Thèse (M.Sc.)--Université Laval, 2007. / Bibliogr.: f. 60-63. Publié aussi en version électronique dans la Collection Mémoires et thèses électroniques.

La thérapie photodynamique (PDT) associe la lumière à un agent photosensibilisateur, qui dans l’idéal se localise spécifiquement dans les tissus cancéreux. Illuminé dans le visible, ce photosensibilisateur génère de l’oxygène moléculaire singulet (1O2) et des espèces radicalaires toxiques pour les cellules. Sa fluorescence peut également servir à diagnostiquer les lésions néoplasiques : il s’agit du photodiagnostic (PDD). Les extraits de Millepertuis, connus pour leur activité antidépressive, contiennent également des composés photoactifs, dont l’hypéricine, objet de nombreux travaux dans le cadre de la PDT et du PDD. Cependant, son coût de production est élevé et son utilisation limitée par un manque de solubilité en milieu physiologique. Dans ce contexte, la présente étude vise à évaluer le potentiel des extraits de Millepertuis pour la PDT et le PDD. Le matériel végétal utilisé a dans un premier temps fait l’objet d’analyses par Spectrométrie de Masse (SM) in situ afin de caractériser les molécules photoactives au niveau même des structures végétales impliquées dans leur production. Ces composés ont ensuite été extraits par un solvant organique, et ce mélange a fait l’objet d’études photochimiques visant à quantifier sa production d’1O2 sous illumination laser. La composition des extraits a ensuite été étudiée par désorption/Ionisation Laser couplée à la SM (TOF et FTICR), et par Ionisation Electropray couplée à la FTICRMS. Puis, ils ont fait l’objet d’études en milieu cellulaire (cancer de la vessie), visant à déterminer leur cytotoxicité à l’obscurité, les cinétiques d’internalisation des composés photoactifs, leur phototoxicité et la nature des composés internalisés / Photodynamic therapy (PDT) combines light with a drug called photosensitizing agent, which preferentially accumulates in cancerous cells. Irradiated with visible light, this photosensitizing agent generates singlet oxygen (1O2) and radicals that demonstrate cell toxicity. Fluorescence of this drug also allows diagnosing neoplasic lesions: this is photodynamic diagnosis (PDD).St John’s Wort extracts, mainly known for their antidepressant activity, also contain photoactive compounds, including hypericin which has been extensively studied for PDT and PDD. However, producing this molecule in large amounts is expensive and its use is restricted by a poor solubility in physiological medium. In this context, the present study deals with determining in what extent St John’s Wort extracts could be useful for PDT and PDD. Flowers that were used in this work were firstly in situ-analyzed by mass spectrometry in order to characterized photoactive compounds at the level of structures involved in their biosynthesis. These compounds were then extracted by organic solvent and the resulting mixture subjected to singlet oxygen production measurements under laser illumination. Qualitative analysis of the extracts was then performed either by Laser Desorption/Ionization or Electrospray Ionization coupled with Mass Spectrometry (TOF and FTICR). Finally, their behavior in cellular medium (bladder cancer) was investigated in terms of dark cytotoxicity, intracellular accumulation of photoactive compounds, phototoxicity and characterization of compounds absorbed by cells

Le présent projet de recherche est une étude pilote qui vise principalement à vérifier la faisabilité d'un essai clinique de grande envergure dont l'objectif principal sera de comparer l'effet d'un extrait standardisé de millepertuis (Hypericum perforatum) au placebo sur les changements dans les symptômes de ménopause et la qualité de vie des femmes ménopausées et symptomatiques âgées de 40 à 65 ans. Cette étude pilote était un essai clinique randomisé à double insu, contrôlé par un placebo. Les objectifs spécifiques de cette étude de faisabilité étaient d'évaluer les modalités de recrutement, de vérifier l'observance et l'adhésion à ces traitements et d'estimer les changements observés dans le nombre et l'intensité des bouffées de chaleur après 3 mois (issue principale). Cent six femmes ont été recrutées majoritairement par le biais d'annonces dans les journaux locaux. Cinquante-neuf femmes étaient non admissibles, 22 prenaient des antidépresseurs parmi lesquelles 20 femmes avaient un cancer du sein. Quarante sept patientes ont été aléatoirement assignées au groupe millepertuis (n=22) ou au groupe placebo (n=25). Les participantes du groupe « millepertuis » devaient prendre un comprimé de 300 mg d'un extrait éthanolique de millepertuis 3 fois par jour. Les patientes ont été invitées à évaluer le nombre et l'intensité de leurs bouffées de chaleur dans la semaine précédant le jour de la randomisation et la semaine précédant la visite du mois 3. À chacune de ces visites, les participantes devaient compléter un questionnaire portant sur les différents aspects de la qualité de vie (MENQOL, SF-12, sommeil et fatigue générale). Lors de la randomisation, un journal quotidien était remis à chaque participante sur lequel il lui était demandé de noter le nombre de comprimés pris par jour et toute réaction défavorable et ce, durant toute la durée de l'étude. Les patientes devaient également s'abstenir d'utiliser l'hormonothérapie de remplacement (HTR) ou toute autre médication pouvant éventuellement soulager les symptômes de ménopause. Au cours de l'étude, 2 femmes dans le groupe millepertuis et 3 dans le groupe placebo ont été perdues de vue. Les analyses ont été effectuées selon le principe de l'intention de traiter. Les annonces dans les quotidiens locaux, ou via le site Internet de l'Université Laval ont été les stratégies de recrutement les plus efficaces, alors que le recrutement via les médecins traitants s'est avéré peu efficace. L'inclusion des participantes dans cette étude a été particulièrement difficile, notamment en raison de la fréquence élevée de femmes prenant des antidépresseurs. La prise de millepertuis a été associée à une réduction statistiquement non significative du nombre et de l'intensité des bouffées de chaleur et à une amélioration significative du score de qualité de vie spécifique à la ménopause et des troubles de sommeil.