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Imunoperoxidase e m?todos moleculares na detec??o de Mycoplasma spp. (Mollicutes: Mycoplasmataceae) em conduto auditivo de bovinos e em Raillietia spp. (Gamasida:Raillietidae). / Immunoperoxidase and molecular methods in the detection of Mycoplasma spp. (Mollicutes: Mycoplasmataceae) in the ear canal of bovine and in Raillietia spp (Gamasida:Raillietidae).Santos, Sandra Batista dos 16 February 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009-02-16 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Mycoplasma are the smallest and more fastidious prokaryotes known, being responsible by
high economical losses in livestock production. Mycoplasmas has been found frequently in
the ear canal of goats. In these cases, are very closely related with mites, Psoroptidae and
Raillietidae, that carried and disseminate mycoplasmas among the flocks. In Brazil, studies
related mycoplasmas in the ear canal of bovine inexist. Like this, in the Chapter I, were
surveyed up data on prevalence of mycoplasmas in the ear canal of bovine and your
association with mites Raillietia spp., and identification of the two Raillietia species that
occur in bovine of southeast, State Rio de Janeiro. The prevalence of Mycoplasma spp. in the
ear canal of bovine was considered high, 80% (48/60). In these animals high prevalence was
verified Raillietia spp. 76.7% (46/60). The parasitism by mycoplasmas and mites was verified
in 40 animals (74.1%), this association was highly significant (p<0.001). Of the females of
identified Raillietia 52.3% (101/193) were R. auris and 47.7% (92/193) were R. flechtmanni.
In this study, was proven that mycoplasmas and mites in the ear canal of the bovine are
closely related and these habitat occur pottentially patogenic mycoplasmas for cattle herds. In
the Chapter 2, Mycoplasma mycoides Cluster (GMM) was diagnosed by PCR-REA and
indirect immunoperoxidase (IPI), both, carried out in mycoplasmas isolates of hte ear canal.
In this study, 35 strains selected in agreement with their biochemistry and physiologic
proprieties, were used. Under IPI the prevalence obtained for GMM was 20.0% (12/60) while
by PCR-REA it was 41.7% (25/60). The IPI typing of these isolates resulted in 58.3% (7/12)
for M.mycoides mycoides LC and 41.7% (5/12) for M. capricolum. PCR-REA for M.
mycoides Cluster was confirmed by the amplicon size of 785bp, compatible with this group.
After restriction analysis with AluI in all M. mycoides cluster strains and ear canal samples the
fragments size obtained were compatible with this group, and neither fragment of 370bp that
is compatible with MmmSC of bovine origen it was visualized. / Mycoplasmas s?o os menores e mais fastidiosos procariotos conhecidos, sendo respons?veis
por altas perdas econ?micas relacionadas a produtividade em ruminantes. Micoplasmas tem
sido encontrados com frequ?ncia em conduto auditivo de caprinos. Nestes casos, est?o
estreitamente relacionados com ?caros Psoroptidae e Raillietidae, que carreiam e disseminam
micoplasmas entre os rebanhos. No Brasil, estudos sobre Mycoplasma em conduto auditivo de
bovinos inexistem. Assim, no Cap?tulo I, foram levantados dados sobre preval?ncia de
micoplasmas presentes no conduto auditivo de bovinos e sua associa??o com ?caros Raillietia
spp., al?m da identifica??o das duas esp?cies de Raillietia spp. parasitas de conduto auditivo
de bovinos da regi?o sudeste do Estado do Rio de Janeiro. A preval?ncia de Mycoplasma spp.
no conduto auditivo de bovinos foi considerada alta, 80% (48/60). A preval?ncia de Raillietia
spp. foi de 76,7% (46/60). Em 40 (74,1%) animais verificou-se parasitismo por Raillietia spp.
e Mycoplasma spp., esta associa??o foi altamente significativa (p<0,001). Das f?meas de
Raillietia identificadas 52,3% (101/193) foram R. auris e 47,7% (92/193) foram R.
flechtmanni. comprovou-se que micoplasmas e ?caros do conduto auditivo de bovinos est?o
estreitamente relacionados e que neste s?tio de localiza??o est?o presentes Mycoplasmas com
alto potencial patog?nico para bovinos. No Cap?tulo II, foi realizada tipifica??o molecular
dos isolados de Mycoplasma pertencentes ao Grupo Mycoplasma mycoides (GMM) atrav?s da
t?cnica de PCR-REA, sendo estes resultados comparados com os obtidos na t?cnica de
imunoperoxidase indireta (IPI). A preval?ncia obtida para o GMM na IPI foi de 20,0%
(12/60) enquanto na PCR-REA foi de 41,7% (25/60). Das esp?cies de Mycoplasma tipificadas
pela IPI 58,3% (7/12) foram M. mycoides subsp. mycoides LC e 41,7% (5/12) foram M.
capricolum. Na PCR-REA, GMM, foi confirmado pela visualiza??o de um amplicon de
785bp, compat?vel com este grupo. Na clivagem do produto da PCR com a enzima de
restri??o AluI, os fragmentos obtidos foram compat?veis com cepas padr?o do GMM, e dos
isolados de conduto auditivo de bovinos estudados, nenhum fragmento de 370pb compat?vel
com MmmSC, biotipo bovino foi encontrado.
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