A tubulização representa uma possível alternativa para reparo de lesões de nervos periféricos, por permitir a aplicação local de fatores de crescimento e neurorregenerativos assim como por facilitar o estudo dos mecanismos de ação relacionados à regeneração das fibras nervosas. O objetivo do presente estudo foi verificar se há crescimento de fibras amielínicas no nervo fibular comum de ratas Wistar adultas após a tubulização látero-terminal (TLT) sem a utilização de indutores de crescimento, através de análise morfológica e morfométrica das referidas fibras. Para tanto, o nervo fibular comum direito foi seccionado a 3 mm da sua emergência, o coto proximal sepultado e suturado na musculatura adjacente e um tubo de silicone (6 mm) interposto entre o coto distal do fibular e a lateral do nervo tibial (grupo TLT). O controle usado foi o segmento distal esquerdo do nervo fibular (grupo GN). Setenta dias após, foram realizados cortes semifinos e ultrafinos para análise de aspectos morfológicos e morfométricos através de microscopia de luz e microscopia eletrônica de transmissão (MET). Houve evidente brotamento axonal de fibras amielínicas, que cresceram a partir do nervo tibial intacto no grupo TLT em comparação ao grupo GN, sendo que o número total de axônios amielínicos foi similar nos dois grupos. Estudo morfométrico evidenciou diferenças significativas (p<=0,05) em relação à maior densidade de axônios amielínicos regenerados e em relação ao diâmetro mínimo axonal. No presente estudo os axônios amielínicos no nervo receptor, usando o modelo da TLT, foram quantificados. Esse modelo poderá ser útil e importante para estudo da plasticidade do sistema nervoso periférico. / Side-to-end tubulisation is a model recently developed in our laboratory to study nerve plasticity. In this model, collateral sprouting of fibers grow from intact donor nerve fibers to the distal stump of a receptor nerve. The objective of the present study was to study unmyelinated fibers using this model. Adults female Wistar rats were used and morphological and morphometric analysis were done. The fibular common nerve was sectioned 3 mm from its origin. The proximal stump was buried and sutured in the adjacent musculature. A silicone tube (6 mm) was fixed on the adjacent lateral portion of the intact tibial nerve and the fibular common nerve distal stump was sutured in the other extremity of the tube (SET group). The left fibular common nerve distal segment was used as control. Semithin and ultrathin sections were obtained and studied using light and transmission electron microscopy. Seventy days after, there was profuse axonal sprouting of unmyelinated fibers that grew from the nerve tibial, reaching the same number of axons when compared with the controls. In the present study unmyelinated axons in the receptor nerve using SET were quantified. SET is an important tool to study plasticity of peripheral nerve fibers.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:36:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 EudesESL_TESE.pdf: 7375820 bytes, checksum: c195e08c1d621b363793dbcfb6727636 (MD5) Previous issue date: 2014-06-06 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / A number of evidences show the influence of the growth of injured nerve fibers in Peripheral Nervous System (PNS) as well as potential implant stem cells (SCs) to make it more suitable for nerve regeneration medium. In this perspective, this study aimed to evaluate the plasticity of mesenchymal stem cells from bone marrow of mice in the presence of culture medium conditioned with facial nerve explants (D-10) and fibroblast growth factor-2 (FGF-2). In this perspective, the cells were cultivated only with DMEM (group 1), only with D-10(group 2), only with FGF-2(group 3) or with D-10 and FGF-2(group 4). The growth and morphology were assessed over 72 hours. Quantitative phenotypic analysis was taken from the immunocytochemistry for GFAP, OX-42, MAP-2, &#946;-tubulin III, NeuN and NF-200 on the fourth day of cultivation. Cells cultured with conditioned medium alone or combined with FGF-2 showed distinct morphological features similar apparent at certain times with neurons and glial cells and a significant proliferative activity in groups 2 and 4 throughout the days. Cells cultived only with conditioned medium acquired a glial phenotype. Cells cultured with FGF-2 and conditioned medium expressed GFAP, OX-42, MAP-2, &#946;-tubulin III, NeuN and NF-200. On average, area and perimeter fo the group of cells positive for GFAP and the ?rea of the cells immunostained for OX-42 were higher than those of the group 4. This study enabled the plasticity of mesenchymal cells (MCs) in neuronal and glial nineage and opened prospects for the search with cell therapy and transdifferentiation / Uma s?rie de evid?ncias mostra a influ?ncia do meio no crescimento de fibras nervosas lesadas no Sistema Nervoso Perif?rico (SNP), assim como o potencial do implante de C?lulas Tronco (CTs) em tornar esse meio mais prop?cio ? regenera??o nervosa. Nessa perspectiva, esse estudo teve como objetivo avaliar a plasticidade de c?lulas tronco mesenquimais (CTMs) da medula ?ssea de ratos diante da presen?a de meio de cultura condicionado com explantes de nervo facial (D-10) e fator de crescimento fibrobl?stico-2 (FGF-2). Dessa maneira as c?lulas mesenquimais foram cultivadadas com meio DMEM (grupo 1), s? com meio D-10(grupo 2), s? com FGF-2(grupo 3) ou com meio D-10 e FGF-2(grupo 4). O crescimento e a morfologia celular foram avaliados ao longo de 72 horas. Al?m disso, a avalia??o fenot?pica foi feita a partir da imunocitoqu?mica para GFAP, OX-42, MAP-2, &#946;-tubulina III, NeuN e NF-200 no quarto dia de cultivo. As c?lulas cultivadas com meio condicionado sozinho ou combinado com FGF-2 demonstraram caracter?sticas morfol?gicas semelhantes a neur?nios e c?lulas gliais e uma significativa atividade proliferativa nos grupos 2 e 4 ao longo dos dias. As c?lulas cultivadas com meio condicionado desprovido de tratamento com FGF-2 adquiriram fen?tipo glial demostrando imunorreatividade para GFAP e OX-42. As c?lulas cultivadas com meio condicionado com adi??o de FGF-2 expressaram GFAP, OX-42, MAP-2, &#946;-tubulina III, NeuN e NF-200. Em m?dia, a ?rea e per?metro das c?lulas do grupo 2 positivas para GFAP e a ?rea das c?lulas imunomarcadas para OX-42 foram maiores do que as do grupo 4. O estudo possibilitou a plasticidade de c?lulas mesenquimais (CMs) numa linhagem neuronal e glial e abriu perspectivas para busca de novas t?cnicas com terapia e transdiferencia??o celular