Orientador: Laura Satiko Okada Nakaghi / Resumo: A androgênese é um mecanismo de reprodução uniparental no qual a progênie possui material genético exclusivamente paterno. Essa forma de manipulação cromossômica pode ser utilizada como estratégia de reconstituição de espécies ameaçadas. O presente trabalho foi desenvolvido com o objetivo de estabelecer protocolos de indução à androgênese dispérmica na espécie Astyanax altiparanae, padronizando um pacote tecnológico de manipulação da espécie. Inicialmente, foi investigado se o tempo de estocagem dos oócitos (tempo 0 - controle, com 60 minutos pós extrusão (mpe), 120 mpe, 180 mpe e 240 mpe) afetava sua viabilidade em ser fertilizado e a sua ploidia. Os resultados apontam que uma estocagem superior a 60 minutos pós extrusão pode afetar a ploidia e causar reflexos sobre a viabilidade e sobrevivência, com 4,44% das amostras analisadas sendo triploides. Considerando essas informações, foi posteriormente estabelecido um meio de cultura para os oócitos após a extrusão (Ringer, Hanks e dPBS) e a faixa ideal de irradiação UV para inativar o material genético materno (30’, 60’, 90’ e 120’ segundos). A solução ideal para estocagem dos oócitos pós extrusão foi a de dPBS, por até 120 minutos, permitindo um largo intervalo para manipulação. Nesse tratamento, a taxa de eclosão foi de 92,08 ± 1,75%. A faixa de irradiação mais eficaz em inativar o material genético materno foi a de 90 mW/cm2, com 100% das amostras analisadas haploides. Com o estabelecimento deste protocolo, tornou-se possível... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

Orientador: George Shigueki Yasui / Resumo: A triploidização é uma ferramenta interessante para produzir peixes estéreis. No Mandi amarelo, Pimelodus maculatus isso pode ser aplicada como uma ferramenta de reconstituição de espécies ameaçadas através de transplante de células germinativastronco. No capítulo I, objetivou-se estabelecer um protocolo eficiente para a triploidização da espécie P. maculatus empregando choques de térmicos. As temperaturas testadas foram de 37°C, 38°C e 39°C, 2 minutos pós-fertilização durante 2 minutos. Os embriões intactos serviram como grupo controle diplóide. A ploidia foi confirmada por citometria de fluxo, diâmetro nuclear dos eritrócitos e citogenética. Taxas de fertilização e sobrevivência foram verificadas nos principais estágios de desenvolvimento embrionário (clivagem, blástula, gástrula, segmentação e eclosão), assim como a porcentagem de larvas normais e anormais, e eficiência da triploidização. O choque térmico reduziu significativamente a sobrevivência no estágio de gástrula (P = 0,0178), somito (P = 0,0469) e incrementou o porcentual de larvas anormais (P = 0,0261). A menor sobrevivência foi observada para o tratamento a 39°C. Todos os tratamentos apresentaram altas porcentagens de indivíduos triploides, sendo o maior valor observado para o choque a 38°C (96,7%). Com base nos resultados acima, foi obtido um eficiente protocolo de triploidização em P. maculatus utilizado choque quente (38°C, 2 mpf e duração de 2 minutos). No capitulo II, foram avaliados aspectos relacionados ao... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Triploidization is an interesting tool to produce sterile fish. In the spotted catfish Pimelodus maculatus, this may be used as a tool for reconstitution of endangered species based on stem germ cell transplantation. In Chapter I, the study aimed to establish an efficient protocol for triploidization in the spotted catfish P. maculatus using temperature shock. The temperatures tested were 37°C, 38°C e 39°C, 2 min postfertilization during 2 minutes. Intact embryos served as diploid control. Ploidy status was confirmed by flow cytometry, nuclear diameter of erythrocytes and karyotyping. Fertilization and hatching rates were verified at the main embryo stages (cleavage, blastula, gastrula, somite stage and hatching), the percentage of normal and abnormal larvae and also the efficacy of triploidization. Heat shock decrease the survival at blastula stage (P= 0,0178), somite (P = 0,0469) and increased the percentage of abnormal larvae (P = 0,0261). The lowest survival was observed at 39 °C. All treatments presented high percentages of triploid individuals, and the highest values were observed for heat shock at 38°C (96,7%). Based on results above, it was obtained an efficient protocol for triploidization in P. maculatus using heat shock (38°C, 2 min postfertilization during 2 minutes). In Chapter II, aspects related to the growth and reproductive performance of diploid (2n) and triploid (3n) of P. maculatus were evaluated. The objective was to evaluate growth according with the plo... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2017-08-11T13:55:38Z No. of bitstreams: 1 Larissa Monteiro de Vasconcelos.pdf: 1926749 bytes, checksum: 46a22f2473b8fc34a3db7c3549b55a03 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-11T13:55:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Larissa Monteiro de Vasconcelos.pdf: 1926749 bytes, checksum: 46a22f2473b8fc34a3db7c3549b55a03 (MD5) Previous issue date: 2017-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Chromosomal set manipulation is a promising tool for breeding programs and biological conservation. Triploidy induction provides benefits that increase fish production and reduces the impact of escapes from fish farming on wild populations. These benefits are due to the most probable characteristics of triploid fish: sterility; because of its assumed ability to increase yield by conducting the energy required from gonadal development to somatic growth, leading to better growth rates and fillet quality. The curimatã-pacu (Prochilodus argenteus) is an endemic migratory fish species of the São Francisco River, which abundance have been compromising by the hydroelectric dams along the river and is known for its highly appreciated meat, with a great potential for extensive aquaculture, In this study, the efficiency of thermal shocks (cold and heat) to triploid production was evaluated. Cold shocks (0-4ºC) were tested at 2.5 min, 5 min, 10 and 12 min postfertilization (mpf), lasting for 10, 15, 20 and 25 minutes. Heat shocks were alsoinvestigated at 5 mpf, lasting for three minutes at 39 and at 41ºC. In each treatment, a control group was maintained to analyze egg quality. No hatches were observed for the heat shock treatments. For cold shock treatment applied at 5mpf and lasting for 25 minutes, 100% triploids were obtained. For others cold shock treatments also applied at 5mpf, but lasting for 20, 15 and 10 minutes, triploid rates were 89.12, 76.92 and 63.33%, respectively. Although fertilization rates were statistically different between diploid and triploid, survival, weigh and size were similar between triploids and control groups after being reared for 21 days in tanks. This is the second protocol for a Brazilian native species with 100% triploidization yield and the first one to achieve this by means of thermal shocks. / A manipulação cromossômica apresenta-se como uma ferramenta promissora nos programas de criação de peixes e de conservação biológica. Dentre elas, a indução à triploidia apresenta benefícios que vão desde a otimização da produção à minimização dos impactos causados na natureza pelos escapes de peixes cultivados. Tais benefícios ocorrem, principalmente, em virtude da característica mais provável dos triploides: a esterilidade; que permite que o gasto energético antes empregado no desenvolvimento gonadal seja realocado para o crescimento somático, podendo resultar em taxas de crescimento mais elevadas e na melhoria da qualidade do filé. A curimatã-pacu (Prochilodus argenteus) é um peixe endêmico do rio São Francisco muito apreciado por sua carne, que tem sua abundância comprometida pelos barramentos das hidrelétricas dessa bacia, e que apresenta grande potencial para a aquicultura extensiva. Nesse trabalho foi avaliado a eficiência de choques térmicos quentes e frios para indução à triploidia em curimatã-pacu. Para os choques frios (0 – 4 ºC), foram testadas aplicações aos 2,5 min, 5 min, 10 e 12 min pós-fertilização (mpf), com durações de 10, 15, 20 e 25 minutos. Os testes com choques quentes (39 e 41ºC) foram aplicados também aos 5 mpf com duração de três minutos. Para cada um dos choques testados foi mantido um grupo controle para avaliação da qualidade gamética. Nenhuma eclosão foi observada para os choques quentes. Para os choques frios, embora as taxas de triploidização não tenham sido obtidas para os testes realizados aos 2,5 e 12 mpf, os choques aplicados aos 5 mpf com duração de 25 minutos produziram 100% de triploides. Para os demais choques com 20, 15 e 10 minutos de duração, as taxas de triploidização obtidas foram de 89,12, 76,92 e 63,33%, respectivamente. Os animais foram mantidos em aquários por um período de 21 dias, no qual à exceção das taxas de fertilização e sobrevivência inicial, peso e tamanho não foram significativas entre diploides e triploides. Esse é o segundo protocolo com 100% de produção de triploides para uma espécie nativa brasileira e, o primeiro a conseguir esse feito com o uso de choques térmicos.