Thèse doctorat : Biologie Végétale et Forestière : Nancy 1 : 2006. / Titre provenant de l'écran-titre.

La bactérie phytopathogène du sol, Ralstonia solanacearum cause la maladie du flétrissement bactérien sur un grand nombre de plante hôtes. Un des déterminants clefs de son pouvoir pathogène est le système de sécrétion de type III. Celui-ci permet à la bactérie d'injecter des protéines directement dans les cellules de l'hôte. Dans ma thèse je me suis attaché à décrire et analyser finement la contribution au pouvoir pathogène de la bactérie de certains de ces substrats de l'appareil de sécrétion de type III (RipAX2, RipH2, RipH3 et RipG). Des expériences de double-hybride nous ont permis d'identifier des protéines des plantes hôtes pouvant être ciblées par ces effecteurs de type III. Dans une autre partie de mon travail j'ai contribué à l'étude de RipAX2 qui est induit spécifiquement la résistance dans des lignées d'aubergines porteur d'un locus de résistance. J'ai également travaillé sur l'identification des cellules de plantes soumises à l'injection de type III dans une interaction compatible. Pour cela j'ai utilisé la plante hôte Medicago truncatula, en exprimant dans certaines lignées cellulaires un effecteurs (RipG7) pour lequel nous avions démontré que son expression constitutive das M. truncatula pouvait restaurer l'infection de ces plantes par un mutant bactérien dans ce même effecteur. Enfin, j'ai aussi contribué à l'analyse structure-fonction fine de l'effecteur RipG7 dans sa fonction de contribution au pouvoir pathogène de R. solanacearum sur la plante hôte M. truncatula. Ce travail nous a permis d'identifier les acides aminés de RipG7 qui sont sous sélection positive, et parmi ceux-là, ceux qui contribuent directement à la fonction de RipG7 sur M. truncatula. / The soil-borne pathogen Ralstonia solanacearum causes bacterial wilt in a broad range of plants. The type III secretion system (T3SS) and its associated type III effectors (T3Es) are the main virulence determinants of R. solanacearum. In my PhD study, to understand the mode of action of several "core" effectors (RipH2, RipH3, RipG7, RipG6) from R. solanacearum in host cells. We performed yeast two-hybrid screening of plant cDNA library to identify their protein targets. Besides, we also collaborated on the identification and characterization of a specific type III effector RipAX2 which is an avirulence factor that triggers a hypersensitive response in specific Eggplant lines. To understand which plant root cells are actually subjected to type III injection during the compatible interaction, I have generated transiently transformed Medicago truncatula lines (hairy root), expressing a host specificity and core T3E RipG7 in different root cell layers. When the transformed plant expressing RipG7 under 35S promoter, the plant can be infected and colonized by the ripG7 single mutant strain. The study could be refined by using specific root cell layer promoter to identify the root cell layers that are key players in this interaction. We also worked on the characterization of the structure-function of RipG7 from R. solanacearum. Our work revealed the genetic and functional variation of RipG7. Furthermore, positive selection study and mutagenesis analysis enabled us to identify essential functional residues which likely to have been differentially selected during the host-pathogen co-evolution. The potential plant targets of RipG7 were also studies further in our study by differential yeast two-hybrid.

L'inventaire de champignons ophiostomatoïdes isolés de quatre espèces de scolytes de l'écorce {Dryocoetes affaber, Ips borealis, I. perturbatus et Polygraphus rufipennis) récoltés dans des bûches d'épinette blanche, a été réalisé au Québec. Ces champignons ont été classés à l'aide de marqueurs moléculaires (PCR-RFLP-rDNA) et d'analyses phylogénétiques sur les gènes de PADNr et de la (3-tubuline. Un total de 23 taxa de champignons ophiostomatoïdes ont été répertoriés, dont 13 ne semblant pas avoir de description dans la documentation scientifique. Par ailleurs, il semble y avoir une différentiation des communautés fongiques selon l'espèce de scolyte d'où elles proviennent. Finalement, l'initiation de la caractérisation d'une nouvelle espèce de Leptographium, a été effectuée à l'aide d'analyses phylogénétiques et moléculaires sur les gènes de l'ADNr, de la P-tubuline, de l'actine et du facteur d'élongation — la. Grâce à ces analyses, nous avons pu obtenir des indices sur la phylogénie et l'évolution de cette nouvelle espèce. / A survey of ophiostomatoid fungi isolated from four bark beetle species (Dryocoetes affaber, Ips borealis, I. perturbatus and Polygraphus rufipennis) collected in white spruce logs, was carried out in the province of Québec. These fungi were classified by means of molecular markers (PCR-RFLP-rDNA) and phylogenetic analyses on the rDNA and ptubulin genes. A total of 23 ophiostomatoid fungi were listed, among which 13 do not seem to have been described in the scientific literature. Moreover, the fungal community seemed to be differentiated according to the bark beetle species from which fungi were collected. Finally, the characterization of a new Leptographium species was initiated with the aid of phylogenetic and molecular analyses of the rDNA, P-tubulin, actin and elongation factor — la genes. By using these analyses, we were able to acquire indications on the phylogeny and evolution of this new Leptographium species.