Background: Renal transplant patients who are highly sensitized linger on the transplant list due to HLA specific antibodies. Current desensitization protocols are unreliable. Interleukin-21 is a type I cytokine that signals through a receptor shared by the all T-cell growth factors (TCGFs). Secreted by T-cells, IL-21 acts as a regulator of B-cell anti-body production and differentiation into plasma cells as well as immunoglobulin class switching. It co-stimulates proliferation and memory response in T-cells. We hypothesized that IL-21 could be a significant contributing factor in induction of sensitization and antibody production by B-lymphocytes. We evaluated the effect of IL-21 on the anti-body production capacity of B-cells and compared the expression IL-21 Receptor (IL-21R) on the peripheral B-cells in highly sensitized and non-sensitized patients on dialysis. / Methods: In-vitro studies: B-cells isolated from peripheral blood of healthy individuals, were stimulated with mouse anti-Human CD40 monoclonal antibody (R&D), recombinant IL-21 or combination of both. Produced IgG and IgM levels were measured by classic Eliza method. Ex-vivo studies: Patients selected from the transplant waiting list and assigned into two groups: non-sensitized with (PRA<5%), sensitized (PRA>50%). After obtaining consent, peripheral blood was used for evaluation of IL-21R Expression on PBMNCs by Flowcytometry. Results: (1) In-vitro Co-stimulation of B-cells with IL-21 and anti-CD40 results in higher antibody production compared with isolated anti-CD-40 or IL-21 stimulation. (2) In-vitro stimulation of human B-cells with anti-CD40 Antibody increases expression of IL-21R. (3) The expression of IL-21R is significantly higher on the peripheral B-cells in highly sensitized patients compared to non-sensitized patients. (4) A significant correlation exists between PRA levels and the percentage of peripheral cells expressing IL21R. / Conclusion: IL-21 and IL-21R may be an important cytokine interaction in B-cells and antibody production in highly sensitized renal transplant recipients. This may offer a novel target for desensitization protocols. / Antécédent: les patients transplantés rénaux hautement sensibilisés sont sur la liste de transplantation en raison d'anticorps anti-HLA. Les protocoles actuels de désensibilisation sont non fiables. Interleukin-21 est une cytokine de type I qui signale par intermédiaire d'un récepteur commun entre les facteurs de croissance des cellules T (TCGFs). Sécrétée par les cellules T, l'IL-21 agit comme un régulateur de la production d'anticorps anti cellule B, de la différenciation des plasmocytes, ainsi de la commutation de classe d'immunoglobuline. Il co-stimule la prolifération et la réponse de la mémoire dans les cellules T. Nous avons évoqué l'hypothèse que l'IL-21 pourrait être un facteur contributif important pour l'induction de la sensibilisation et pour la production d'anticorps par les lymphocytes B. Nous avons évalué l'effet de l'IL-21 sur la capacité de production d'anticorps par les cellules B et avons comparé l'expression des récepteurs IL-21 (IL-21R) sur les cellules B périphériques chez les patients hautement sensibilisés et nonsensibilisés étant sous dialyse. / Méthodes: Les patients sélectionnés dans la liste d'attente de transplantation et sont enrôlé en deux groupes: les non sensibilisés avec (PRA <5%), sensibilisés (PRA> 50%). Après l'obtention du consentement, du sang périphérique a été utilisée pour l'évaluation de l'IL-21R expression sur PBMNCs par la Cytométrie de Flux. Résultats: (1) La co-stimulation in vitro des cellules B avec l'IL-21 et anti-CD40 résulte à la production d'anticorps plus élevée comparativement à la production liée à la stimulation isolée d'anticorps anti-CD40 ou à celle d'IL-21. (2) La stimulation in vitro des cellules B humaines par des anticorps anti-CD40 augmente l'expression de l'IL-21R. (3) L'expression de l'IL-21R est significativement plus élevée dans les cellules B périphériques chez les patients hautement sensibilisés par rapport aux patients non sensibilisés. (4) Il existe une corrélation significative entre les niveaux de PRA et le pourcentage de cellules périphériques exprimant IL21R. / Conclusion: L'IL-21 et l'IL-21R peuvent être une cytokine d'interaction importante entre les cellules B et la production d'anticorps chez les receveurs de greffe rénale hautement sensibilisés. Il se peut que ceci offre une nouvelle cible pour les protocoles de désensibilisation.

The purpose of this thesis was to evaluate microinvasive technology for the management of non-palpable mammographic findings with high risk for breast cancer. The specific objectives were, for the first part, to evaluate the Advanced Breast Biopsy Instrumentation System (ABBI) as a diagnostic and therapeutic tool for breast disease. For the second part, the objective was to evaluate lymphoscintigraphy with a malignancy specific radioactive agent (99m Technetium Sestamibi) as a non-surgical staging tool for breast cancer. / Design. The thesis consists of two observational studies. The first study was partially retrospective and partially prospective. The second study was prospective. The research was conducted between September 1997 and December 2001. / Methods. For the first study 262 women with non-palpable mammographic abnormalities were enrolled. Of these, 260 women underwent an ABBI. The ABBI procedure was performed by 3 surgeons in two hospitals in Montreal. The files of 531 women with similar findings who underwent a wire localization excisional biopsy in the same hospitals by the same surgeons were retrospectively reviewed. Data obtained included technical success, macroscopic and microscopic clarity of margins, need for supplemental surgery and residual cancer, volume of breast tissue excised, patient satisfaction, surgeon volume-performance association and health care costs. / For the second study, 110 women with confirmed operable primary breast cancer who required axillary lymph node dissection were enrolled. All the patients underwent two lymphoscintigraphies. The first (preliminary) lymphoscintigraphy took place at least 2 weeks before surgery and the second (preoperative) took place 2-24 hours before surgery. For the preliminary lymphoscintigraphy, 47 (42.7%) of the 110 women were tested with 99mTechnetium Sestamibi and 63 (57.3%) were tested with 99mTechnetium Sulphur Colloid. For the preoperative lymphoscintigraphy all patients were tested with 99mTechnetium Sulphur Colloid. All patients underwent axillary lymph nodes dissection. The data reviewed was the presence of metastasis in the axillary lymph nodes excised and the lymphoscintigraphy gamma camera imaging and gamma probe digital outcomes. The ROC curve was used to define the most probable cut-off points for the distinction between gamma counts representing positive and negative for metastasis axillary lymph nodes. / Results. For the first study, diagnostic effectiveness of the ABBI was 99.6% and the mean volume of excised breast tissue was 40cc. No serious complications were reported. For wire localization, the diagnostic effectiveness was 98.0% and the mean volume of excised breast tissue was 102cc. severity of complications was similar between the two techniques. The therapeutic effectiveness of the ABBI was 76.3%, supplementary surgery was required in 27.6% of the patients, and residual cancer was detected in 23.8%. The therapeutic effectiveness of wire localization biopsy was 47.0%, 53% of the patients underwent supplementary surgery and residual tumor was found in 48.0%. Of the 260 patients who underwent an ABBI, 51% reported a good level of satisfaction and 23% reported excellent. A significant association was shown between volume and therapeutic effectiveness for all 3 surgeons. On the average, the ABBI resulted in a cost reduction of $5,352 CAD (2000). / For the second study, the sensitivity of 99mTechnetium Sestamibi lymphoscintigraphy imaging was 50%, the negative predictive value was 83.8% and the proportion of false negative results was 17.1%. Logistic regression showed a statistically significant (p&lt;0.001) association between the gamma probe counts and axillary lymph node metastasis. Using 3,080 counts as cut-off point on the ROC curve the sensitivity and false negative rate were 100%, the specificity was 94.3%, and the positive predictive value was 83.3%. / Conclusion. The results of the first study show that the ABBI offers a safe and well tolerated microinvasive surgical technique, with superior therapeutic effectiveness, less invasiveness, and better cost effectiveness than wire localization excisional biopsy. The strong volume-performance association shows that the therapeutic effectiveness of the ABBI can improve with proper training and experience. / The results of the second study show that 99mTechnetium Sestamibi lymphoscintigraphy imaging was 50% the negative predictive value was 83.8% and the proportion of false negative results was 17.1%. A significant association was shown between the intensity of radioactivity in the hot node as measured by the gamma-probe counts and the presence of axillary lymph node metastasis. / In conclusion, this thesis demonstrates that both the ABBI and lymphoscintigraphy with 99mTechnetium Sestamibi are superior to conventional techniques used for the management of mammographic abnormalities and specifically breast cancer. Proper training of surgeons in highly qualified training centers with a high volume of cases can help further improve the effectiveness and increase the practise of these techniques in Canadian hospitals. This may in turn increase the benefits for the patients and reduce the healthcare costs for the management of breast disease and specifically breast cancer in Canada.

Intravenous lidocaine infusion for colorectal surgery has been shown to provide superior analgesia compared with systemic opioids and facilitate hospital discharge. While epidural analgesia has definite advantages over systemic opioids in term of return of bowel function and quality of postoperative pain control, there is no study comparing lidocaine infusion with epidural technique in the setting of enhanced recovery program (ERP) for laparoscopic colorectal surgery. In addition, functional recovery and quality of life have not been assessed and compared with other analgesic techniques. This project is designed to evaluate the impact of lidocaine on surgical and functional outcomes. In these randomized studies, patients scheduled for elective laparoscopic colorectal surgery were prospectively randomized to receive thoracic epidural analgesia (TEA group), intravenous lidocaine infusion (IL group) or patient-controlled analgesia with morphine (PCA group). All patients received similar surgical care in the context of ERP. The average time to return of bowel function and median duration of hospital stay were similar in IL and TEA groups. TEA provided better postoperative analgesia than intravenous lidocaine in patients undergoing rectal surgery; otherwise there was no difference for colon resection. IL, TEA and PCA facilitated the return of postoperative functional walking capacity to baseline, and this was independent of the analgesic techniques use. However physical functioning and fatigue levels were impaired at 3 weeks after surgery with no difference between the 3 groups. The present study demonstrated that the restoration of bowel function and diet intake were similar in both groups receiving either lidocaine infusion or epidural. Functional walking capacity at 3 weeks after surgery returned to baseline in all the groups and this was independent of the analgesic technique used. However, in all groups physical function decreased and fatigue increased and this was also independent of the type of analgesia used. / Lors de chirurgie colorectale, il a été démontré que la Lidocaine intra-veineuse provoque un niveau d'analgésie comparable aux opiacés mais facilite la récupération postopératoire. L'épidurale est nettement supérieure aux opiacés systémiques en terme de fonction intestinale et d'analgésie. Il n'existe hélas pas d'étude comparant la lidocaine versus l'épidurale en termes de réhabilitation fonctionnelle et qualité de vie dans le cadre d'un programme de réhabilitation accélérée après chirurgie colorectale. L'objectif du présent protocole est d'évaluer l'utilité de la lidocaine en termes de récupération fonctionnelle et chirurgicale. Cet essai randomisé inclut des patients requérant une chirurgie colorectale par laparoscopie. Les patients sont prospectivement randomisés en 3 groupes: Epidurale (Groupe TEA), lidocaine intraveineuse (Groupe IL) ou opiacés intraveineux (Groupe PCA). Les 3 groupes de patients reçoivent des soins chirurgicaux et anesthésique identiques dans le cadre d'un programme de réhabilitation accélérée. La récupération fonctionnelle intestinale et la durée d'hospitalisation est similaire entre les groupes lidocaine et épidurale. L'épidurale apporte une meilleure analgésie que la lidocaine chez les patients ayant des chirurgies rectales mais l'analgésie est similaire chez les patients subissant une colectomie. Les trois stratégies furent similaires en termes de récupération fonctionnelle. Néanmoins, a 3 semaines postopératoire l'état fonctionnel physique et la fatigue ne sont toujours pas retournés a leurs valeurs pré-opératoires dans aucun des groupes. La présente étude montre que la récupération fonctionnelle intestinale et la prise alimentaire est comparable entre les 3 groupes. A 3 semaines postopératoires, la capacité à la marche est retournée aux valeurs pré-opératoires dans les 3 groupes, indépendamment de la technique d'analgésie. Néanmoins a 3 semaines l'évaluation fonctionnelle physique restait diminuée et le niveau de fatigue accru par rapport aux évaluations pré-opératoires, indépendamment de la technique d'analgésie.

Context and objective: The Information Assessment Method (IAM) is a unique tool for continuing education and knowledge translation research. IAM allows health professionals to report search objectives, cognitive impact, use and patient health benefit associated with objects of clinical information retrieved from electronic knowledge resources. While IAM has been previously validated in the information delivery context (PUSH), this thesis examines the content validity, relevance and representativeness, of IAM items in the context of information retrieval (PULL). Methods: The study was conducted in three steps. In step 1, the relevance and representativeness of IAM items were assessed. In this step, data from a mixed methods triangulation study combining a prospective observational study with a qualitative multiple case study involving 40 family physicians were analyzed. Step 2 consisted of analysis and modification of every IAM item based on a set of guiding principles. Step 3 consisted of a multi-disciplinary expert panel discussion on all modified items and the development of a new version of IAM. Results: The content validity of 16 IAM items was supported, and these items were not changed. Nine other items were modified. Three new items were added; two were extensions based on one existing item, and one was obtained from data analysis and literature review. Conclusion: The final result of this thesis is a content validated version of IAM in the PULL context (IAM 2011). / Contexte et objectif: La Méthode d'Évaluation des Informations (MEI) est un outil unique pour les domaines de la formation continue et de l'application des connaissances. La MEI permet aux professionnels de la santé d'évaluer les objectifs des recherches d'information, les impacts cognitifs, les utilisations et les bienfaits sur la santé des patients associés à des objets d'information clinique, trouvées dans des ressources électroniques. Alors que la MEI a été validée pour évaluer plusieurs types d'informations envoyées par courriel (PUSH), ce mémoire examine la validité de contenu, la pertinence et la représentativité de chaque élément de la MEI pour évaluer les informations trouvées dans des ressources électroniques (PULL). Méthodes: L'étude a été menée en trois étapes. Durant la première, la pertinence et la représentativité des éléments de la MEI ont été évaluées. Au cours de cette étape, les données d'une recherche mixte ont été analysées. Cette étude combinait une étude quantitative prospective longitudinale et une étude qualitative de cas multiple, et elle a été menée auprès de 40 médecins de famille. La deuxième étape consistait à analyser et modifier chaque élément de la MEI, en se basant sur un ensemble de principes directeurs. Enfin, la troisième étape consistait à discuter tous les éléments modifiés avec un panel d'experts provenant de plusieurs disciplines, puis à élaborer une nouvelle version de la MEI. Résultats: La validité de contenu de 16 éléments de la MEI a été soutenue, et ces éléments n'ont pas été changés. Neuf autres éléments ont été modifiés. Trois nouveaux éléments ont été ajoutés : deux ont été construits à partir d'un élément existant, et le troisième a été suggéré à la fois par la revue de la littérature et l'analyse des données. Conclusion: Le résultat final de ce mémoire est une nouvelle version de la MEI pour évaluer les informations trouvées dans des ressources électroniques 'PULL' (MEI 2011).

Liver metastases are a frequent and often fatal occurrence in cancer patients. A better understanding of the biology of liver metastasis is essential to improve survival statistics for these patients. Although the contribution of IGF-IR to malignancy has been recognized for over 2 decades, the role that the IGF axis plays in metastasis is not yet fully understood. Using a murine Lewis lung carcinoma-based model, our laboratory has previously shown that the IGF-I receptor (IGF-IR) plays the key role in liver metastasis by regulating matrix metalloproteinase (MMP) expression and by increasing tumor cells survival and proliferation in the liver. The objectives of my project were to further analyze IGF-mediated regulation of MMP expression and investigate the crosstalk between the IGF axis and mediators of inflammation, particularly the TNF-alpha/NF-kappaB axis. My results revealed the following: A. In M-27 cells with ectopic IGF-IR overexpression (M-27IGFIR) that have acquired a liver-metastasizing potential but lost the ability to colonize the lung, PKC-alpha was found to be transcriptionally down-regulated and this resulted in decreased expression of the PKC-regulated MMPs- MMP-9, MMP-3 and MMP-13. This altered MMP expression could account for the changes in site-specificity of metastasis observed in these cells. B. In M-27IGFIR, but not in wild type M-27 cells, TNF-alpha was found to induce IL-6 production and autocrine IL-6/gp130/STAT3 signalling and thereby provide a mechanism of escape from the pro-apoptotic effects of this inflammatory cytokine. When this escape mechanism was abrogated by the use of siRNA or neutralizing antibodies, the cells re-acquired their sensitivity to apoptosis and their metastatic ability was reduced, indicating that it played a critical role in liver-metastasis in vivo. C. A mechanism of synergistic crosstalk between IGF and TNF signalling was identified in cells with high IGF-IR expression levels. In these cells, NF-kappaB activation in response to TNF-alpha was found to be accelerated in a PI3-K/Akt –dependent manner, identifying IGF-IR as an enhancer of NF-kappaB signalling and suggesting that cytokine expression, in particular IL-6 production may be regulated by the kinetics of NF-kappaB activation. Together, these results identify novel molecular mechanisms that mediate the diverse effects of IGF-IR on the tumor microenvironment and on metastasis and may be targeted for anti-cancer therapy.  / Les métastases hépatiques sont souvent mortelles dans les patients atteint du cancer. Une meilleure compréhension de la biologie des métastases hépatiques nous aiderais a amélioré le taux de survie des ces patients. Cela fait plus de vingt ans que la contribution de IGF-IR dans la progression du cancer est reconnue, mais nous ne savons pas encore exactement comment. Utilisant le modèle de carcinome pulmonaire de Lewis, nous avons déjà démontré que le IGF-IR régularise l'expression des métalloprotéinases matricielles (MMP) et ainsi joue un rôle important dans les métastases hépatiques. Les objectifs de mon projet étaient d'analyser le mécanisme de régulation des MMPs par IGF et d'examiner la diaphonie de signaux entre l'axe IGF et les médiateurs d'inflammations, en particulier TNF-α et NF-κB. Mes résultats démontrent ceci: A. Dans les cellules M27 transfectées avec le IGF-IR (M-27IGFIR) et qui ont acquis l' habileté de métastasier au foie mais on perdu leur potentiel de coloniser les poumons, l'expression transcriptionnelle de PKC-α était diminuée, résultant en une diminution de l'expression des MMPs qui sont régularisées par PKC-α: MMP-1, MMP-3 et MMP-13. La variation de profil de MMP de ces cellules pourrait expliquer le changement de site de métastases de ces cellules. B. Dans les cellules M-27IGFIR, mais pas dans les cellules sauvages M27, TNF-α peut induire la production de IL-6 et des signaux autocrines via la voie de transduction IL-6/gp-130/STAT3. De cette façon, les cellules peuvent évader les effets pro-apoptotiques de IL-6. Quand nous avons inhibé cette voie de signalisation en utilisant un siRNA et des anticorps, les cellules ont re-acquis leur habileté d'induire l'apoptose et leur habilité de métastasier a été réduit. Ces résultats démontrent que cette voie de signalisation est importante pour les métastases hépatiques des cellules M-27IGFIR. C. Dans les cellules avec une haute expression de IGF-IR, j'ai identifié un échange de signaux entre les voies de signalisation de IGF et TNF. Dans ces cellules, l'activation de NF-κB, suivant la stimulation avec TNF-α, a été accélérée d'une manière dépendante de la voie de signalisation PI3K/Akt. Ces résultats démontrent que IGF-IR augmente la signalisation de l'agent de transcription NF-κB et suggère que l'expression des cytokines, IL-6 en particulier, peut être régulée par l'activation de NF-κB. Conjointement, mes résultats identifient de nouveaux mécanismes, dont IGF-IR, jouant un rôle dans le microenvironment des tumeurs, dans la métastase et introduit des cibles pour la thérapie.

Background: Acute myocardial ischemia results in scar formation with ventricular dilatation and eventually heart failure. Placental growth factor (PlGF) is reported to stimulate angiogenesis and improve cardiac function. In this study, we hypothesized that intramyocardial injection of PlGF contained in nanoparticles can be released at the site of action for an extended time period as a sustained slow-release protective mechanism that accelerates myocardial recovery in a rat model of ischemic cardiomyopathy. Methods: The study was conducted on 35 Lewis rats. The rats were randomized into the following four groups: control group I (n=10) received empty chitosan-alginate nanoparticles; treatment group II (n=10) received PlGF, and treatment group III (n=10) received PlGF contained in chitosan–alginate nanoparticles; all of which had coronary ligation and injection of the material into the peri-infarcted area; and finally a sham operated group (n=5). Transthoracic echocardiography was performed for each rat as a baseline before the surgery, after ligation at 2 days, one week, 4 weeks, and at 8 weeks. Left ventricular fractional shortening (LVFS) and left ventricular ejection fraction (LVEF) were measured at these time intervals. ELISA was used to measure the serum level of TNF-α, IL-6 and IL-10 at 8 weeks. Hearts were stained with Masson's trichrome for scar area analysis. Results: At 8 weeks post coronary ligation, group I had LVEF of 27.6±7.5%, versus 47.1±2.6% in group II, and 56.6±3.7% in group III. Groups II and III had a statistically significant (P < 0.01) improvement in LVEF and LVFS compared to group I. The difference between groups II and III was also statistically significant (P < 0.01). The percentage of scarred left ventricle at mid-papillary cross-section was 32.7±4% in group I, versus 28.4±3% in group II, and 24.5±2.6% in Group III. The difference between group I versus group II, and group II versus III was statistically significant (P < 0.05). This effect was associated with a significant decrease in pro-inflammatory cytokines (TNF-α, IL-6) and an increase in the anti-inflammatory cytokine (IL-10) in group III as opposed to group II. Conclusion: The use of nanoparticles as a vehicle for PlGF delivery as opposed to the direct application of the growth factor post acute myocardial infarction resulted in a significant increase in LV function, a decrease in scar area formation, a decrease in pro-inflammatory cytokines (TNF-α, IL-6) and an increase in the anti-inflammatory cytokine (IL-10). Thus, nanoparticles can be used to provide a sustained slow-release protective mechanism of PlGF therapy enhancing the positive effects of the growth factor in the setting of myocardial ischemia. / Contexte: Les résultats de l'ischémie myocardique aiguë dans la formation de cicatrices avec dilatation ventriculaire et l'insuffisance cardiaque par la suite. Le facteur de croissance placentaire (PlGF) est signalé pour stimuler l'angiogenèse et améliorer la fonction cardiaque. Dans cette étude, nous avons émis l'hypothèse que l'injection intramyocardique de PlGF contenus dans des nanoparticules peuvent être libérés sur le site d'action pour une période prolongée en tant que mécanisme durable à libération lente de protection qui accélère la récupération du myocarde dans un modèle de rat de cardiomyopathie ischémique. Méthodes: L'étude a été menée sur 35 rats Lewis. Les rats ont été répartis au hasard en quatre groupes: le groupe de contrôle I (n=10) a reçu des nanoparticules de chitosan-alginate vides; le groupe de traitement II (n=10) a reçu le PlGF, et le groupe de traitement III (n=10) a reçu le PlGF contenu dans les nanoparticules de chitosan-alginate; qui avaient tous la ligature coronaire et l'injection de la matière dans la zone péri-infarctus, et enfin un groupe fictif utilisé (n=5). L'échocardiographie transthoracique a été réalisée pour chaque rat comme base de référence avant la chirurgie, après la ligature à 2 jours, une semaine, 4 semaines, et à 8 semaines. Le raccourcissement du ventricule gauche fractionné (FRVG) et la fraction d'éjection ventriculaire gauche (FEVG) ont été mesurés à ces intervalles de temps. ELISA a été utilisé pour mesurer le taux sérique de TNF-α, IL-6 et IL-10 à 8 semaines. Les cœurs ont été colorés au trichrome de Masson pour l'analyse de la surface de cicatrice. Résultats: 8 semaines après la ligature coronaire, le groupe I avait une FEVG de 27.6±7.5%, contre 47.1±2.6% dans le groupe II, et 56.6±3.7% dans le groupe III. Les groupes II et III ont montré une amélioration statistiquement significative (P < 0.01) de la FEVG et FRVG par rapport au groupe I. La différence entre les groupes II et III a également été statistiquement significative (P < 0.01). Le pourcentage du ventricule gauche marqué à la section mi-papillaire était 32.7±4% dans le groupe I, contre 28.4±3% dans le groupe II, et 24.5±2.6% dans le groupe III. La différence entre le groupe I par rapport au groupe II, et le groupe II versus III était statistiquement significative (P < 0.05). Cet effet a été associé à une diminution significative des cytokines pro-inflammatoires (TNF-α, IL-6) et une augmentation de la cytokine anti-inflammatoire (IL-10) dans le groupe III par opposition au groupe II. Conclusion: L'utilisation de nanoparticules en tant que véhicule pour la livraison du PlGF par opposition à l'application directe du facteur de croissance post-infarctus aigu du myocarde a entraîné une augmentation significative de la fonction ventriculaire gauche, une diminution de la zone de cicatrice, une diminution des cytokines pro-inflammatoires (TNF-α, IL-6) et une augmentation de la cytokine anti-inflammatoires (IL-10). Ainsi, les nanoparticules peuvent être utilisées pour fournir un mécanisme de protection soutenu à libération lente de la thérapie PlGF, renforçant les effets positifs du facteur de croissance dans le cadre de l'ischémie myocardique.

The DICER1 gene, which codes for a protein of the same name, is vital to the production of microRNA. As small ~20nt fragments of RNA, microRNAs alter gene expression post-transcriptionally by directly binding to mRNA and affecting translation. Current estimates suggest that expression of 30-70% of all protein-coding genes is modified by microRNA activity.Germline DICER1 mutations have recently been associated with cases of pleuropulmonary blastoma, a childhood lung tumor. We have discovered germline DICER1 mutations to be associated with other diseases by identifying mutations in nearly 60 individuals within 15 different families and across 7 different disease phenotypes. These include cases of pleuropulmonary blastoma, cystic nephroma - a benign kidney tumor, and Wilms tumor - the malignant version of cystic nephroma. Furthermore, we have identified DICER1 mutations in several families with Sertoli-Leydig cell tumor (SLCT) - a rare, androgen producing cancer of the ovaries, and multinodular goiter (MNG) - a relatively common thyroid hyperplasia. We have demonstrated that DICER1 is the genetic link between SLCT and MNG first hypothesized in 1974 by Fraumeni and colleagues. Also, we have identified DICER1 to be the gene of the MNG1 locus at 14q32, which was first pinpointed to this region in 1997 and identified in several MNG families. We further expanded the disease phenotype associated with DICER1 mutation to include cervical embryonal rhabdomyosarcoma.While DICER1 is a postulated to be a human tumor suppressor gene, we found no evidence of loss of heterozygosity in tumor DNA, a finding supported by recent evidence that DICER1 is a tumor suppressor with unique characteristics. Profiling of miRNA in affected cells showed significant differences in expression of miRNAs compared to controls. We demonstrate that DICER1 mutations are associated with diseases other than pleuropulmonary blastoma, an unsurprising revelation when the far-reaching implications of microRNA production are considered. These developments may be utilized in future therapeutic endeavors and for screening of families which present with a similar array of disease. / Le gène DICER1, qui code pour la protéine du même nom, est essentiel pour la production de microARNs. Ceux-ci étant aussi courts que 20 nucléotides, modifient l'expression des gènes ciblés en phase de posttranscription en se liant directement aux mARNs et en conséquences affectant leur translation. Présentement, on estime que l'expression de 30 à 70% de tous les gènes qui codent pour une protéine sont modifiés par des microARNs. Récemment, 60 à 70% de tous les cas de blastomes pleuropulmonaires, tumeurs pulmonaires infantiles, ont été associés à des mutations germinales de DICER1. Nous avons découvert que des mutations germinales de DICER1 sont impliquées dans un tableau de maladies en identifiant des mutations dans 60 personnes provenant de 15 familles différentes, ayant 7 phénotypes de maladies différents. Ceux-ci incluent des cas de blastomes pleuropulmonaires, de néphromes kystiques – des tumeurs rénales bénignes, et des tumeurs de Wilms – une forme maligne de la néphrome kystique. Par ailleurs, nous avons identifié des mutations de DICER1 dans plusieurs familles affectées par des tumeurs de cellules Sertoli-Leydig (TCSL) – un cancer rare de l'ovaire produisant de l'androgen, et la goitre multinodulaire (GMN) - une hyperplasie relativement fréquente de la thyroïde. Nous avons demontré que DICER1 est le lien entre TCSL et GMN ce qui a été suggéré en 1974 par Fraumeni et ses collegues. Nous avons également identifié que le gène MNG1 au locus 14q32 est DICER1. Cette région était découverte en 1997 dans plusieurs familles avec GMN. Nous avons élargi le phénotype des maladies associées avec DICER1, et ajouté le rhabdomyosarcome embryonnaire cervical à la liste. Quoique DICER1 est un gène suppresseur de tumeur, nous n'avons pas trouvé une preuve de la perte d'hétérozygotie dans l'ADN des tumeurs testées. Ceci est validé par des preuves récentes que DICER1 est un gène suppresseur de tumeur à caractère unique. L'expression des microARNs dans les cellules cancéreuses était significativement différente de celui observée dans les cellules normales. Nous avons démontré que les mutations de DICER1 sont associées à des maladies variées, une découverte pas très surprenante considérant son rôle de grande envergure dans la production de microARNs. Ces développements peuvent être utilisés dans de futurs efforts thérapeutiques et pour le dépistage des familles avec des maladies semblables.

Medulloblastoma (MB) represents approximately 1% of adult brain tumours, and as such is a poorly studied disease. It exhibits different clinical manifestations and outcome in adults, yet it is still treated as per pediatric protocols. Recently, gene expression profiling studies suggested the existence of at least 4 molecular subtypes in pediatric MB, characterized by distinct genetic profiles, activation of oncogenic pathways and varied clinical outcomes. This has refined our ability to classify MB, select tumors for targeted therapy and is leading the way to individualized medicine. It is unknown whether adult MB has its unique molecular signature and whether biologic differences underlie the clinical discrepancies observed in the adult population. We hypothesized that MB displays age-related biological differences and to further characterize these differences; we studied the gene expression profiles of a cohort of adult MB and compared them to a pediatric MB dataset. We found a preponderance of SHH pathway activation amongst adult MB tumours (26/31, 84%). This is in support with evolving data that have identified SHH signature in 75% of adult MB. In view of reports on the good clinical response observed with the use of selective SHH inhibitors in SHH driven MB, our results suggest that the adjuvant use of these agents may improve outcomes in adult MB and should be investigated within a prospective trial. Sonic hedgehog active adult MB represent a homogenous tumor population, which exhibits differences in molecular profiles compared to pediatric SHH driven MB. The later potentially explains the variable outcome between adults and infants with SHH MB, and outlines potential targets of MB tumorigenesis in adults. This thesis offers new insights into age based molecular differences in MB and highlights adult patients as potential targets for selective therapy targeting the SHH pathway. / Le médulloblastome (MB) représente environ 1% des tumeurs du cerveau adulte, et en tant que telle est une maladie peu étudiée. Il présente différentes manifestations cliniques et differents résultats chez les adultes, mais il est encore traité selon les protocoles pédiatriques. Récemment, des études d'expression de profil génétique suggére l'existence d'au moins 4 sous-types moléculaires pour le MB pédiatriques, caractérisées par des profils génétiques distincts, par l'activation des voies de signallisation oncogéniques et par des résultats cliniques variées. Cela a amélioré notre capacité de classifier le MB, a mieux sélectionné les tumeurs pour le traitement ciblé et ouvre la voie à une médecine individualisée. On ignore si le MB adulte possede une signature moléculaire unique et si ce sont des différences biologiques qui expliquent les différences cliniques observées dans la population adulte. Nous proposons que le MB possede des différences biologiques qui varie en fonction de l'âge et afin de mieux caractériser ces différences, nous avons étudié les profils d'expression génetique d'une cohorte de MB adultes et les ont comparés à une base de données de MB pédiatrique. Nous avons trouvé une prépondérance d'activation de la voie SHH parmi les tumeurs de MB adulte (26/31, 84%). Ceci supporte les données qui ont identifié la signature SHH dans 75% des MB adultes. Compte tenu des rapports sur la bonne réponse clinique observée avec l'utilisation d'inhibiteurs sélectifs de Shh dans le MB à SHH, nos résultats suggèrent que l'utilisation adjuvante de ces agents peut améliorer les résultats pour le MB adulte et devrait être étudiée dans une étude prospective. Le MB adulte avec Sonic hedgehog actif représente une population homogène de tumeur, et présente des différences dans les profils moléculaires par rapport au MB pédiatriques à SHH. Cela pourrait expliquer les résultat variable entre adultes et enfants avec le MB à SHH, et décrit des cibles potentielles de la tumorogenèse du MB chez les adultes. Cette thèse propose de nouveaux aperçus sur l'effet de l'âge sur les différences moléculaires pour le MB et met en évidence que les patients adultes representent des cibles potentielles pour la thérapie de ciblage sélectif de la voie SHH.

The reversible process of protein phosphosphorylation by kinases and phosphatases regulates essentially every aspect of cellular processes. PRLs (Phospshatase of Regenerating Liver) are dual specificity phosphatases, belonging to the protein tyrosine phosphatase family. PRL family members (PRL-1, PRL-2 and PRL-3) possess several oncogenic properties and play an important role in tumoriogenesis and metastasis. In previous studies using multiple cellular and in vivo models, we confirmed the role of PRL-2 in cell migration and in the transformation process of breast cancer. Thus, we seek to identify the cellular pathway, mechanism of actions, and the physiological function of PRL-2. One of the most common approaches to elucidating the function of a protein is by identifying its substrates and/or interacting partners. In this study, we have identified several interesting PRL-2 interacting proteins using Affinity-Purification Mass Spectrometry (AP-MS) and we characterized the interaction with one of these candidates: cyclin M3 (CNNM3). We also generated a PRL-2 KO mouse models: these PRL2-KO mouse showed significant weight loss, suggesting PRL-2 might play an essential physiological role. We believe that the identification of PRL-2 interacting partners will shed light on the physiological functions of this PTP, and may lead to the development of new targets for breast cancer therapy. / L'état de phosphorylation des protéines dans la cellule est essentiellement régulé par les kinases et les phosphatases de façon réversible. Les PRLs (Phosphatases of Regenerating Liver) sont des phosphatases à double spécificité appartenant à la famille des protéines tyrosine phosphatase. La surexpression des membres de la famille PRL (PRL-1, PRL-2 et PRL-3) est observée dans une grande variété de cancers. Ceux-ci possèdent de nombreuses propriétés oncogéniques et jouent un rôle important au niveau de la génération des tumeurs ainsi que leur dissémination métastasique. PRL-2 est la moins caractérisée de la famille PRLs. Nos études effectuées à partir de différentes lignées cellulaires ainsi que modèles in vivo ont démontrées le rôle de PRL-2 dans la migration cellulaire et le développement de tumeurs du sein. Mes recherches portent sur l'identification des voies de signalisation cellulaire modulées par PRL2 ainsi que son mécanisme d'action et son rôle physiologique. L'approche la plus commune pour comprendre la fonction d'une protéine est d'identifier ses substrats ou partenaire d'interaction. Dans cette étude, nous avons identifié plusieurs protéines interagissant avec PRL-2 in vivo par spectrométrie de masse (MS) et nous avons caractérisé son interaction avec l'un des candidats de MS : CNNM3. Nous avons aussi généré un modèle de souris knock-out (KO) de PRL-2. La souris KO manifeste une perte importante de poids suggérant un rôle physiologique important de PRL-2. Nous sommes persuadés que l'identification des substrats physiologiques de PRL2 permettra de mieux comprendre cette PTP et ainsi assurer le développement de nouvelles cibles afin de fournir un meilleur traitement contre le cancer du sein.

I-To compare aneurysm diameter measurements, and the detection of endoleaks in patients post endoluminal aortic aneurysm repair by colour duplex ultrasonography as compared to contrast enhanced CT scan as the gold standard. 2-To evaluate whether contrast enhanced ultrasound (levovist) improves the accuracy of colour duplex ultrasound for the detection of endoleaks as compared to CT.