Orientador: Maurício Lacerda Nogueira / Banca: Paula Rahal / Banca: Carlos Eugênio Cavasani / Resumo: A região Amazônica apresenta extensas áreas de floresta e ecossistemas naturais, provendo condições favoráveis para a existência de muitos arbovírus. Mais de 200 arbovírus foram isolados na região Amazônica, e aproximadamente 40 estão associados a doenças humanas. Quatro dos 40 são considerados ser de importância para a saúde pública no Brasil: vírus da Dengue (sorotipos 1 a 4), Oropouche, Mayaro e Febre Amarela. Juntamente com os arbovírus, a malária é uma doença endêmica, e aproximadamente 98% dos casos estão restritos á região da Amazônia Legal. Este trabalho teve como objetivo analisar 111 amostras clínicas de soro de pacientes que residiam em Novo Repartimento (Pará), Porto Velho (Rondônia), Plácido de Castro (Acre) e Oiapoque (Amapá) previamente confirmados para malária. Para tal finalidade, foi utilizada a técnica de Multiplex-Nested-PCR e RT-Nested-PCR para a detecção e identificação dos principais arbovírus brasileiros, pertencentes aos gêneros Flavivirus, Alphavirus e Orthobunyavirus. Duas amostras de pacientes de Novo Repartimento foram positivas para Dengue sorotipo 2, e também, ambos tinham infecção por Plasmodium vivax . Apesar de dados escassos, infecções duplas por dengue e malária deveriam ser comuns em áreas onde ambas as doenças são co-endêmicas em muitas partes do mundo. Na região Amazônica Brasileira, esta situação provavelmente ocorre mais frequentemente que a detectada. Apesar de ambas as doenças causarem sintomas similares, e infecções simultâneas com dois agentes etiológicos podem resultar em uma doença com sintomas sobrepostos, e possivelmente, tanto o espectro clínico da doença e/ou o tratamento pode ser afetado. Neste contexto uma coinfecção por malaria e dengue não poderia ser descartada, e o diagnóstico deveria ser realizado concomitantemente para dengue e malária... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Amazon region has extensive forested areas and natural ecosystems, providing suitable conditions to the existence of several aboviruses. Over 200 arboviruses were isolated in the Amazon region, and about 40 are associated to human diseases. Four out of 40 are considered to be of public health importance in Brazil: dengue virus (serotypes 1-4), Oropouche, Mayaro and Yellow Fever. Along with aboviruses, malaria is an endemic disease caused by protozoans Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax and Plasmodium malariae in Brazil, and about 98% of the cases are restricted to the Legal Amazon region. The aim of this study was to test 99 serum clinical samples from patients living in Novo Repartimento (Pará), Porto Velho (Rondônia), Plácido de Castro (Acre) and 12 plasma samples from patients living in Oiapoque (Amapá), previously confirmed for malaria. For this purpose, we used Multiplex-Nested-PCR and RT-Nested-PCR assays for detection and identification of the major Brazilian arboviruses, belonging to the genus Flavivirus, Alphavirus and Orthobunyavirus. We detected Dengue virus serotype 2 in two serum samples from patients living in Novo Repartimento, and both had active Plasmodium vivax infections. Despite scant data, dual dengue and malaria dual infections should be common in areas where both diseases are co-endemic in many places of the world. In the Amazon region, this situation is likely to occur more frequently than detected. In spite of having similar clinical findings, and simultaneous infections with two etiological agents can result in a disease with overlapped symptoms, possibly either clinical spectrum of the disease or treatment can be affected. In this context, concurrent dengue and malaria could not be ruled out, and diagnosis should be made concomitantly in febrile patients living or returning from areas where both diseases are co-endemic... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Rosangela Zacarias Machado / Coorientador: Silvia Maria Fátima Di Santi / Banca: Solange Maria Gennari / Banca: Karin Werther / Resumo: Os Estados que compõem a Amazônia Legal respondem por 99% dos casos de malária humana registrados no Brasil. O Estado do Maranhão, atualmente, é responsável por 1% dos casos dessa região. Acredita-se que, na Região Amazônica ocorra a transmissão de malária de primatas para humanos, devido a relatos atuais de resultados soroepidemiológicos de humanos e primatas. O presente estudo objetivou realizar o diagnóstico morfológico, sorológico e molecular de Plasmodium spp. em primatas neotropicais na Ilha de São Luís, Estado do Maranhão, Brasil. Para tal, foram utilizadas como técnicas de diagnóstico: a microscopia de luz, a reação em cadeia pela polimerase (PCR) e a imunofluorescência indireta (RIFI). No período de junho de 2009 a abril de 2010, foram amostrados 70 primatas, sendo 50 provenientes do Centro de Triagem Animais Silvestres (CETAS), localizado no município de São Luís, e 20 de vida livre, capturados em reserva particular localizada no município de São José de Ribamar, Estado do Maranhão. Foram avaliadas pela microscopia de luz 140 lâminas (duas de cada animal), das quais cinco (7,1%) foram positivas. Pela RIFI não se detectou anticorpos anti-Plasmodium spp. Pela PCR, dos 70 animais amostrados, foi possível observar produtos amplificados para Plasmodium spp. em 13 amostras, das quais oito (61,54%) eram de animais de vida livre e cinco (38,46%) de CETAS. Pelo pequeno tamanho dos fragmentos dos produtos amplificados, foi necessário cloná-los em vetor pGEM-T Easy para sequenciamento, no entanto, não foram obtidos resultados confirmatórios / Abstract: The states that comprise the Amazon region are incriminated for 99% of registered cases of human malaria in Brazil. Currently, the state of Maranhão is responsible for 1% of cases in Amazonic region. According to recent seroepidemiological studies, the transmission of malaria from primates to humans occurs in Amazon region. Our study aimed to detect Plasmodium spp. in neotropical primate from island of São Luis, Maranhão State, Brazil, using morphological (light microscopy), molecular (Polymerase Chain Reaction [PCR]) and serological (Indirect immunofluorescence Assay [IFA]) techniques. Between June/2009 and April/2010, we sampled 70 primates, 50 from the Wildlife Screening Center (CETA), located in the city of São Luís, and 20 captured in a private reserve located in São José de Ribamar, state of Maranhão. Based on blood smear examinations, five (7.1%) monkeys were positive to Plasmodium spp. All animals showed seronegative to Plasmodium spp. by IFA. Plasmodium spp.-amplicons were detected in 13 animals; eight out of positive monkeys (61.54%) were free-ranging animals and five (38.46%) maintained in capitivity in CETAS. Regarding the small size of amplified fragments, we cloned the amplicons into pGEM-T Easy vector aiming at obtaining a higher sequencing quality; however, we did not reached satisfactory results / Mestre