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Mapeamento de motivos antigênicos e caracterização de novas proteínas de Leishmania infantum com potencial para uso no diagnóstico contra a Leishmaniose Visceral

Nascimento, Marília Barbosa do 31 January 2014 (has links)
Submitted by Amanda Silva (amanda.osilva2@ufpe.br) on 2015-03-13T15:42:13Z No. of bitstreams: 2 TESE Marília Barbosa do Nascimento.pdf: 2456653 bytes, checksum: 8b413c00bb26bd7b56a27464b3e5348a (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-13T15:42:13Z (GMT). No. of bitstreams: 2 TESE Marília Barbosa do Nascimento.pdf: 2456653 bytes, checksum: 8b413c00bb26bd7b56a27464b3e5348a (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014 / A Leishmaniose Visceral (LV) é a forma mais grave da doença causada por patógenos do gênero Leishmania, problema agravado pela falta de métodos eficientes de diagnóstico. Este trabalho buscou contribuir para a caracterização funcional de cinco proteínas hipotéticas de L. infantum, identificadas previamente como potenciais ferramentas para o diagnóstico da LV. As proteínas selecionadas (Lci5, Lci9, Lci11, Lci10 e Lci12), são em sua maioria ricas em motivos repetitivos e foram analisadas por bioinformática e em ensaios de “western-blot”, fracionamento celular, imunofluorescência e imunocitoquímica associada à microscopia eletrônica. Todas as proteínas são expressas constitutivamente em ambas as formas de L. infantum, uma delas (Lci10) é exclusiva das espécies de Leishmania e as demais são pouco ou moderadamente conservadas em Trypanosoma. Três destas apresentaram um padrão pontual de localização intracitoplasmático (Lci10 e Lci12) ou flagelar (Lci5), enquanto as Lci9 e Lci11 se dispersam por todo o citoplasma. Através de ensaios de ELISA indireto, utilizando soros de cães e humanos com LV, todas, com exceção da Lci5, foram mais antigênicas em cães do que em humanos. Quando se buscou investigar a importância dos motivos repetitivos para a antigenicidade das Lci10 e Lci12, não se observou uma correlação entre a sua presença e maior ou menor antigenicidade. Os resultados sugerem que estas proteínas devem ser utilizadas diferentemente para cães e humanos no diagnóstico da LV.

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