Baigiamojo darbo tikslas – ištirti Paramyxoviridae šeimos virusų nukleokapsidės baltymų sintezės mielėse Saccharomyces cerevisiae galimybes ir nustatyti ar mielėse susintetintus nukleokapsidės baltymus galima taikyti Paramyxoviridae šeimos virusų infekcijų serologinei diagnostikai. Tikslas pasiektas ištyrus Paramyxoviridae šeimos Sendai, žmogaus parainfluenza, žmogaus respiracinio sincitinio, Nipah, Hendra ir Menangle virusų nukleokapsidės baltymų sintezę mielių Saccharomyces cerevisiae kamiene 214∆pep4. Nustatyta, kad mielėse susintetinti nukleokapsidės baltymai pasižymi natyviems analogiškų virusų nukleokapsidės baltymams būdingomis savybėmis: yra tirpūs, formuoja virusų nukleokpsidę primenančias daleles, kurios nespecifiškai įjungia ribonukleorūgštis, pasižymi antigeninėmis savybėmis, būdingomis natyviems analogiškų virusų nukleokapsidės baltymams. Taip pat mielėse susintetinti nukleokapsidės baltymai išgryninti juos centrifuguojant per tankų sacharozės tirpalo sluoksnį ir CsCl tankio gradiente. Įsitikinta, kad mielėse Saccharomyces cerevisiae susintetinti Paramyxoviridae šeimos virusų nukleokapsidės baltymai reaguoja su atitinkamais šios šeimos virusais užsikrėtusių žmonių ir gyvūnų kraujo serumo antikūnais, todėl tinka šių virusų infekcijų serologinės diagnostikos sistemų kūrimui. Naudojant mielėse susintetintus nukleokapsidės baltymus buvo gauti specifiniai monokloniniai antikūnai reaguojantys su natyviais virusų nukleokapsidės baltymais. Įvertinos gautų monokloninių... [toliau žr. visą tekstą] / The aims of this study was to investigate synthesis of SeV, hPIV1, hPIV3, hRSV, NiV, HeV and MenV nucleocapside (N) proteins in yeast Saccharomyces cerevisiae, to determine properties of recombinant N proteins and evaluate the feasibility to use them in diagnostics. In this study it was demonstrated, that yeast S.cerevisiae is an excellent host for a high-level production of proteins SeV, hPIV1, hPIV3, hRSV, NiV, HeV and MenV N proteins as virus nukleokapsid-like particles (vNLP). The yeast-expressed hPIV1, hPIV3, hRSV, NiV, HeV and MenV vNLPs represent useful tools for the development of new virus detection systems and demonstrate the effectiveness of yeast as a host for generation of recombinant proteins organized in complex structures like human virus NLPs.

The aims of this study was to investigate synthesis of SeV, hPIV1, hPIV3, hRSV, NiV, HeV and MenV nucleocapside (N) proteins in yeast Saccharomyces cerevisiae, to determine properties of recombinant N proteins and evaluate the feasibility to use them in diagnostics. In this study it was demonstrated, that yeast S.cerevisiae is an excellent host for a high-level production of proteins SeV, hPIV1, hPIV3, hRSV, NiV, HeV and MenV N proteins as virus nukleokapsid-like particles (vNLP). The yeast-expressed hPIV1, hPIV3, hRSV, NiV, HeV and MenV vNLPs represent useful tools for the development of new virus detection systems and demonstrate the effectiveness of yeast as a host for generation of recombinant proteins organized in complex structures like human virus NLPs. / Baigiamojo darbo tikslas – ištirti Paramyxoviridae šeimos virusų nukleokapsidės baltymų sintezės mielėse Saccharomyces cerevisiae galimybes ir nustatyti ar mielėse susintetintus nukleokapsidės baltymus galima taikyti Paramyxoviridae šeimos virusų infekcijų serologinei diagnostikai. Tikslas pasiektas ištyrus Paramyxoviridae šeimos Sendai, žmogaus parainfluenza, žmogaus respiracinio sincitinio, Nipah, Hendra ir Menangle virusų nukleokapsidės baltymų sintezę mielių Saccharomyces cerevisiae kamiene 214∆pep4. Nustatyta, kad mielėse susintetinti nukleokapsidės baltymai pasižymi natyviems analogiškų virusų nukleokapsidės baltymams būdingomis savybėmis: yra tirpūs, formuoja virusų nukleokpsidę primenančias daleles, kurios nespecifiškai įjungia ribonukleorūgštis, pasižymi antigeninėmis savybėmis, būdingomis natyviems analogiškų virusų nukleokapsidės baltymams. Taip pat mielėse susintetinti nukleokapsidės baltymai išgryninti juos centrifuguojant per tankų sacharozės tirpalo sluoksnį ir CsCl tankio gradiente. Įsitikinta, kad mielėse Saccharomyces cerevisiae susintetinti Paramyxoviridae šeimos virusų nukleokapsidės baltymai reaguoja su atitinkamais šios šeimos virusais užsikrėtusių žmonių ir gyvūnų kraujo serumo antikūnais, todėl tinka šių virusų infekcijų serologinės diagnostikos sistemų kūrimui. Naudojant mielėse susintetintus nukleokapsidės baltymus buvo gauti specifiniai monokloniniai antikūnai reaguojantys su natyviais virusų nukleokapsidės baltymais. Įvertinos gautų monokloninių... [toliau žr. visą tekstą]