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Etude du complexe Dom34-Hbs1 ressemblant aux facteurs de terminaison : analyse fonctionnelle de ses rôles dans le contrôle qualité des ARN et dans la stimulation de la traduction par dissociation des ribosomes inactifs / Study of the termination factor like Dom34-Hbs1 complex : functional analysis of their roles in RNA quality control and in stimulating translation by dissociating inactive ribosomesVan Den Elzen, Antonia 13 September 2013 (has links)
Après un cycle de la production des protéines, les sous-unités des ribosomes terminés sont dissociés, afin de les rendre disponibles pour de nouveaux cycles de traduction. Si lors de la traduction le ribosome pause, il ne pourra pas terminer la traduction et être recyclé par la voie classique. Un mécanisme de recyclage alternatif a évolué pour dissocier de tels ribosomes arrêtés. Un complexe composé des facteurs Dom34 et Hbs1 induit leur dissociation. Ce complexe est aussi impliqué dans des voies de contrôle qualité qui ciblent des ARN qui causent des arrêts ribosomiques. Dans cette thèse, l'importance de plusieurs sites fonctionnels du complexe Dom34-Hbs1 pour ces voies contrôle qualité des ARNs est étudiée. De plus, la relation entre ces voies et leurs détails sont examiné. Finalement, un nouveau rôle de Dom34-Hbs1, en dissociant des ribosomes inactifs ce qui rend leurs sous-unités disponibles pour de nouveaux cycles de la traduction, est décrit. / Protein production is a cyclic process that consists of four stages: initiation, elongation, termination and recycling. During recycling the subunits of terminated ribosomes are dissociated, to make them available for new rounds of translation. If ribosomes stall during translation, ribosomes cannot terminate properly and canonical recycling cannot occur. Cells have mechanisms to rescue these stalled ribosomes. A complex formed by the factors Dom34 and Hbs1 induces their dissociation. This compex in RNA quality control, targeting RNAs that cause ribosomal stalling. In this thesis the importance of several functional sites of the Dom34-Hbs1 complex for the degradation of these RNA sis investigated. Details of and therelationship between RNA quality control pathways in which the complex functions are further investigated. Finally, a new role of this complex, dissociating inactive ribosomes and there by making their subunits available to re-enter the translation cycle is described.
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The RNA helicase Dbp5/DDX19 regulates the ribosomal entry of eRF1-eRF3 and Dom34-Hbs1 in translation termination and cytoplasmic mRNA quality controlBeißel, Christian 16 May 2021 (has links)
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Cytoplasmic control of sense-antisense mRNA pairs in Saccharomyces cerevisiae / Contrôle cytoplasmique des paires d'ARN messager sens-antisens chez Saccharomyces cerevisiaeNavickas, Albertas 23 September 2016 (has links)
Les récentes études transcriptomiques chez divers organismes ont montré que la transcription des gènes convergents peut produire des ARN messagers (ARNm) chevauchants. Ce phénomène a été analysé dans le contexte de l’interférence par ARN (ARNi) nucléaire, et peu d’information existe quant au destin cytoplasmique des messagers 3’ chevauchants ou leur impact sur l’expression des gènes. Dans ce travail, nous avons abordé les conséquences potentielles de l’interaction entre des paires d’ARNm sens-antisens chez Saccharomyces cerevisiae, un organisme modèle naturellement dépourvu de l’ARNi. Nous avons démontré que les extrémités 3’ complémentaires des ARNm peuvent interagir dans le cytoplasme et moduler la stabilité ainsi que la traduction d’ARNm. Nos résultats sont issus d’une étude détaillée d’une paire d’ARNm convergents, POR1 et OCA2, ensuite généralisée par l’approche de l’ARNi reconstituée chez S. cerevisiae. L’analyse globale a confirmé que dans les cellules sauvages, les paires d’ARNm sens-antisens forment des duplexes d’ARN in vivo et ont un rôle potentiel à moduler l’expression d’ARNm ou de protéines respectifs, dans des différentes conditions de croissance. Nous avons montré que le destin de centaines des messagers convergents est contrôlé par Xrn1, révélant l’importance de cette exoribonucléase 5’-3’ cytoplasmique très conservée dans la régulation post-transcriptionnelle des gènes convergents. Notre travail ouvre donc la perspective de considérer un nouveau mécanisme de l’interaction entre les paires d’ARNm sens-antisens dans le cytoplasme, chez les organismes contenant ou non la voie de l’interférence par ARN. / Recent transcriptome analyses have revealed that convergent gene transcription can produce many 3’ overlapping mRNAs in diverse organisms. This phenomenon has been studied in the context of nuclear RNA interference (RNAi) pathway, however little is known about the cytoplasmic fate of 3’ overlapping messengers or their impact on gene expression. In this work, we address the outcomes of interaction between sense-antisense mRNA pairs in Saccharomyces cerevisiae, a model organism naturally devoid of RNAi. We demonstrate that the complementary tails of 3’ overlapping mRNAs can interact in the cytoplasm in a sequence-specific manner and promote post-transcriptional remodeling of mRNA stability and translation. Our findings are based on the detailed analysis of a convergent mRNA pair, POR1 and OCA2, subsequently generalized using the reconstituted RNAi approach in S. cerevisiae. Genome-wide experiments confirm that in wild-type cells, sense-antisense mRNA pairs form RNA duplexes in vivo and thus have potential roles in modulating the respective mRNA or protein levels under different growth conditions. We show that the fate of hundreds of messenger-interacting messengers is controlled by Xrn1, revealing the extent to which this conserved 5’-3’ cytoplasmic exoribonuclease plays an unexpected but key role in the post-transcriptional control of convergent gene expression. In sum, our work opens a perspective to consider an additional, cytoplasmic mechanism of interaction between sense-antisense mRNA pairs, in both RNAi-positive and negative organisms.
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