Submitted by Emanoel Martins Filho (emanoelfilho@ufba.br) on 2016-12-10T15:45:48Z No. of bitstreams: 1 SouzaBC_M.pdf: 450360 bytes, checksum: 549cf6025adf79af6efcde73c5be4ca8 (MD5) / Approved for entry into archive by Patricia Barroso (pbarroso@ufba.br) on 2017-02-03T18:40:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 SouzaBC_M.pdf: 450360 bytes, checksum: 549cf6025adf79af6efcde73c5be4ca8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-03T18:40:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SouzaBC_M.pdf: 450360 bytes, checksum: 549cf6025adf79af6efcde73c5be4ca8 (MD5) / Programa de Demanda Social (CAPES) / A ovinocultura é uma atividade pecuária em crescente expansão no Brasil, sendo a região Nordeste a de maior potencial para o aumento de produção. Contudo, a sanidade dos rebanhos ainda é deficiente, havendo uma eminente necessidade de aumentar o monitoramento do rebanho, seja através de medidas profiláticas ou pelo diagnóstico precoce de enfermidades. As mensurações séricas de metabólitos são métodos tradicionais e seguros, que auxiliam os clínicos na monitoração dos rebanhos, utilizando-se como base os intervalos de referência. O presente estudo tem como objetivo padronizar técnicas de mensuração dos metabólitos séricos glicose, ureia, cloretos, magnésio, fósforo e cálcio em microplacas, para desenvolvimento de ensaios mais baratos e práticos, auxiliando na determinação de intervalos de referência regionais. Foram utilizados soros de 40 ovinos das raças Dorper e Santa Inês clinicamente sadios. As mensurações foram feitas utilizando kits comerciais, através de ensaios convencionais e usando técnicas propostas como referências. Os ensaios em microplaca foram escolhidos de acordo com suas respectivas correlações de Pearson, sendo posteriormente testadas para definição de repetitividade, reprodutibilidade e linearidade. Todos os ensaios desenvolvidos e padronizados apresentaram performance confiável, representando uma possibilidade de emprego em experimentos para determinação de valores de referência, bem como para animais com difícil obtenção de amostras sanguíneas. / Sheep breeding is an expanding livestock industry in Brazil, and the Northeast region has the highest potential for this kind of economic activity. However, herd’s health maintenance is still deficient, and there is a perceived need to increase health monitoring, through prophylactic or disease early diagnosis measures. Serum measurements of metabolites are traditional and safe methods which assist clinicians in monitoring of flocks through the use of reference ranges. The present study aimed to standardize the measurement of the serum metabolites glucose, urea, chloride, magnesium, phosphorus and calcium in microplates, to develop cheaper and practical testing techniques. Sera from 40 Dorper and Santa Inês clinically healthy sheep were used, and measurements were made using commercial kits. Microplates assays were chosen according to their respective Pearson correlations and subsequently tested for repeatability, reproducibility and linearity. All developed and standardized tests showed reliable performance, represented a chance for employment in experiments to determine reference values, as well as for animals in which it is difficult to obtain blood samples.

Quality control of food and medicines is largely done using methods recommended in official compendia, including titration and gravimetry, which involve several negative aspects and are at odds with the principles of green analytical chemistry. Enthalpy methods are based on the enthalpy determination of chemical reactions. In the entalpimétrica analysis the quantitative determination of a reagent or catalyst is made through the enthalpy variation of a chemical reaction, that can be measured directly or indirectly. The main approaches for the entalpimetric analysis are thermometric titration, direct injection enthalpymetry (DIE) and flow entalpimetry. However, despite the availability of commercial instruments for this purpose today, these techniques have been replaced and almost disappeared from the literature, probably due to the high cost of microcalorimetry devices and the limitation of the low frequency of analysis, leading to the choice of Other analytical methods. Currently, there is a need for the development of analytical methods that provide quick results, low cost, low reagent consumption and waste disposal, and minimal sample preparation and manipulation. In this study, infrared thermography was, for the first time, combined with enthalpymetry for the determination of different analytes (eg, iron, calcium, sodium, chlorides and acidity) in foods. In this way, the so-called Thermal Infrared Enthalpyimetry (TIE) was established using neutralization, complexation, precipitation and oxidation reactions, in which the temperature variation generated in the reactions for the construction of calibration curves was verified. The TIE was performed on microplates using a multichannel pipette for the addition of the reagents and an infrared camera for monitoring the temperature generated inside the wells after the addition of the reagents. The results of the proposed method were compared with those obtained through conventional (volumetric) techniques recommended in official compendia. In this way, TIE was optimized and validated for the determination of total, fixed and volatile acidity of vinegars, and was also applied in the simultaneous determination of sodium chloride and total acidity of pickle brine. The obtained results showed good agreement with conventional techniques, performing the analyzes in a fast, efficient and with potential to be applied as routine analysis, due to the simplicity, speed and high frequency of analysis. Thus, it has been demonstrated that TIE can be considered an important tool for the determination of several analytes in foods. Also in this work, it was also done the evaluation of the TIE using different cameras (with refrigerated detector or not), in order to verify and compare the performance of infrared cameras for application to TIE. It was verified that a refrigerated camera presents better results, however equipment without refrigerated detector, of lower resolution and of low cost presented excellent and promising results. / O controle de qualidade de alimentos e de medicamentos é feito em grande parte utilizando métodos recomendados nos compêndios oficiais, entre eles a titulação e a gravimetria, os quais envolvem vários aspectos negativos e em desacordo com os princípios da química analítica verde. Métodos entalpimétricos se baseiam na determinação da entalpia das reações químicas. Na análise entalpimétrica é efetuada a determinação quantitativa de um reagente ou catalisador através da variação de entalpia de uma reação química, que pode ser medida direta ou indiretamente. As principais abordagens para a análise entalpimétrica são a titulação termométrica, entalpimetria por injeção direta (DIE, do inglês Direct Inject Entalpimetry) e entalpimetria em fluxo. No entanto, apesar de hoje em dia haver a disponibilidade de instrumentos comerciais para este fim, essas técnicas foram substituídas e quase desapareceram da literatura, provavelmente devido ao custo elevado de dispositivos de microcalorimetria e pela limitação da baixa frequência de análise, levando à escolha de outros métodos analíticos. Atualmente, existe a necessidade do desenvolvimento de métodos analíticos que forneçam resultados rápidos, com baixo custo, pequeno consumo de reagentes e descarte de resíduos, além de mínimo preparo e manipulação da amostra. Neste estudo, a termografia no infravermelho foi, pela primeira vez, combinada com a entalpimetria visando determinação de diferentes analitos (p. ex., ferro, cálcio, sódio, cloretos e acidez) em alimentos. Desta forma, a chamada entalpimetria no infravermelho (TIE, do inglês Thermal Infrared Enthalpimetry) foi estabelecida empregando reações de neutralização, complexação, precipitação e oxirredução, onde foi verificada a variação da temperatura gerada nas reações para a construção de curvas de calibração. A TIE foi realizada em microplacas, empregando pipeta multicanal para a adição dos reagentes e uma câmera no infravermelho para monitoramento de temperatura gerada no interior dos poços após a adição dos reagentes. Os resultados do método proposto foram comparados com aqueles obtidos através de técnicas convencionais (volumétricas) recomendadas nos compêndios oficiais. Desta forma, a TIE foi otimizada e validada para a determinação da acidez total, fixa e volátil de vinagres, e também foi aplicada na determinação simultânea de cloreto de sódio e acidez total da salmoura de picles. Os resultados obtidos mostraram boa concordância com técnicas convencionais, efetuando as análises de maneira rápida, eficaz e com potencial para ser aplicada como análise de rotina, devido à simplicidade, rapidez e elevada frequência de análise. Desta forma, foi demonstrado que a TIE pode ser considerada uma importante ferramenta para a determinação de diversos analitos em alimentos. Ainda neste trabalho, foi feita também a avaliação da TIE usando diferentes câmeras (com detector refrigerado ou não), a fim de verificar e comparar o desempenho de câmeras no infravermelho para aplicação a TIE. Verificou-se que uma câmera refrigerada apresenta melhores resultados, entretanto equipamentos sem detector refrigerado, de menor resolução e de baixo custo apresentaram resultados excelentes e promissores.