Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-05-08T14:01:51Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Samira Obeid Georges - 2015.pdf: 3115879 bytes, checksum: d0827bc72104594da4d318d17d927b3b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-05-08T14:13:12Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Samira Obeid Georges - 2015.pdf: 3115879 bytes, checksum: d0827bc72104594da4d318d17d927b3b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-08T14:13:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Samira Obeid Georges - 2015.pdf: 3115879 bytes, checksum: d0827bc72104594da4d318d17d927b3b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-01-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Fresh sausages are well accepted and sold in Brazil. Even ready for consumption, they may contain some pathogenic microorganisms, featuring failure in sanitary control. The Escherichia coli stands out for being indicative of fecal contamination, due to its antimicrobial resistance and high genetic variability. The aim of this research was to evaluate the microbiological quality of pork and chicken sausages, homemade and industrial fresh type, according to Brazilian legislation. In addition, the objective was to test the antimicrobial susceptibility and to identify the genetic profile of E. coli isolated from these sausages. The samples were collected in July and August 2013 in 43 butchers of the city of Aparecida de Goiânia, Goiás and, for each of them, it was noted the manufacturing process, whether homemade or industrial. In addition, the temperature of exposure counters and sausages was measured. The samples were submitted to microbiological analysis according to RDC nº 12 of January 2, 2001, following the methodology proposed by the American Public Health Association. The susceptibility testing to antibiotics followed the diffusion technique in Müeller-Hinton agar and the genetic variability was observed by the technique of Pulsed Field Gel Electrophoresis. Were obtained from sausages, eight isolates of E. coli and seven of Staphylococcus aureus. The homemade sausages, as well as pork sausages were more contaminated than the industrialized and chicken. The chicken sausages presented lower average temperatures than strains pork sausages (6,0 and 6,5ºC, respectively), whereas homemade sausages showed higher average temperatures compared to industrialized (5,7 and 6,8ºC, respectively). The most strains of E. coli (71,4%) were resistant to at least one antibiotic tested. Higher resistance profile were observed to tetracycline and ampicillin, while 100,0% of the isolates were susceptible to ceftazidime, ciprofloxacin, aztreonam and imipenen. There was observed a high genetic variability among isolates by PFGE technique. The sausages were according to the Brazilian law, although the results may indicate failure in sanitary control, antibiotic-resistant strains and high genetic diversity among the isolates, indicating different sources of contamination. / A linguiça do tipo frescal é bem aceita e comercializada no Brasil. Mesmo pronta para o consumo, pode apresentar alguns micro-organismos patogênicos, caracterizando possível falha no seu controle higienicossanitário. A bactéria Escherichia coli destaca-se por ser indicativa de contaminação fecal, por apresentar resistência a antimicrobianos e alta variabilidade genética. O objetivo da presente pesquisa foi avaliar a qualidade microbiológica de linguiças suínas e de frango, artesanais e industriais, do tipo frescal, segundo a legislação brasileira vigente. Além disso, objetivou-se testar a susceptibilidade a antimicrobianos e identificar o perfil genético dos isolados de E. coli destas linguiças. As amostras foram coletadas nos meses de julho a agosto de 2013, em 43 açougues do Município de Aparecida de Goiânia, Goiás e, para cada uma delas, anotou-se o processo de fabricação, isto é, se artesanal ou industrial. Além disso, aferiu-se a temperatura das linguiças e de seus respectivos balcões de exposição à venda. As amostras foram submetidas à análise microbiológica de acordo com a RDC nº 12 de dois de janeiro de 2001, seguindo metodologia preconizada pela American Public Health Association. O teste de susceptibilidade a antimicrobianos seguiu a técnica de disco difusão em ágar Müeller–Hinton e a variabilidade genética foi observada pela técnica do Pulsed Field Gel Electrophoresis. Obtiveram-se oito isolados de E. coli e sete de Staphylococcus aureus. As linguiças artesanais, assim como as suínas estiveram mais contaminadas do que as industrializadas e de frango. Estas últimas apresentaram temperaturas médias menores do que as amostras suínas (6,0 e 6,5ºC, respectivamente), enquanto que linguiças artesanais apresentaram temperaturas médias superiores às industriais (6,8 e 5,7ºC, respectivamente). A maioria dos isolados de E. coli (71,4%) foi resistente a, no mínimo, um antibiótico testado. Apresentaram ainda maior resistência à tetraciclina e ampicilina (71,4%) e 100,0% apresentaram sensibilidade à ceftazidima, ciprofloxacina, aztreonam e imipenem. Observou-se ainda, alta variabilidade genética entre os isolados pela técnica do PFGE. As linguiças estiveram, em sua maioria, próprias ao consumo humano de acordo com a legislação brasileira, embora os resultados possam indicar falha no controle higienicossanitário, cepas resistentes a antibióticos e alta diversidade genética entre os isolados, indicando fontes diferentes de contaminação.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-10-06T14:16:54Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Lívia Milhomem Silva - 2015.pdf: 1118991 bytes, checksum: 26b69bc2d0f19179ebc3a27c577341f8 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-10-06T14:17:09Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Lívia Milhomem Silva - 2015.pdf: 1118991 bytes, checksum: 26b69bc2d0f19179ebc3a27c577341f8 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-06T14:17:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Lívia Milhomem Silva - 2015.pdf: 1118991 bytes, checksum: 26b69bc2d0f19179ebc3a27c577341f8 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-06-30 / The fresh Minas cheese is widely consumed in Brazil due to its good taste, people's behavior and its easy marketing. It’s a highly sensitive food to microbial contamination due to its characteristics and may have pathogenic microorganisms, a result of a possible failure in the hygienic and sanitary control. The Escherichia coli is a bacterium commonly found in this product and stands out for being indicative of fecal contamination and it’s related to resistance to antimicrobials and high genetic variability between strains found in food. This study evaluated the microbiological quality of fresh Minas cheeses, handmade and industrially produced according to Brazilian legislation. In addition, the aim of this study was also test the susceptibility of E. coli to different antibiotics and identifies its genetic profile. The samples were collected in supermarkets and fairs in the city of Goiânia, Goiás and subjected to microbiological analysis in accordance with the standards established by Resolution RDC nº. 12 of January 2, 2001, of the National Health Surveillance Agency, following the methodology recommended by the American Public Health Association. The antimicrobial susceptibility testing followed the disk diffusion technique in Mueller- Hinton agar and, the genetic variability, was observed by the technique of Pulsed Field Gel Electrophoresis. The analysis detected the presence of coliforms in 100.0% of samples, while fecal coliforms were observed in 10.0% and 14.3% of samples from supermarkets and fairs, respectively. 12.5% of the samples fairs confirmed the presence of Escherichia coli. Handmade cheeses were more contaminated than industrially produced chesses. Of eight isolates, one (8.0%) were sensitive to ampicillin, six (48.0%) showed intermediate susceptibility to cefepime and one (8.0%) was resistant to tetracycline, while 100.0% were sensitive to amoxicillin/clavulanic acid, aztreonam, ceftazidime, ceftriaxone, ciprofloxacin, gentamicin, imipenem, sulfamethoxazole/trimethoprim and piperacillin-azobactam. The cheeses showed high contamination than the limits established to Brazilian legislation, making it unfit for human consumption. These results indicate failures in hygienic sanitary controls in the food chain. The technique of PFGE revealed high genetic variability among isolates while the antibiogram revealed high sensitivity of isolates to antibiotics. / O queijo Minas Frescal é bastante consumido no Brasil devido seu sabor agradável, hábito da população e pela sua fácil comercialização. É um alimento altamente suscetível a contaminação microbiana devido a suas características e pode apresentar micro-organismos patogênicos, resultado de uma possível falha no seu controle higienicossanitário. A bactéria Escherichia coli é comumente encontrada nesse produto e destaca-se por ser indicativa de contaminação de origem fecal, além de apresentar resistência a antimicrobianos e alta variabilidade genética entre as cepas encontradas nos alimentos. O presente estudo avaliou a qualidade microbiológica de queijos tipo Minas Frescal, artesanais e industriais, segundo a legislação sanitária brasileira vigente. Além disso, objetivou-se também testar a susceptibilidade a diferentes antimicrobianos e identificar o perfil genético dos isolados de Escherichia coli destes produtos. As amostras foram coletadas em supermercados e feiras livres na cidade de Goiânia, Goiás e, submetidas às análises microbiológicas de acordo com os padrões estabelecidos pela Resolução RDC nº 12 de dois de janeiro de 2001 da Agência Nacional de Vigilância Sanitária, seguindo metodologia preconizada pela American Public Health Association. O teste de susceptibilidade a antimicrobianos seguiu a técnica de disco difusão em ágar Müeller–Hinton e a variabilidade genética foi observada pela técnica do Pulsed Field Gel Electrophoresis. Detectou-se a presença de coliformes totais em 100,0% das amostras analisadas; enquanto que os coliformes termotolerantes foram observados em 10,0% e 14,3% das amostras provenientes de supermercados e feiras, respectivamente. Ressalta-se que em 12,5% das amostras de feiras confirmou-se presença de Escherichia coli. Os queijos artesanais encontravam-se mais contaminados do que os industrializados. Do total de oito isolados, um (8,0%) foi sensível a ampicilina, seis (48,0%) apresentaram sensibilidade intermediária para cefepime e um (8,0%) se mostrou resistente a tetraciclina, enquanto que 100,0% foram sensíveis a amoxicilina/ácido clavulânico, aztreonama, ceftazidima, ceftriaxone, ciprofloxacina, gentamicina, imipenem, sulfametoxazol/trimetoprim e piperacillin–tazobactam. Os queijos apresentaram alta contaminação em relação a legislação vigente, tornando-se impróprios ao consumo humano. Esses resultados indicam falhas no controle higienicossanitário durante a cadeia de fabricação até o consumo. A técnica do PFGE revelou variabilidade genética considerável entre os isolados enquanto que o antibiograma revelou sensibilidade dos isolados aos antibióticos.