O objetivo dessa dissertação foi avaliar os efeitos do cálcio na indução de morfogênese, mais especificamente na embriogênese somática de Eucalyptus urophylla a partir de hipocótilos cultivados “in vitro". Análises bioquímicas e histológicas foram realizadas visando observar o papel do cálcio nos conteúdos de proteínas e açúcares totais, na atividade específica da peroxidase e na morfogênese, a qual foi avaliada mediante técnicas de histologia. As concentrações de cálcio (na forma de CaCl2H20) variaram de O a 12,12 mM e foram adicionadas ao meio de cultura descrito por Simola (1985) sendo que a concentração de cálcio presente nos calos foi determinada diretamente por Espectrometria  de Fluorescência de Raios-X, um método não-destrutivo que permitu que as mesmas amostras quantificadas fossem utilizadas nas análises histológicas. Uma análise estatística multivariada (Análise de Componentes Principais - PCA) permitiu agrupar os tratamentos em 5 blocos e indicou o grupo mais responsivo para uma resposta morfogênicas considerando as interações entre todos os parâmetros avaliados. Em baixas concentrações de cálcio veirificou-se ausência de resposta morfogênica e a histologia revelou tecidos colapsados e dessaranjados. Aumentando a concentração do cátion, os teores de proteínas e açúcares totais e a atividade específica da peroxidase também aumentaram. Ao nível histológico foram verificadas diferenças entre os tratamentos e foi possível verificar que a concentração de cálcio de 6,62 mmoI.L-1 , estimulou a formação de embriões somáticos globulares. / The aim of this work was to evaluate the calcium effects in the morphogenesis induction, speciffically in the somatic embryogenesis of Eucalyptus urophylla hipocotils. Biochemical and histological analysis were performed in order to observe the calcium role in the total protein and sugar contents, in the peroxidase specific activity and in the morphogenesis, wich was evalueted by histology. The calcium (CaCb.2H20) concentrations from 0.0 to 12.12 mM were added to Simola (1985) culture medium and calcium concentration in calli was determined directly by X-Ray Flourescence Spectrometry, a non-destructive technique, allowing for the processing of thesame tissue for histological analysis. A multivariate analysis (PCA-Principal Components Analysis) grouped the treatments into 5 clusters and indicated the more responsive group for a morphogenic response considering the interactions between the evaluated parameters and the calcium concentration. Lack of calcium supply caused a complete absence of a morphogenic process and tissue collapsing. The increase in calcium concentration favored the presence of higher total protein and sugar contents, the increase of peroxidase specific activity and changes in the histological characteristics. It was possible to verify that calcium stimulated globular somatic embryo formation at concentration of .62 mmoI.L-1

É inegável que o Brasil possui condições únicas no que diz respeito à produção animal baseada em pastagens. No entanto, os avanços têm sido homeopáticos e revelam uma inércia muito grande por parte do setor produtivo e uma fragilidade conceitual na interpretação dos resultados obtidos pela pesquisa, de tal forma que o caráter dinâmico e sistêmico de ecossistemas de pastagens devem ser sempre considerados. Dentro desse contexto, o objetivo deste experimento foi estudar aspectos morfogênicos, características de perfilhos individuais e a dinâmica do perfilhamento e do acúmulo de forragem em pastos de capim-Marandu pastejados por bovinos em regime de lotação contínua e taxa de lotação variável. O experimento foi realizado em área do Departamento de Zootecnia da USP/ESALQ, em Piracicaba, SP, entre 21 de novembro de 2001 e 21 de dezembro de 2002. Os tratamentos corresponderam a quatro alturas de dossel (10, 20, 30 e 40 cm), mantidas em steady state, e foram alocados às unidades experimentais conforme um delineamento de blocos completos casualizados, com quatro repetições. Características morfogênicas e de dinâmica do acúmulo de forragem foram avaliados em 30 perfilhos marcados por unidade experimental. Os intervalos entre as avaliações foram de 3 ou 4 dias durante o verão e com um máximo de 10 dias durante o inverno e início da primavera. As características individuais das unidades de desenvolvimento vegetativo foram avaliadas em 60 perfilhos colhidos em locais dos piquetes representativos da condição do dossel no momento da amostragem. As variáveis analisadas incluíram: massa, volume, área foliar média, relação folha: has te e razão área foliar: volume por perfilho. A dinâmica do perfilhamento foi avaliada em anéis de PVC de 30 cm de diâmetro fixados ao solo por grampos de metal. Mensalmente foram avaliadas as taxas de aparecimento, sobrevivência e mortalidade de perfilhos e relações entre elas derivadas. Os maiores valores de filocrono foram observados em pastos mantidos a 40 cm e os menores naqueles mantidos a 10 cm. Além disso, houve um efeito sazonal, onde os maiores valores foram registrados durante o início da primavera e os menores no final da primavera e verão. Pastos mais baixos apresentaram maiores densidades populacionais de perfilhos pequenos e vice-versa, evidenciando o mecanismo de compensação tamanho/densidade populacional de perfilhos. No entanto, análises de estabilidade dos pastos indicaram que a densidade populacional per se não deve ser utilizada como um índice isolado de persistência ou produtividade. Os coeficientes angulares da relação Log x Log entre densidade populacional de perfilhos e massa média por perfilho revelou que praticamente não houve vantagens em se manter os pastos de capim-Marandu acima de 30 cm. Adicionalmente, o acúmulo líquido de forragem foi maximizado entre as alturas de 20-30 cm no período de verão e entre 10-20 cm nos períodos mais frios e secos do ano, indicando que o capim-Marandu possui exigências sazonais de manejo do pastejo. / Brazil is a unique environment for developing efficient and sustainable pastoral systems of animal production. Advances in this area have been modest however, resulting in slow progress and revealing deficiencies of the current conceptual basis used for interpreting results from research, particularly those related to the dynamic and systemic characteristic of plant and animal responses to management in pastoral ecosystems. Against that background, the objective of this experiment was to study the morphogenesis, characteristics of individual tillers and tillering and herbage accumulation dynamics in Marandu grass swards continuously stocked by cattle. The experiment was carried out at Departamento de Zootecnia, USP/ESALQ, Piracicaba, SP, from November 2001 to December 2002. Treatments corresponded to four steady state sward conditions (10, 20, 30 and 40 cm sward surface height) and were allocated to experimental units according to a complete randomized block design with four replications. Morphogenetic traits and herbage accumulation dynamics were evaluated on 30 marked tillers per experimental unit. Measurements were performed every 3 or 4 days during the summer and at intervals no longer than 10 days during the winter and early spring. Characteristics of individual tillers were monitored on 60 tillers harvested in areas representative of the sward condition at the time of sampling. The following variables were recorded: tiller weight, volume, leaf area, leaf: stem ratio and leaf area: volume ratio. Tillering dynamics was evaluated within 30-cm diameter PVC rings anchored to the soil. Every 30 days, rates of tiller appearance, survival and death were determined and associations between them derived. The highest and the lowest phyllochron values were recorded for the 40 and 10 cm swards, respectively. There was a seasonal effect characterized by highest values during early spring and lowest values during late spring and summer. Short swards showed higher tiller population densities of small tillers than tall swards and vice-versa, indicating the existence of a tiller size/population density compensation mechanism. Tiller population stability analysis indicated that population density alone cannot be used as an index for characterizing pasture persistence and productivity. Linear coefficients of the Log x Log regression between tiller population density and mean tiller weight revealed no advantages for keeping Marandu grass pastures taller than 30 cm. Additionally, net herbage accumulation was maximized between 20-30 cm during the summer and 10-20 cm during periods of low rainfall and mild temperatures, indicating that Marandu grass has seasonal grazing management requirements.

Recentemente, estudos envolvendo o conhecimento das características morfogênicas e estruturais de plantas forrageiras adquiriram grande importância por auxiliarem na compreensão do que ocorre com estas nas pastagens, quando submetidas a estratégias de manejo do pastejo. Frequentemente a adubação nitrogenada é utilizada como forma de promover aumento do ritmo de crescimento das plantas que, por meio da renovação de perfilhos, pode resultar em modificações significativas da faixa etária de perfilhos que compõem o pasto, influenciando as respostas morfogênicas e estruturais da planta forrageira. O objetivo deste experimento foi avaliar a influência da idade dos perfilhos sobre as características morfogênicas e estruturais de pastos de capim-marandu mantidos a 30 cm de altura por meio de lotação contínua e submetidos a ritmos morfogênicos contrastantes gerados por meio de adubação nitrogenada. Os tratamentos corresponderam à aplicação de três doses de nitrogênio (150, 300 e 450 kg/ha de N) mais o controle (sem adubação), e foram alocados às unidades experimentais (piquetes de 1.200 m2) segundo um delineamento de blocos completos casualizados, com quatro repetições. Foram avaliadas as seguintes variáveis-resposta durante o outono/inverno de 2007 e o verão de 2008: taxa de aparecimento de folhas (TApF), filocrono (dias), taxa de alongamento de folhas (TAlF) e de colmos (TAlC), duração de vida das folhas (DVF), taxa de senescência de folhas (TSeF), comprimento final das folhas expandidas (CFF), comprimento de colmo (CC), número de folhas em expansão (NFE), número de folhas senescentes (NFS), número de folhas vivas por perfilho (NFV) e a faixa etária dos perfilhos na população de plantas. De forma geral, ritmos morfogênicos mais acelerados (pastos adubados com 300 e 450 kg/ha de N) resultaram em população de perfil mais jovial que ritmos morfogênicos mais lentos (pastos não adubados e/ou adubados com 150 kg/ha de N). Perfilhos jovens apresentaram maiores valores de TApF e de TAlF e menores valores de filocrono e de DVF que perfilhos maduros e velhos. Essas variações em respostas morfogênicas resultaram em maior CFF e NFV para perfilhos maduros, menor NFE para perfilhos velhos e menor CC e NFS para perfilhos jovens no outono/inverno. Já no verão, resultaram em menor CFF e NFV para perfilhos velhos, e menor CC para perfilhos jovens. Ritmos morfogênicos mais acelerados determinam uma população com um perfil mais jovial, caracterizada por aparecimento e alongamento de folhas mais rápido que perfilhos maduros e velhos, indicando que estratégias de manejo do pastejo e/ou práticas agronômicas que permitissem maior renovação da população de perfilhos poderiam resultar em aumentos de produção de forragem, contribuindo para aumentos de produtividade animal. / Recently, studies focusing on morphogenetic and structural characteristics have become increasingly important since they facilitate the understanding of forage plants when subjected to grazing. Quite often nitrogen fertilisation is used as a means of increasing growth rhythm of plants that, because of the turnover in tiller population, may result in significant modifications in the age profile of tillers comprising the pasture and interfere with their morphogenetic and structural responses. The objective of this experiment was to evaluate the influence of tiller age on morphogenetic and structural responses of continuously stocked marandu palisadegrass swards maintained at 30 cm and subjected to contrasting morphogenetic rhythms created by nitrogen fertilisation use. Treatments corresponded to three nitrogen application rates (150, 300 e 450 kg/ha de N) plus the control (no fertilisation) and were assigned to experimental units (1200 m2 paddocks) according to a complete randomised block design, with four replications. The following response variables were measured during autum/winter 2007 and summer 2008: leaf appearance rate (LAR), phyllochron (days), leaf (LER) and stem (SER) elongation rate, leaf life span (LLS), leaf senescence rate (LSR), final leaf length of fully expanded leaves (FLL), stem length (SL), number of expanding (NEL), senescing (NSL) and live (NLL) leaves per tiller, and tiller age categories comprising sward tiller population. In general, faster morphogenetic rhythms (swards fertilised with 300 and 450 kg/ha of N) resulted in a younger tiller population than slower morphogenetic rhythms (no fertilised swards or fertilised with 150 kg/ha of N). Young tillers had higher LAR and LER and lower phyllochron and LLS than mature and old tillers. These variations in morphogenetic responses resulted in larger FLL and NLL on mature tillers, lower NEL on old tillers and lower SL and NSL on young tillers in autumn/winter. During summer, they resulted in lower FLL and NLL on old tillers, and lower SL on young tiller. Faster morphogenetic rhythms result in a younger tiller population characterised by higher LAP and LER than mature and old tillers, indicating that management practices that allow fast turnover in tiller population could result in increased herbage accumulation, favouring increases in animal productivity.

A produtividade passível de ser obtida em sistemas de produção baseados em pastagens depende de estratégias de manejo do pastejo compatíveis com o ritmo de desenvolvimento das plantas. Para tanto, é necessário o conhecimento das respostas de plantas individuais às práticas agronômicas adotadas e seus reflexos sobre a estrutura do dossel. O objetivo deste experimento foi avaliar a morfogênese e a estrutura do dossel, assim como seus padrões de variação ao longo do ano, em pastos de capim-marandu mantidos a 30 cm de altura por meio de lotação contínua e submetidos a ritmos morfogênicos contrastantes criados por meio do uso de adubação nitrogenada. Os tratamentos corresponderam ritmos morfogênicos contrastantes criados por meio da aplicação de três doses de nitrogênio (150, 300 e 450 kg/ha de N) mais o controle (sem adubação), e foram alocados às unidades experimentais (piquetes de 1200 m2) segundo um delineamento de blocos completos casualizados, com quatro repetições. Foram avaliadas as seguintes variáveis-resposta de janeiro de 2007 a abril de 2008: densidade volumétrica total (DVT) e dos componentes morfológicos do pasto, distribuição espacial da densidade volumétrica e estrutura do dossel, taxa de aparecimento (TApF) e alongamento de folhas (TAlF), taxa de alongamento de colmos (TAlC), duração de vida das folhas (DVF), comprimento final das folhas expandidas (CFF) e dos colmos (CC), densidade populacional de perfilhos basais (DPPb) e aéreos (DPPa). A aceleração do ritmo morfogênico dos pastos resultou em aumentos de DVT, particularmente na densidade volumétrica de folhas e de colmos. Essas respostas foram mediadas pela aceleração da renovação de tecidos em perfilhos individuais, representadas por aumentos em TApF e TAlF, e pela aceleração na dinâmica de renovação de perfilhos no pasto, resultando em maiores valores de DPPa e DPPb. Essas respostas se refletiram de forma marcante sobre o fluxo de crescimento relativamente ao fluxo de senescência. Isso indica a possibilidade de aumentar a eficiência de utilização dos pastos por meio do uso racional de práticas agronômicas que acelerem o ritmo morfogênico das plantas, já que as respostas demonstraram uma natureza compensatória como forma de manter as características estruturais dos perfilhos e do dossel relativamente estáveis, sendo as diferenças função apenas das variações estacionais em condições climáticas. / Productivity of pastoral systems of animal production depends on the use of grazing management strategies that are compatible with the growth rhythm of plants. In that context, knowledge regarding the response of individual plants to management practices used and their consequences to sward structure is necessary. The objective of this experiment was to evaluate the morphogenetic responses and sward structure, as well as their patterns of change throughout the year, of continuously stocked marandu palisadegrass swards maintained at 30 cm and subjected to contrasting morphogenetic rhythms created by nitrogen fertilisation use. Treatments corresponded to three nitrogen application rates (150, 300 e 450 kg/ha de N) plus the control (no fertilisation) and were assigned to experimental units (1200 m2 paddocks) according to a complete randomised block design, with four replications. The following response variables were measured from January 2007 to April 2008: total herbage (HBD), leaf (LBD), stem (SBD) and dead material (DBD) bulk density, vertical distribution of herbage components and sward structure, leaf appearance (LAR) and elongation (LER) rates, stem elongation rate (SER), leaf life span (LLS), final leaf length of fully expanded leaves (FLL), stem length (SL), population density of basal (TPDb) and aerial (TPDa) tillers. Faster morphogenetic rhythms (swards fertilised with 300 and 450 kg/ha of N) resulted in increased HBD, particularly related to leaf and stem components. Such changes were caused by increases in tissue turnover on individual tillers characterised by higher LAR and LER, and in the turnover of tillers in tiller population, which resulted in larger TPDb and TPDa than those recorded under slower morphogenetic rhythms (no fertilised swards and/or fertilised with 150 kg/ha of N). These responses were more pronounced on sward growth relative to senescence fluxes. This indicates the possibility of increasing herbage utilisation efficiency with wise use of management practices that accelerate the morphogenetic rhythm of plants, since responses showed a compensatory behaviour as a means of maintaining tiller structural characteristics and sward structure relatively stable, with differences being mainly a function of seasonal variations in climatic conditions

O nitrogênio, dentre os nutrientes, é o elemento que apresenta maior efeito sobre a produção de gramíneas forrageiras. As respostas da planta forrageira a adubação nitrogenada podem ser alteradas devido à condição, de área foliar remanescente e teores de nutrientes, que esta planta apresenta quando este nutriente é aplicado. Os objetivos deste trabalho foram avaliar as características morfogênicas e estruturais, o intervalo entre pastejos, acúmulo de forragem e os teores de nutrientes do capim Tanzânia submetido a distintas severidades de desfolhação e fertilidades contrastantes. Os tratamentos corresponderam a combinações entre três alturas de resíduo pós pastejo (20, 30 e 50 cm) e dos níveis de fertilidade de solo (sem adubação e com adubação equivalente a 500, 300 e 150 Kg/ha de nitrogênio, K2O e P2O5 respectivamente), totalizando seis tratamentos sendo que cada tratamento contou com cinco repetições dispostas em blocos totalizando 30 unidades experimentais. Cada unidade experimental correspondia a um piquete de 400 m2. O pastejo foi efetuado quando o dossel forrageiro interceptava 95% da luz incidente. A morfogênese foi avaliada pelas seguintes características: taxa de aparecimento de folhas (TApF), filocrono (FIL), taxa de alongamento de folhas (TAlF), taxa de alongamento de colmos (TAlC), taxa de senescência de folhas (TSeF), duração de vida da folha (DVF), comprimento final da folha (CFF), número de folhas vivas por perfilho (NFV), número de folhas em expansão por perfilho (NFEx), número de folhas expandidas por perfilho (NFE), número de folhas senescentes por perfilho (NFS) e comprimento do colmo (CC). Foram avaliados os teores de nutrientes presentes nas duas folhas recém-expandidas. A amostra foi composta pelo terço médio do limbo foliar de 100 folhas retiradas de 50 perfilhos sendo que a amostragem foi realizada na condição de pré pastejo nos meses de abril e maio de 2010. As adubações criaram um contraste nutricional entre os tratamentos avaliados. O tratamento adubado com maior severidade de desfolhação apresentou os melhores resultados quanto ao acúmulo líquido de forragem e taxas de alongamento foliar. Os resultados obtidos neste experimento indicam a possibilidade de melhoria da eficiência de pastejo e de produtividade animal quando alta fertilidade de solo é combinada a maior severidade de desfolhação. / Nitrogen is the most important nutrient regulating pasture production. Response to N fertilization depends on residual leaf area index and other nutrient availability. The aim of this study was to evaluate morphogenetic and structural characteristics, grazing interval, forage yield and nutritional status of Tanzania guinea grass under contrasting defoliation severities and fertilization rates. The six treatments evaluated were factorial combinations between three post grazing heights (20, 30 e 50 cm) and two fertilization rates (unfertilized and fertilized with 500, 300 and 150 kg/ha of nitrogen, K2O e P2O5 respectively), arranged in five completed blocks, totaling 30 paddocks (experimental units) of 400 m² each.25 beef cattle animals were introduced into paddocks to graze every time sward reached 95% of light interception.Measured responses were leaf appearance rate, phyllochron, leaf elongation rate, stem elongation rate, leaf senescence rate, leaf life span, leaf mature length, live leafs per tiller, elongating leafs per tiller, mature leafs per tiller,senescent leafs per tiller and stem length.Nutritional status was measured in the two younger mature leavesof each tiller, considering 100 leaves sampled from 50 tillers of each paddockbetween May and April 2010. Fertilized and unfertilized treatments presented contrasting nutritional status. A high fertilization level combined with the lowest post grazing height resulted in the higher forage yields and leaf elongation rates. The results point to the possibility of enhancing grazing efficiency and animal production when high fertilizations are combined with high grazing intensity

O presente trabalho teve por objetivo avaliar a atuação de biorreguladores (ANA, BAP, TDZ e 2iP) no desenvolvimento morfogenético de microplantas de pupunheiras. Para tanto, a cada 28 dias aferiram-se o número de propágulos, o desenvolvimento radicular, o comprimento e a taxa de crescimento da parte aérea, número de folhas, oxidação, número de centros meristemáticos na região basal dos explantes e nas bainhas e/ou nos primórdios foliares dos propágulos, número de complexos celulares pró-embriogênicos e as rotas e padrões morfogênicos. Todos os experimentos foram conduzidos em delineamento inteiramente casualizado. Os dados qualitativos foram apresentados como porcentagens e médias gerais e os dados quantitativos foram submetidos à análise de regressão polinomial ou exponencial. As avaliações morfofisiológicas evidenciaram que o TDZ isoladamente favoreceu o desenvolvimento de gemas adventícias, embora curtas e por vezes, com acúleos. Embriões somáticos somente não se desenvolveram em tratamentos contendo a presença isolada de BAP, TDZ e 2iP, nos demais tratamentos observou-se um comportamento exponencial, cujo número foi reduzido e variou apenas em função do período de cultivo. Maior número de raízes foi observado no tratamento contendo ANA em associação ao BAP, embora o tratamento controle tenha induzido maior porcentagem de explantes enraizados e com maior comprimento, sendo o único a evidenciar ramificação. A presença isolada do TDZ promoveu maior comprimento da parte aérea e sua associação ao ANA promoveu a maior taxa de crescimento. O melhor desenvolvimento da parte aérea de microplantas e explantes de pupunheiras ocorreu em meio de cultura MS isento de biorreguladores ou em meio constituído pela associação entre ANA/TDZ aos 140 dias de cultivo, sendo que o acréscimo isolado das citocininas BAP, TDZ e 2iP no meio de cultura MS promoveu tardiamente a taxa máxima de crescimento. A adição isolada do 2iP no meio de cultura promoveu intensa oxidação nas primeiras folhas desenvolvidas das microplantas em explantes de pupunheiras e a aplicação isolada do TDZ ou associada à ANA promoveu anomalias como dobramento foliar e desenvolvimento de acúleos. O monitoramento das rotas e padrões morfogênicos evidenciou que embriões somáticos com origem multicelular originaramse diretamente na região central da base dos explantes nos tratamentos isentos de biorreguladores, na presença isolada de ANA e de TDZ ou na associação de ambos. Pró-embriões com origem unicelular foram induzidos também na presença isolada de ANA ou TDZ e nas associações ANA/BAP ou ANA/TDZ, sendo que pró-embriões com origem multicelular foram induzidos na presença isolada do TDZ a partir da atividade meristemática apical caulinar e a partir da (bi) polarização de elevado número de centros meristemáticos presentes na extremidade distal da base destes explantes. Gemas adventícias com origem multicelular diretamente da extremidade proximal da base dos explantes foram induzidas em maior freqüência no tratamento isento de biorreguladores e no tratamento contendo ANA/TDZ. Entre os primórdios foliares dos explantes, estas estruturas foram freqüentemente induzidas em tratamentos contendo a presença isolada de ANA. / This study aimed to evaluate the role of bioregulators (NAA, BAP, TDZ and 2iP) on the morphogenetic development of pejibaye microplants. For this, every 28 days, the number of propagules, the root development, the length and the growth rate of shoots, the number of leaves, the oxidation, the number of meristematic centers in the explants basal region and in the leaf sheaths and/or in the propagules leaf primordia, the number of pro-embryogenic cell complex and the morphogenic routes and patterns were measured. All experiments were conducted in a randomized design. Qualitative data were presented as percentages and general averages, and quantitative data were subjected to polynomial regression or exponential analysis. The morphophysiological evaluations showed that the TDZ alone favored the development of adventitious buds, although short, and sometimes with thorns. Only in the treatments with the isolated presence of BAP, TDZ and 2iP, somatic embryos were not developed. For the other treatments there was an exponential behavior, in which the number of somatic embryos was reduced and varied according only to the cultivation period. Although a greater number of roots was observed in the treatment, in which NAA was associated with BAP, the control treatment has induced the highest rate of rooted explants and with greater root length, and has been the single one that produced branches. The isolated presence of TDZ promoted the greater shoot length, and its association with ANA promoted the highest growth rate. The best shoot development of pejibaye microplants and explants occurred in the MS bioregulator-free culture medium of or in the medium with NAA/TDZ association, at140 days of cultivation. Moreover, the isolated addition of the cytokinins BAP, TDZ and 2iP in the medium, later promoted the highest growth rate. In pejibaye explants the addition of 2iP alone promoted intense oxidation of the first developed leaves and the application of TDZ alone or associated with ANA promoted anomalies such as folding leaf and thorn development. The monitoring of the morphogenetic routes and patterns showed that in the treatments that were bioregulator-free, or with the isolated presence of NAA and TDZ, or the association of both, somatic embryos, from multicellular origin, raised up directly in the central region of the explants base. Pro-embryos from unicellular origin were also induced in the isolated presence of NAA or in NAA/BAP and NAA/TDZ associations. Moreover, in the isolated presence of TDZ, pro-embryos from multicellular origin were induced from shoot apical meristem activity and from the (bi) polarization of a large number of meristematic centers in the distal extremity of the explants base. Adventitious buds with multicellular origin from the proximal extremity of the explants base were induced more frequently in the bioregulator-free treatment and in the treatment with NAA/TDZ. Between the leaf explants primordia, adventitious buds were often induced by the treatments with the isolated presence of ANA.

A transformação genética vem sendo, cada vez mais, incorporada em programas de melhoramento genético de diversas espécies. Esta técnica permite a incorporação de gene(s) exógeno(s) no genoma das plantas, modificando características específicas. Assim, apresenta-se como uma importante ferramenta de auxílio ao melhoramento convencional de citros, que possui uma série de limitações impostas pela sua biologia reprodutiva. Entretanto, a transformação genética requer o estabelecimento prévio de sistemas de regeneração de plantas in vitro como requisito essencial para sua execução. Portanto, o objetivo deste trabalho foi estabelecer as condições de cultivo in vitro para organogênese e transformação genética de laranja 'Hamlin', laranja 'Pera', laranja 'Valência', laranja 'Natal' (Citrus sinenis L. Osbeck) e limão 'Cravo' (Citrus limonia L. Osbeck), realizando-se a caracterização anatômica do processo. Buscou-se, inicialmente, otimizar o processo de organogênese e regeneração de plantas in vitro, a partir de segmentos de epicótilo. Explantes foram introduzidos em meio de cultura MT suplementado com BAP, nas concentrações 0,0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 3,5; 4,0 ou 4,5 mg.L -1 . Avaliaram-se o percentual de explantes responsivos e o número de brotações maiores ou iguais a 1,0 cm por explante responsivo. As brotações obtidas foram transferidas para meios de enraizamento, que se constituíram do MT + 1,0 mg.L -1 de NAA, MT + 1,0 mg.L -1 de IBA e MT na ausência de auxina. A concentração de BAP que melhor favoreceu a indução da organogênese foi 1,0 mg.L -1 para as laranjas doces e 0,5-2,5 mg.L -1 para o limão 'Cravo'. O meio de enraizamento com melhor resposta foi o MT + 1,0 mg.L -1 de IBA, para todos os cultivares estudados. Procedeu-se análise anatômica da organogênese in vitro, nas condições ótimas obtidas no trabalho anterior. As gemas adventícias tiveram origem endógena, formando-se a partir de zonas meristemáticas do câmbio vascular, caracterizando-se em organogênese direta. Desenvolveram-se, também, experimentos para estudar a transformação genética, via Agrobacterium, em segmentos de epicótilo de laranja 'Natal', laranja 'Valência' e limão 'Cravo'. Neste caso, estudou-se o tempo de inoculação com Agrobacterium, o período de co-cultivo, a utilização de acetoseringona e a temperatura de incubação durante o co-cultivo e o seccionamento do explante. Plantas transgênicas foram obtidas utilizando-se um período de inoculação de 20 minutos com Agrobacterium tumefaciens (EHA-105), co-cultivo por 3 dias na ausência de acetoseringona no meio de cultura e temperatura de co-cultivo de 23-27 °C. Finalmente, desenvolveu-se um estudo da indução da organogênese, análise histológica e transformação genética, a partir de segmentos internodais de plantas adultas das laranjas 'Hamlin', 'Pera', 'Valência' e 'Natal'. A organogênese foi induzida em meio de cultura DBA3, modificado, suplementado com 1,0 mg.L -1 de BAP e 0,5 mg.L -1 de NAA. Em função dos cortes histológicos concluiu-se que as gemas adventícias formaram-se na superfície do calo, o qual originou-se de sucessivas divisões celulares do câmbio, caracterizando-se em organogênese indireta. Plantas transgênicas de tecido adulto de laranja 'Hamlin' e laranja 'Valência' foram obtidas utilizando-se um dia de co-cultivo a 24 ºC, com ou sem o seccionamento do explante para Hamlin e apenas com o seccionamento do explante para Valência. / Genetic transformation has been more frequently associated with conventional genetic breeding programs of different species. It allows for the introduction of exogenous gene(s) into the plant genome, with the possibility of altering specific characteristics. Thus, it can be an important tool for Citrus conventional breeding programs, which present several limitations imposed by the characteristics of the reproductive biology of this genus. For the success of the transformation system, however, the previous establishment of an efficient in vitro regeneration system is required. The objective of this research was to define in vitro culture conditions for the organogenesis and genetic transformation of Hamlin, Pera, Valencia and Natal sweet oranges (Citrus sinensis L. Osbeck) and Rangpur lime (Citrus limonia L. Osbeck) with the anatomical characterization of the process. Initially, the optimization of the in vitro organogenesis process and plant recovery was attempted using epicotyl segments as explants. For organogenesis induction, the explants were placed in MT culture medium supplemented with BAP (0.0; 0.5; 1.0; 1.5; 2.0; 2.5; 3.0; 3.5; 4.0 or 4.5 mg.L -1 ). The percent of responsive explants and the number of adventitious shoots per explant (> 1.0 cm) were evaluated. The shoots were transferred to rooting media, consisting of MT medium supplemented with NAA or IBA, or absence of auxin. The best BAP concentration for organogenesis induction was 1.0 mg.L -1 for the sweet oranges and between 0.5 and 2.5 mg.L -1 for Rangpur lime. The best rooting medium was MT with 1.0 mg.L -1 IBA for all the cultivars. Anatomical analysis was done to describe the optimized culture conditions. Adventitious buds originated endogenously from meristematic regions of the vascular cambium, characterizing a direct organogenesis. Studies were also done to analyze the genetic transformation of the sweet orange cultivars Natal and Valencia and Rangpur lime via Agrobacterium. Several experiments were installed to define the period of Agrobacterium inoculation and co-cultivation, the presence or absence of acetoseryngone, the temperature of incubation and the explant condition (with or without a longitudinal cut). Transgenic plants were obtained using an inoculation period of 20 minutes and co-cultivation for 3 days at 23-27 °C in absence of acetoseryngone in the culture medium. Finally, a study of organogenesis induction, histological characterization and genetic transformation from internodal segments of mature plants of sweet orange cultivars Hamlin, Pera, Valencia and Natal was conducted. Organogenesis was induced in DBA3 modified medium supplemented with 1.0 mg.L -1 BAP and 0.5 mg.L -1 NAA. Histological analysis showed that the adventitious buds formed indirectly from the callus formed by successive cell divisions from the vascular cambium. Transgenic plants from mature tissue of Hamlin and Valencia sweet oranges were obtained using one day of co-cultivation at 24°C with or without the longitudinal sectioning of the explant for Hamlin and only when the explant was longitudinally sectioned for Valencia.

Recentemente, estudos envolvendo o conhecimento das características morfogênicas e estruturais de plantas forrageiras adquiriram grande importância por auxiliarem na compreensão do que ocorre com estas nas pastagens, quando submetidas a estratégias de manejo do pastejo. Frequentemente a adubação nitrogenada é utilizada como forma de promover aumento do ritmo de crescimento das plantas que, por meio da renovação de perfilhos, pode resultar em modificações significativas da faixa etária de perfilhos que compõem o pasto, influenciando as respostas morfogênicas e estruturais da planta forrageira. O objetivo deste experimento foi avaliar a influência da idade dos perfilhos sobre as características morfogênicas e estruturais de pastos de capim-marandu mantidos a 30 cm de altura por meio de lotação contínua e submetidos a ritmos morfogênicos contrastantes gerados por meio de adubação nitrogenada. Os tratamentos corresponderam à aplicação de três doses de nitrogênio (150, 300 e 450 kg/ha de N) mais o controle (sem adubação), e foram alocados às unidades experimentais (piquetes de 1.200 m2) segundo um delineamento de blocos completos casualizados, com quatro repetições. Foram avaliadas as seguintes variáveis-resposta durante o outono/inverno de 2007 e o verão de 2008: taxa de aparecimento de folhas (TApF), filocrono (dias), taxa de alongamento de folhas (TAlF) e de colmos (TAlC), duração de vida das folhas (DVF), taxa de senescência de folhas (TSeF), comprimento final das folhas expandidas (CFF), comprimento de colmo (CC), número de folhas em expansão (NFE), número de folhas senescentes (NFS), número de folhas vivas por perfilho (NFV) e a faixa etária dos perfilhos na população de plantas. De forma geral, ritmos morfogênicos mais acelerados (pastos adubados com 300 e 450 kg/ha de N) resultaram em população de perfil mais jovial que ritmos morfogênicos mais lentos (pastos não adubados e/ou adubados com 150 kg/ha de N). Perfilhos jovens apresentaram maiores valores de TApF e de TAlF e menores valores de filocrono e de DVF que perfilhos maduros e velhos. Essas variações em respostas morfogênicas resultaram em maior CFF e NFV para perfilhos maduros, menor NFE para perfilhos velhos e menor CC e NFS para perfilhos jovens no outono/inverno. Já no verão, resultaram em menor CFF e NFV para perfilhos velhos, e menor CC para perfilhos jovens. Ritmos morfogênicos mais acelerados determinam uma população com um perfil mais jovial, caracterizada por aparecimento e alongamento de folhas mais rápido que perfilhos maduros e velhos, indicando que estratégias de manejo do pastejo e/ou práticas agronômicas que permitissem maior renovação da população de perfilhos poderiam resultar em aumentos de produção de forragem, contribuindo para aumentos de produtividade animal. / Recently, studies focusing on morphogenetic and structural characteristics have become increasingly important since they facilitate the understanding of forage plants when subjected to grazing. Quite often nitrogen fertilisation is used as a means of increasing growth rhythm of plants that, because of the turnover in tiller population, may result in significant modifications in the age profile of tillers comprising the pasture and interfere with their morphogenetic and structural responses. The objective of this experiment was to evaluate the influence of tiller age on morphogenetic and structural responses of continuously stocked marandu palisadegrass swards maintained at 30 cm and subjected to contrasting morphogenetic rhythms created by nitrogen fertilisation use. Treatments corresponded to three nitrogen application rates (150, 300 e 450 kg/ha de N) plus the control (no fertilisation) and were assigned to experimental units (1200 m2 paddocks) according to a complete randomised block design, with four replications. The following response variables were measured during autum/winter 2007 and summer 2008: leaf appearance rate (LAR), phyllochron (days), leaf (LER) and stem (SER) elongation rate, leaf life span (LLS), leaf senescence rate (LSR), final leaf length of fully expanded leaves (FLL), stem length (SL), number of expanding (NEL), senescing (NSL) and live (NLL) leaves per tiller, and tiller age categories comprising sward tiller population. In general, faster morphogenetic rhythms (swards fertilised with 300 and 450 kg/ha of N) resulted in a younger tiller population than slower morphogenetic rhythms (no fertilised swards or fertilised with 150 kg/ha of N). Young tillers had higher LAR and LER and lower phyllochron and LLS than mature and old tillers. These variations in morphogenetic responses resulted in larger FLL and NLL on mature tillers, lower NEL on old tillers and lower SL and NSL on young tillers in autumn/winter. During summer, they resulted in lower FLL and NLL on old tillers, and lower SL on young tiller. Faster morphogenetic rhythms result in a younger tiller population characterised by higher LAP and LER than mature and old tillers, indicating that management practices that allow fast turnover in tiller population could result in increased herbage accumulation, favouring increases in animal productivity.

A produtividade passível de ser obtida em sistemas de produção baseados em pastagens depende de estratégias de manejo do pastejo compatíveis com o ritmo de desenvolvimento das plantas. Para tanto, é necessário o conhecimento das respostas de plantas individuais às práticas agronômicas adotadas e seus reflexos sobre a estrutura do dossel. O objetivo deste experimento foi avaliar a morfogênese e a estrutura do dossel, assim como seus padrões de variação ao longo do ano, em pastos de capim-marandu mantidos a 30 cm de altura por meio de lotação contínua e submetidos a ritmos morfogênicos contrastantes criados por meio do uso de adubação nitrogenada. Os tratamentos corresponderam ritmos morfogênicos contrastantes criados por meio da aplicação de três doses de nitrogênio (150, 300 e 450 kg/ha de N) mais o controle (sem adubação), e foram alocados às unidades experimentais (piquetes de 1200 m2) segundo um delineamento de blocos completos casualizados, com quatro repetições. Foram avaliadas as seguintes variáveis-resposta de janeiro de 2007 a abril de 2008: densidade volumétrica total (DVT) e dos componentes morfológicos do pasto, distribuição espacial da densidade volumétrica e estrutura do dossel, taxa de aparecimento (TApF) e alongamento de folhas (TAlF), taxa de alongamento de colmos (TAlC), duração de vida das folhas (DVF), comprimento final das folhas expandidas (CFF) e dos colmos (CC), densidade populacional de perfilhos basais (DPPb) e aéreos (DPPa). A aceleração do ritmo morfogênico dos pastos resultou em aumentos de DVT, particularmente na densidade volumétrica de folhas e de colmos. Essas respostas foram mediadas pela aceleração da renovação de tecidos em perfilhos individuais, representadas por aumentos em TApF e TAlF, e pela aceleração na dinâmica de renovação de perfilhos no pasto, resultando em maiores valores de DPPa e DPPb. Essas respostas se refletiram de forma marcante sobre o fluxo de crescimento relativamente ao fluxo de senescência. Isso indica a possibilidade de aumentar a eficiência de utilização dos pastos por meio do uso racional de práticas agronômicas que acelerem o ritmo morfogênico das plantas, já que as respostas demonstraram uma natureza compensatória como forma de manter as características estruturais dos perfilhos e do dossel relativamente estáveis, sendo as diferenças função apenas das variações estacionais em condições climáticas. / Productivity of pastoral systems of animal production depends on the use of grazing management strategies that are compatible with the growth rhythm of plants. In that context, knowledge regarding the response of individual plants to management practices used and their consequences to sward structure is necessary. The objective of this experiment was to evaluate the morphogenetic responses and sward structure, as well as their patterns of change throughout the year, of continuously stocked marandu palisadegrass swards maintained at 30 cm and subjected to contrasting morphogenetic rhythms created by nitrogen fertilisation use. Treatments corresponded to three nitrogen application rates (150, 300 e 450 kg/ha de N) plus the control (no fertilisation) and were assigned to experimental units (1200 m2 paddocks) according to a complete randomised block design, with four replications. The following response variables were measured from January 2007 to April 2008: total herbage (HBD), leaf (LBD), stem (SBD) and dead material (DBD) bulk density, vertical distribution of herbage components and sward structure, leaf appearance (LAR) and elongation (LER) rates, stem elongation rate (SER), leaf life span (LLS), final leaf length of fully expanded leaves (FLL), stem length (SL), population density of basal (TPDb) and aerial (TPDa) tillers. Faster morphogenetic rhythms (swards fertilised with 300 and 450 kg/ha of N) resulted in increased HBD, particularly related to leaf and stem components. Such changes were caused by increases in tissue turnover on individual tillers characterised by higher LAR and LER, and in the turnover of tillers in tiller population, which resulted in larger TPDb and TPDa than those recorded under slower morphogenetic rhythms (no fertilised swards and/or fertilised with 150 kg/ha of N). These responses were more pronounced on sward growth relative to senescence fluxes. This indicates the possibility of increasing herbage utilisation efficiency with wise use of management practices that accelerate the morphogenetic rhythm of plants, since responses showed a compensatory behaviour as a means of maintaining tiller structural characteristics and sward structure relatively stable, with differences being mainly a function of seasonal variations in climatic conditions

É inegável que o Brasil possui condições únicas no que diz respeito à produção animal baseada em pastagens. No entanto, os avanços têm sido homeopáticos e revelam uma inércia muito grande por parte do setor produtivo e uma fragilidade conceitual na interpretação dos resultados obtidos pela pesquisa, de tal forma que o caráter dinâmico e sistêmico de ecossistemas de pastagens devem ser sempre considerados. Dentro desse contexto, o objetivo deste experimento foi estudar aspectos morfogênicos, características de perfilhos individuais e a dinâmica do perfilhamento e do acúmulo de forragem em pastos de capim-Marandu pastejados por bovinos em regime de lotação contínua e taxa de lotação variável. O experimento foi realizado em área do Departamento de Zootecnia da USP/ESALQ, em Piracicaba, SP, entre 21 de novembro de 2001 e 21 de dezembro de 2002. Os tratamentos corresponderam a quatro alturas de dossel (10, 20, 30 e 40 cm), mantidas em steady state, e foram alocados às unidades experimentais conforme um delineamento de blocos completos casualizados, com quatro repetições. Características morfogênicas e de dinâmica do acúmulo de forragem foram avaliados em 30 perfilhos marcados por unidade experimental. Os intervalos entre as avaliações foram de 3 ou 4 dias durante o verão e com um máximo de 10 dias durante o inverno e início da primavera. As características individuais das unidades de desenvolvimento vegetativo foram avaliadas em 60 perfilhos colhidos em locais dos piquetes representativos da condição do dossel no momento da amostragem. As variáveis analisadas incluíram: massa, volume, área foliar média, relação folha: has te e razão área foliar: volume por perfilho. A dinâmica do perfilhamento foi avaliada em anéis de PVC de 30 cm de diâmetro fixados ao solo por grampos de metal. Mensalmente foram avaliadas as taxas de aparecimento, sobrevivência e mortalidade de perfilhos e relações entre elas derivadas. Os maiores valores de filocrono foram observados em pastos mantidos a 40 cm e os menores naqueles mantidos a 10 cm. Além disso, houve um efeito sazonal, onde os maiores valores foram registrados durante o início da primavera e os menores no final da primavera e verão. Pastos mais baixos apresentaram maiores densidades populacionais de perfilhos pequenos e vice-versa, evidenciando o mecanismo de compensação tamanho/densidade populacional de perfilhos. No entanto, análises de estabilidade dos pastos indicaram que a densidade populacional per se não deve ser utilizada como um índice isolado de persistência ou produtividade. Os coeficientes angulares da relação Log x Log entre densidade populacional de perfilhos e massa média por perfilho revelou que praticamente não houve vantagens em se manter os pastos de capim-Marandu acima de 30 cm. Adicionalmente, o acúmulo líquido de forragem foi maximizado entre as alturas de 20-30 cm no período de verão e entre 10-20 cm nos períodos mais frios e secos do ano, indicando que o capim-Marandu possui exigências sazonais de manejo do pastejo. / Brazil is a unique environment for developing efficient and sustainable pastoral systems of animal production. Advances in this area have been modest however, resulting in slow progress and revealing deficiencies of the current conceptual basis used for interpreting results from research, particularly those related to the dynamic and systemic characteristic of plant and animal responses to management in pastoral ecosystems. Against that background, the objective of this experiment was to study the morphogenesis, characteristics of individual tillers and tillering and herbage accumulation dynamics in Marandu grass swards continuously stocked by cattle. The experiment was carried out at Departamento de Zootecnia, USP/ESALQ, Piracicaba, SP, from November 2001 to December 2002. Treatments corresponded to four steady state sward conditions (10, 20, 30 and 40 cm sward surface height) and were allocated to experimental units according to a complete randomized block design with four replications. Morphogenetic traits and herbage accumulation dynamics were evaluated on 30 marked tillers per experimental unit. Measurements were performed every 3 or 4 days during the summer and at intervals no longer than 10 days during the winter and early spring. Characteristics of individual tillers were monitored on 60 tillers harvested in areas representative of the sward condition at the time of sampling. The following variables were recorded: tiller weight, volume, leaf area, leaf: stem ratio and leaf area: volume ratio. Tillering dynamics was evaluated within 30-cm diameter PVC rings anchored to the soil. Every 30 days, rates of tiller appearance, survival and death were determined and associations between them derived. The highest and the lowest phyllochron values were recorded for the 40 and 10 cm swards, respectively. There was a seasonal effect characterized by highest values during early spring and lowest values during late spring and summer. Short swards showed higher tiller population densities of small tillers than tall swards and vice-versa, indicating the existence of a tiller size/population density compensation mechanism. Tiller population stability analysis indicated that population density alone cannot be used as an index for characterizing pasture persistence and productivity. Linear coefficients of the Log x Log regression between tiller population density and mean tiller weight revealed no advantages for keeping Marandu grass pastures taller than 30 cm. Additionally, net herbage accumulation was maximized between 20-30 cm during the summer and 10-20 cm during periods of low rainfall and mild temperatures, indicating that Marandu grass has seasonal grazing management requirements.