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Expressão de genes relacionados ao crescimento muscular durante a restrição alimentar e relacionamento em juvenis de tilápia do Nilo, Oreochromis niloticus /

Nebo, Caroline. January 2011 (has links)
Orientador: Maeli Dal Pai Silva / Coorientador: Maria Célia Portella / Banca: Fernanda Antunes Alves Costa / Banca: Leonardo Susumu Takahashi / Resumo: O crescimento muscular em peixes é controlado por vias moleculares que podem ser afetadas pela restrição alimentar e realimentação. Neste estudo, foi analisado se curtos períodos de jejum seguidos de realimentação podem influenciar o desempenho, a morfologia e a expressão de genes relacionados com o crescimento muscular, em juvenis de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus), linhagem chitralada. Juvenis com peso médio de 0,6 ± 0,19 g foram estocados em caixas de polietileno com sistema de fluxo contínuo de água e aeração constante. Os peixes foram divididos aleatoriamente em cinco grupos experimentais com três repetições: (AL), controle com alimentação contínua do início ao final do experimento; (J5), jejum por cinco dias e realimentação por 37 dias; (J10), jejum por dez dias e realimentação por 32 dias e (J20), jejum por 20 dias e realimentação por 22 dias; (JJ), jejum durante todo o período experimental. As análises foram realizadas no início do experimento (dia 0), aos 5, 10, 20, e 42 dias. Nestes períodos, foram realizadas biometrias, para a avaliação do desempenho e coleta das amostras musculares para a análise morfológica. A análise morfométrica (cálculo do diâmetro das fibras) e a expressão do mRNA da MyoD, miogenina e miostatina (por RT-qPCR) foi realizada nos grupos AL, J5 e J10, nos períodos 0, 5, 10, 20 e 42 dias. Os juvenis de tilápia submetidos a cinco, dez e 20 dias de jejum mostraram um ganho de peso compensatório, entretanto somente o grupo J5 apresentou crescimento compensatório total. Os grupos AL, J5 e J10 apresentaram maior comprimento dorso lateral do que nos grupos J20 e JJ, indicando um espessamento da massa muscular dorsal. A taxa de crescimento específico foi maior após 10 dias de realimentação... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Muscle growth mechanisms are controlled by molecular pathways which can be affected by food restriction and refeeding. In this study, we analyze if short periods of starvation and refeeding can influence the expression of muscle growth-related genes and muscle growth characteristics, in juvenile Nile tilapia (Oreochromis niloticus), strain chitralada. We used juvenile fish with average body weight of 0.6 ± 0.19 g randomly divided into three groups with three replicates: (AL) feeding continuously from beginning to end of the experiment; (J5) five days fasting and refeeding for 37 days and (J10) ten days fasting and refeeding for 32 days. The experiment lasted 42 days. After 5 and 10 days of food restriction, fish from J5 and J10 were fed to apparent satiation with a commercial diet. At the beginning of the experiment (day 0) and at 5, 10, 20 and 42 days, fish from all treatment (n= 14) were anesthetized and sacrificed. Muscle samples (n= 7 at each group) were collected, fixed in Karnovsky solution and transverse sections were stained by hematoxylin-eosin to evaluate muscle morphology and muscle fiber hypertrophy and hyperplasia. The muscle fibers were grouped into classes, 20 μm, >20 - 30 μm, >30 - 40 μm, >40 - 50 μm and >50 μm. MyoD, myogenin and myostatin mRNA expression was performed by RT-qPCR. At the end of the experiment, fasting for five and ten days resulted in small reduction on body weight compared with AL group. Following refeeding, fasted fish gained weight continuously; at 42 day, J5 showed an increase in body weight, which was similar to that observed in AL group. In J10, body weight increased after refeeding, but it was lower than that observed in AL group. HE stain showed white skeletal muscle making up most of the muscle mass in all groups studied; morphological characteristic were... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Desempenho produtivo e crescimento muscular de linhagens de tilápia-do-nilo cultivadas na fase inicial /

Freitas, Thiago Mendes de. January 2011 (has links)
Resumo: O presente estudo teve como objetivo a comparação do desempenho produtivo e do crescimento muscular (morfometria das fibras musculares e expressão gênica dos fatores de regulação miogênica) de três linhagens de tilápia-do-nilo (GIFT, ―Supreme‖ e Tailandesa), alimentadas com dieta comercial contendo ou não o hormônio 17α-metiltestosterona, durante a fase inicial, quando ocorre o processo de diferenciação sexual. O trabalho foi conduzido em esquema fatorial (2 dietas X 3 linhagens), constituído por seis tratamentos com quatro repetições de cada, por 29 dias. As larvas (com quatro dias pós eclosão) foram estocadas na densidade de 4 larvas.L-1 e receberam dieta comercial farelada, em seis arraçoamentos diários. Foram realizadas cinco avaliações biométricas durante o experimento para verificação dos resultados de desempenho. Além disso, foram calculadas as taxas de sobrevivência, de masculinização e a homogeneidade dos animais no final do experimento. Para a avaliação morfométrica das fibras musculares (n = 8 indivíduos por tratamento) foram realizadas amostragens aos 4, 19 e 33 dias pós-eclosão, para confecção das lâminas de tecido muscular. Mensurou-se o diâmetro e a área de 200 fibras musculares para cada amostra, que foram distribuídas nas seguintes classes de diâmetro (D): classe 10 (D ≤10μm), classe 20 (10< D ≤20 μm), classe 30 (20< D ≤30 μm), classe 40 (30< D ≤40μm) e classe 50 (D > 40 μm). As análises de expressão gênica da MyoD e Miogenina foram realizadas por PCR em tempo real, com uma amostragem aos 4 dpe e outra aos 33 dpe. A linhagem ―Supreme‖ apresentou melhores respostas de desempenho produtivo e de sobrevivência, e menores valores do coeficiente de variação. As taxas de masculinização em todas as linhagens estiveram acima de 97%. A masculinização, por meio da adição de 17α-metiltestosterona, interferiu... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study aimed to compare the performance and muscle growth (muscle fiber morphometry and gene expression of myogenic regulatory factors) from three Nile tilapia strains (GIFT, "Supreme" and Thai), fed commercial diet with or without the hormone 17α-methyltestosterone (MT) during the initial phase, when does the process of sexual differentiation. The experiment was conducted in a factorial scheme (3x2), making up six treatments with four replicates each. The larvae (4 days post-hatching, dph) were stocked at 4 larvae.L-1 and were fed a commercial diet six times a day, during 29 days. Fish growth was evaluated along the experiment, as well as the survival rates, masculinization rates and homogeneity of the animals at the end (29 days). For the morphometric analysis of the muscle fibers (n = 8 per treatment), samples were taken at 4, 19 and 33 days post-hatching (dph) and transversal sections of the epiaxial muscle were obtained. The diameter (d) and the area of 200 muscle fibers were measured in each sample, and the diameters were classified as follow: class 10 = d ≤ 10 μm, class 20 = 10 < d ≤ 20 μm, class 30 = 20 < d ≤ 30 μm, class 40 = 30 < d ≤ 40 μm, and class 50 = d > 40μm. The analysis of gene expression of MyoD and Myogenin were performed by real time PCR (sampling at 4 and 33 dph). The "Supreme" strain showed better growth performance, survival rates, and size homogeneity. All strains displayed masculinization rates above 97%. The use of MT affected the productive performance of Nile tilapia larvae, and the effects were different among the strains. The proportion of males and females of the juveniles that did not receive MT suggests a certain dependence on the strain used, requiring further studies in this direction. The ―Supreme‖ strain performed better, characterized by hyperplasia and hypertrophy of the muscle fibers... (Complete abstract click electronic access below) / Orientadora: Maria Célia Portella / Coorientador: Maeli Dal Pai-Silva / Banca: Fernanda Antunes Alves da Costa / Banca: Vander Bruno dos Santos / Mestre

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