Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-08T13:32:28Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 4048898 bytes, checksum: f5cec7deaee542231b18913fa6a7d0e7 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-08T13:32:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 4048898 bytes, checksum: f5cec7deaee542231b18913fa6a7d0e7 (MD5) Previous issue date: 2004-10-08 / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / O carrapato B. microplus é considerado o principal ectoparasita para a pecuária bovina mundial. Seu controle repousa pesadamente sobre a utilização de acaricidas que a cada ano que passa se mostram menos eficientes devido a aquisição de resistência pelo parasita. Como alternativa ecologicamente segura para controlar este parasito, tem sido desenvolvidas vacinas derivadas de antígenos ocultos para o sistema imune do hospedeiro. Porém, falhas vacinais com a glicoproteína Bm86 recombinante já tem sido descritas devido à polimorfismos no seu gene em diferentes populações de B. microplus. Já foi descrito variações de até 8.6% na seqüência deste gene. Uma variante da Bm86, denominada Bm95, foi identificada e também utilizada como vacina recombinante, revertendo os resultados negativos naquelas populações que foram resistentes à vacinação com a Bm86, mas com eficiências variáveis. Pesquisadores do Laboratório de Biologia e Controle de Hematozoários, da Universidade Federal de Viçosa, MG desenvolveram uma vacina sintética composta de três peptídeos derivados da Bm86, sendo que um deles, o 4824, é considerado o principal indutor da produção de anticorpos anti-SBm7462. Com o intuito de avaliar mutações no gene bm86 e a conservação da seqüência peptídica 4824 foram analisadas 30 populações de carrapatos B. microplus, de regiões geograficamente distintas do Brasil e países vizinhos. Para isso foi sintetizado, através do RNA total extraído das amostras, o cDNA que serviu de molde nas reações de PCR para amplificação da seqüência nucleotídica compreendida entre os nucleotídeos 278 – 1071. O material amplificado foi clonado em vetor pGEM ® e seqüenciado em seqüenciador automático pelo método enzimático. A análise foi feita através de alinhamento de múltiplas seqüências pelo programa BioEdit versão 5.0.5 e a verificação de polimorfismos por inspeção visual. As análises confirmaram as conservações das seqüências nucleotídicas e aminoácidicas do peptídeo 4824 e revelaram variabilidade genética dentro do gene bm86 entre as amostras pesquisadas. Através do sequenciamento do fragmento que codifica o peptídeo 4822 foi possível determinar que os testes realizados com a vacina sintética SBm7462 foram em amostras que divergiam em dois aminoácidos da seqüência peptídica da vacina, além de apresentarem variações superiores a 4.94% na seqüência da glicoproteína intestinal. / The tick B. microplus is considered the main ectoparasite for the world bovine cattle. Its control rests heavily about the acaricides use that are less efficient due to resistance acquisition on the part of the parasite to every year that passes. As alternative ecologically holds to control this parasite, it has been developed derived vaccines of cancealed antigens for the immune system of the host. Even so, flaws vaccinate with the protein Bm86 recombinant it has already been described due to the polymorphisms of its gene in different populations of B. microplus. It was already described variations of up to 8.6% in the sequence of this gene. A variant of Bm86, denominated Bm95, it was identified and also used as vaccine recombinant, reverting the negative results in those populations that were resistant to the vaccination with for Bm86 but with variable efficiencies. Researchers of the Laboratory of Biology and Control of Hematozoários, of the Federal University of Viçosa, MG developed a synthetic vaccine composed of three derived peptides of Bm86, and one of them, the 4824, the main inductor of the production of antibodies anti-SBm7462 is considered. With the intuit of evaluating mutations in the gene xiibm86 and the conservation of the sequence peptides 4824, 30 populations of ticks B. microplus were analyzed, of areas geographically different from Brazil and neighboring countries. For that it was synthesized, through extracted total RNA of the samples, the cDNA that served as mold in the reactions of PCR for amplification of the sequence of nucleotides understood among the nucleotides 278 - 1071. The amplified material was cloned in vectorial pGEM® and sequenced in automatic sequencer for the enzymatic method. The analysis was made through alignment of multiple sequences by the program BioEdit version 5.0.5 and the polymorphisms verification for visual inspection. The analyses confirmed the conservations of the sequences nucleotides and amino acids of the peptides 4824 and they revealed genetic variability inside of the gene bm86 among the researched samples. Through the sequencing of the fragment that codes the peptides 4822 it was possible to determine that the tests accomplished with the synthetic vaccine SBm7462 were in samples that diverged in two amino acids of the sequence peptides of the vaccine, besides they present superior variations at 4.94% in the sequence of the intestinal protein.