREE'C to 40 'DEGREE'C. Optimum pH of the enzymes was 6,5 - 7,5. It showed to be stable in pH's of 5,6- 7,5. These data were similar in the crude enzyme. / Mestrado / Mestre em Ciência da Nutrição

Orientador: Glaucia M. Partore / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-28T13:06:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SoberonLozano_MariaMercedes_D.pdf: 17111705 bytes, checksum: 06478ceaa6a7e39816460e2443cdd3f8 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A propriedade enantioseletiva de uma lipase parcialmente purificada isoladade Rhizopussp foi estudadaatravésde umsistemade esterificaçãodo ácido láurico e o álcool quiral 2-octanol. Os experimentos foram realizados nas seguintes condições: proporção de substratos 1:1, 10 unidades hidrolíticas de lipase, presença de peneira molecular na reação, presença e ausência de hexano, e nas temperaturasde 45°C e 50°C respectivamente. Diferentes métodos foram utilizados para medir a enantioseletividade da lipase: reações usando o álcool 2-octanol na suas formas ( R ) e ( S ) puras, assim como a forma racêmica do álcool. Os experimentos foram analisados através de cromatografia gasosa convencional e cromatog rafia quiral. A enantioseletividadeda enzima foi estudada considerando os parâmetros de conversão de álcool ( 'dzeta' ), excesso enantiomérico do substrato residual ( ees ), excesso enantiomérico do produto ( eep ) e os valores de enantioseletividade (E ) obtidos com (ees) e (eep). Os resultadosmostraramque a enzima em estudo catalisou com maior eficiência a forma ( R )-enantiômero do 2-octanol do que a sua contraparte.Esta catálise enantioseletivada enzima aumentou com a presençade hexano, no sistemareacional. Os valores de ( 'dzeta' ), ( ees), ( eep), e ( E ) foram dependentesda temperaturana ausência de hexano no meio de reação. As constantescinéticas, constante de Michaelis-Menten ( Km), e velocidade máxima (Vmax), foram calculadaspara cada enantiômero observando-se diferenças significativas nos valores de Vmax.Os resultados obtidos com diferentes ácidos graxos mostraram uma melhor afinidade da enzima por o ácido octan6ico seguido do ácido láurico, indicando que o comprimento da cadeia alifática do ácido graxo é um fator importante na avaliação da esterificação enantioseletiva da lipase de Rhizopus sp. / Abstract: The enantioselective property of partially purified lipase from Rhizopus sp, was tested by esterification of lauric acid with 2-octanol alcohol media. The experiments were performed in equal molar proportion of substrates, 10 hydrolytic activity units of lipase both, in organic solvent and organic solvent free media at 45°C and 50°C of temperature.The presence of molecular sieves in the reaction was important for the synthesis of ester by lipase. Different methods of determining the enantios electivity was used: reaction using single enantiomers as well as racemic mixture. Experiments were analyzed by capillary GC with conventional and chiral columns.The enantioselectivity of the enzyme was studied measuring degree conversion ('dzeta'), substrate enantiomeric excess (ees), product enantiomeric excess (eep)and enantiomeric ratio (E). The results showed that (R)-2-octanol was better substrate than (S)-2-octanol for the enzyme. This enantio specificity preference of Rhizopus sp lipase toward (R)-2-octanol increasedwith the presenceof hexane in the reaction.'dzeta', ees, eep and E values were dependent on temperature, and presence of solvent in reaction media. Km and Vmax values were calculated for each enantiomer observing that highest enantioselectivity was reflected in the largest variance of Vmax values. Results obtained with different fatty acids showed that long chain acyl fatty acids were better substrates (e.g: octanoic, lauric, myristic acids). So, the size of fatty acid is an important factor to be considered in the study of enantio selective esterification of Rhizopus sp lipase. / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Orientador: Glaucia Maria Pastore / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-20T05:57:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Macedo_GabrielaAlves_M.pdf: 10244837 bytes, checksum: 57a05b7e6b10a10186d65d76fd3a6e09 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: Setecentas linhagens de leveduras foram isoladas de amostras de solo, frutas, água, resíduos industriais e testadas quanto à capacidade de hidrolisar glicerídeos através da produção de lipase extracelular. Destas linhagens, cinco foram pré selecionadas como produtoras de lipase. Foi encontrada uma linhagem identificada como Geotrichum sp que apresentou alta produção de lipase em meio de cultivo composto por 1.5 % de farinha de soja desengordurada, 1% de farinha de trigo, 3% de extrato de levedura, 0.2 % NH4NO3, quando incubada a 30 °C por 48 horas com agitação de 100 rpm. A lipase de Geotrichum sp hidrolisa preferencialmente ésteres de ácidos graxos de cadeia longa insaturada e não tem afinidade pelo substrato p-nitrofenil laurato. A lipase de Geotrichum sp foi purificada 16.5 vezes através de fracionamento com sulfato de amónio e Cromatografia em coluna de DEAE-Sephadex A-50. A enzima purificada foi caracterizada bioquimicamente verificando-se que possui duas subunidades de peso molecular estimado em 52000 e 57000, através de eletroforese vertical em gel SDS- poliacrilamida. A lipase de Geotrichum sp apresentou atividade ótima na faixa de pH 5 a 8 a 45°C. A atividade enzimática foi acrescida em 45% na presença de 1 mM MgS04 no sistema de reação. A enzima não sofreu ação inibitória na presença de p-cloromercuribenzoato quando pura. A esterificação enzimática de ácido graxo e glicerol pela lipase de Geotrichum sp foi examinada e verificou-se que a enzima catalisou a reação de esterificação de ácido oléico em glicerol, com incorporação de 63% do ácido oléico após 2 horas de reação a 40°C / Abstract: The screening of lipase producing yeasts was performed including 700 strains of microorganisms which were isolated from samples of soil, fruits, and industrial residues. It was found that five strains produced high activity of extra cellular lipase and one of them produced exceptionally higher lipase activity. This strain was identified as Geotrichum sp. The lipase from Geotrichum sp was produced by liquid fermentation in medium containing 1.5 % deflated soybean flour, 1% wheat flour, 3% yeast extract, 0.2 % NH4NO3, at 30°C for 2 days. The lipase from Geotrichum sp hydrolysed preferentialy esters of fatty acids with high insaturated chain and it did not hydrolysed the sinthetic substrate p-nitrophenil laurate. The lipase was purified by fractionation with ammonium sulfate and DEAE- Sephadex A-50 column cromatography.The purified lipase was characterized and was found that optimum pH and temperature were between 5-8, and 45°C, respectively. The enzyme activity increased by the presence of MgS04, 0.1mM and was not inhibited in the presence of enzyme nhibitors. Enzymatic esterification using glicerol and fatty acid by lipase from Geotrichum sp was also examined. It was found that reaction system esterified 63% triglyceride after 2 hours of reaction time at 40 °C. The enzyme was shown to be constituted by two subunits. The molecular weight of the subunits was estimate to be 52000 - 57000 daltons by SDS-poliacrylamide gel / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos

Thesis (doctoral)--Lund University, 1996. / Added t.p. with thesis statement inserted.

Thesis (doctoral)--Lund University, 1996. / Added t.p. with thesis statement inserted.

Mémoire (M.Méd.Exp.)--Université du Québec à Chicoutimi, 2002. / Document électronique également accessible en format PDF. CaQCU

Thesis (Ph. D.)--University of Pennsylvania, 1934. / "Literature cited": p. 14.

Thesis (Ph. D.)--University of Pennsylvania, 1934. / "Literature cited": p. 14.