Made available in DSpace on 2017-05-12T14:47:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cristiane _Lurdes Paloschi.pdf: 1204212 bytes, checksum: 0429a0e71141d849cf2df342c98d4d01 (MD5) Previous issue date: 2014-07-15 / Fundação Araucária / This work aimed to study the effects of infestation of insects Sitophilus zeamais on the physicochemical and microbiological quality in corn kernels during storage. For the experiment, samples of hybrid maize (Zeamays) were collected from cultivar Dow 2B512Hx, grown in western Paraná, harvested in June / July 2013. For storage, the grains had water contents below 15% bs, and about 300g of them were stored in glass containers closed with tissue type Voil to facilitate gas exchange, with a total of 40 containers stored in a BOD incubator at a temperature of 27±1 °C for 180 days. From all the recipients, 20 were infested with 20 adult insects of Sitophilus zeamais and the other 20 were kept uninfested. Every 45 days, samples were taken and physical and chemical analyzes were carried out (grain weight loss, population variation of insects, classification of corn, mass of 1000 seeds, water content, ash, oil, protein and carbohydrates and dietary fiber total), as well microbiological analyzes (counting of filamentous fungi and identification of aflatoxin-producing fungi) and quantitation of aflatoxin (B1, B2, G1 and G2). Exploratory analysis of the response variables was done by use of the analysis of variance (ANOVA) and mean comparison test was performed by Tukey's test with a significance level of 0.05. The final grain weight in dry material with insects reduced in the course of time, what increased the losses in grain mass and showed statistically significant differences. The population of insects and the classification of maize also showed statistically significant differences. It was observed that when storage time increased, the population of insects also increased and the percentage of whole grains reduced for both storage conditions. The content of water, protein and filamentous fungi incidence increased in grains initially infested during storage, and the 1000 grains weight, the content of carbohydrates and total dietary fiber content in these grains decreased compared to uninfected grains. The incidence of aflatoxin was not detected in maize kernels during the studied storage period. Finally, from these results, it is possible to conclude that the longer the period of contact of insects with the largest grains, larger the damages and losses to producers are. However, S. zeamais did not behave as a mechanical vector of the fungus Aspergillus ssp., with no correlation between the incidence of filamentous fungi and the level of aflatoxins (B1, B2, G1 and G2). / Este trabalho teve como objetivo estudar os efeitos da infestação dos insetos Sitophilus zeamais sobre a qualidade físico-química e microbiológica em grãos de milho durante o armazenamento. Para a condução do experimento, foram coletadas amostras de grãos de milho (Zeamays) híbrido da cultivar Dow 2B512Hx, cultivados na região Oeste do Paraná, colhidas em junho/julho de 2013. Para o armazenamento, os grãos se encontravam com teores de água abaixo de 15% b.s sendo armazenados cerca de 300 g em recipientes de vidros fechados com tecido tipo Voil, a fim de facilitar as trocas gasosas, totalizando 40 recipientes armazenados em câmera incubadora B.O.D à temperatura de 27±1 °C durante 180 dias. Do total de recipientes, 20 foram infestados com 20 insetos adultos de Sitophilus zeamais e os outros 20 foram mantidos sem infestação. A cada 45 dias, foram retiradas as amostras e realizadas análises físico-químicas (perda de massa dos grãos, variação populacional dos insetos, classificação do milho, massa de 1000 grãos, teor de água, cinzas, óleo, proteína e carboidratos e fibra alimentar total), microbiológicas (contagem de fungos filamentosos e identificação dos fungos produtores de aflatoxinas) e de quantificação de aflatoxinas (B1, B2, G1 e G2). A análise exploratória das variáveis respostas foi analisada pelo emprego da análise de variância (ANOVA) e o teste de comparação de médias foi realizado pelo teste de Tukey com nível de significância de 0,05. O peso final dos grãos em matéria seca com insetos reduziu ao longo do tempo, aumentando as perdas na massa dos grãos, apresentando diferenças estatísticas significativas. A população de insetos e a classificação do milho também apresentaram diferenças estatísticas significativas. Observou-se que, conforme aumentava o tempo de armazenamento, aumentava a população de insetos e reduzia a percentagem de grãos inteiros para ambas as condições de armazenamento. O teor de água, proteína e a incidência de fungos filamentosos aumentaram nos grãos inicialmente infestados ao longo do armazenamento e o peso de 1000 grãos e o teor de carboidratos e fibra alimentar total dos grãos diminuiu nestes grãos em relação aos grãos que não infestados. A incidência de aflatoxinas não foi detectada nos grãos de milho durante o período de armazenamento analisado. Pode-se concluir, com base nesses resultados, que quanto maior o período de contato dos insetos com os grãos maiores são os danos causados e os prejuízos para os produtores, porém o S. zeamais não se comportou como um vetor mecânico do fungo Aspergillus ssp., não havendo correlação entre a incidência de fungos filamentosos e o nível de aflatoxinas (B1, B2, G1 e G2).

Made available in DSpace on 2017-07-10T19:23:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cristiane _Lurdes Paloschi.pdf: 1204212 bytes, checksum: 0429a0e71141d849cf2df342c98d4d01 (MD5) Previous issue date: 2014-07-15 / Fundação Araucária / This work aimed to study the effects of infestation of insects Sitophilus zeamais on the physicochemical and microbiological quality in corn kernels during storage. For the experiment, samples of hybrid maize (Zeamays) were collected from cultivar Dow 2B512Hx, grown in western Paraná, harvested in June / July 2013. For storage, the grains had water contents below 15% bs, and about 300g of them were stored in glass containers closed with tissue type Voil to facilitate gas exchange, with a total of 40 containers stored in a BOD incubator at a temperature of 27±1 °C for 180 days. From all the recipients, 20 were infested with 20 adult insects of Sitophilus zeamais and the other 20 were kept uninfested. Every 45 days, samples were taken and physical and chemical analyzes were carried out (grain weight loss, population variation of insects, classification of corn, mass of 1000 seeds, water content, ash, oil, protein and carbohydrates and dietary fiber total), as well microbiological analyzes (counting of filamentous fungi and identification of aflatoxin-producing fungi) and quantitation of aflatoxin (B1, B2, G1 and G2). Exploratory analysis of the response variables was done by use of the analysis of variance (ANOVA) and mean comparison test was performed by Tukey's test with a significance level of 0.05. The final grain weight in dry material with insects reduced in the course of time, what increased the losses in grain mass and showed statistically significant differences. The population of insects and the classification of maize also showed statistically significant differences. It was observed that when storage time increased, the population of insects also increased and the percentage of whole grains reduced for both storage conditions. The content of water, protein and filamentous fungi incidence increased in grains initially infested during storage, and the 1000 grains weight, the content of carbohydrates and total dietary fiber content in these grains decreased compared to uninfected grains. The incidence of aflatoxin was not detected in maize kernels during the studied storage period. Finally, from these results, it is possible to conclude that the longer the period of contact of insects with the largest grains, larger the damages and losses to producers are. However, S. zeamais did not behave as a mechanical vector of the fungus Aspergillus ssp., with no correlation between the incidence of filamentous fungi and the level of aflatoxins (B1, B2, G1 and G2). / Este trabalho teve como objetivo estudar os efeitos da infestação dos insetos Sitophilus zeamais sobre a qualidade físico-química e microbiológica em grãos de milho durante o armazenamento. Para a condução do experimento, foram coletadas amostras de grãos de milho (Zeamays) híbrido da cultivar Dow 2B512Hx, cultivados na região Oeste do Paraná, colhidas em junho/julho de 2013. Para o armazenamento, os grãos se encontravam com teores de água abaixo de 15% b.s sendo armazenados cerca de 300 g em recipientes de vidros fechados com tecido tipo Voil, a fim de facilitar as trocas gasosas, totalizando 40 recipientes armazenados em câmera incubadora B.O.D à temperatura de 27±1 °C durante 180 dias. Do total de recipientes, 20 foram infestados com 20 insetos adultos de Sitophilus zeamais e os outros 20 foram mantidos sem infestação. A cada 45 dias, foram retiradas as amostras e realizadas análises físico-químicas (perda de massa dos grãos, variação populacional dos insetos, classificação do milho, massa de 1000 grãos, teor de água, cinzas, óleo, proteína e carboidratos e fibra alimentar total), microbiológicas (contagem de fungos filamentosos e identificação dos fungos produtores de aflatoxinas) e de quantificação de aflatoxinas (B1, B2, G1 e G2). A análise exploratória das variáveis respostas foi analisada pelo emprego da análise de variância (ANOVA) e o teste de comparação de médias foi realizado pelo teste de Tukey com nível de significância de 0,05. O peso final dos grãos em matéria seca com insetos reduziu ao longo do tempo, aumentando as perdas na massa dos grãos, apresentando diferenças estatísticas significativas. A população de insetos e a classificação do milho também apresentaram diferenças estatísticas significativas. Observou-se que, conforme aumentava o tempo de armazenamento, aumentava a população de insetos e reduzia a percentagem de grãos inteiros para ambas as condições de armazenamento. O teor de água, proteína e a incidência de fungos filamentosos aumentaram nos grãos inicialmente infestados ao longo do armazenamento e o peso de 1000 grãos e o teor de carboidratos e fibra alimentar total dos grãos diminuiu nestes grãos em relação aos grãos que não infestados. A incidência de aflatoxinas não foi detectada nos grãos de milho durante o período de armazenamento analisado. Pode-se concluir, com base nesses resultados, que quanto maior o período de contato dos insetos com os grãos maiores são os danos causados e os prejuízos para os produtores, porém o S. zeamais não se comportou como um vetor mecânico do fungo Aspergillus ssp., não havendo correlação entre a incidência de fungos filamentosos e o nível de aflatoxinas (B1, B2, G1 e G2).

O uso da técnica de RNAi vem sendo avaliada em diversos insetos-pragas pois, é uma estratégia inovadora que pode ser integrada no manejo de importantes pragas agrícolas. Os insetos da Ordem Lepidoptera são reconhecidos por apresentarem recalcitrância à técnica de silenciamento utilizando dsRNA. Assim, ajustes devem ser feitos aos métodos de entrega de dsRNA para que haja estabilidade da molécula até atingir o mRNA alvo de silenciamento no inseto. O silenciamento gênico por RNAi possui potencial de uso para o controle da \"traça-do-tomateiro\" Tuta absoluta (Meyrick, 1917) (Lepidoptera: Gelechiidae), uma das principais pragas do tomateiro no mundo. O objetivo do trabalho foi selecionar e avaliar o silenciamento de genes de T. absoluta, utilizando o método de entrega de dsRNA via bactéria E. coli HT115 (DE3), disponibilizada em dieta artificial. Também, objetivando a aplicabilidade da utilização de bactérias que se desenvolvam no mesmo hábitat de insetos-pragas, estudou-se a colonização das bactérias endofíticas Pantoea agglomerans linhagem 33.1, Burkholderia sp. linhagem SCMS54 e Burkholderia ambifaria linhagem RZ2MS16 em plantas de tomateiro e lagartas de T. absoluta, para posterior transformação e tentativa de utilização como estratégia de entrega de dsRNA para silenciamento de genes alvos de T. absoluta. Foram avaliados, por meio da metodologia de dieta artificial, oito genes de T. absoluta: juvenile hormone inducible protein - JHP; juvenile hormone epoxide hydrolase protein - JHEH; ecdysteroid 25-hydroxylase - PHM; chitin synthase A - CHI; glutathione S-transferase epsilon 2 - GST; carboxylesterase - COE; alkaline phosphatase - AP e; arginine kinase - AK. Por meio de avaliação dos parâmetros biológicos (mortalidade larval; duração da fase larval e peso de pupas) e expressão gênica em cinco períodos de alimentação, comprovou-se a eficiência da metodologia na avaliação do silenciamento gênico por RNAi, sendo possível realizar screening de grande quantidade de genes e avaliar os efeitos do silenciamento gênico no desenvolvimento de T. absoluta. Os genes AK, CHI e JHP apresentaram resultados positivos quanto ao silenciamento gênico e mortalidade larval, sendo promissores para uso de silenciamento por RNAi como estratégia de controle de T. absoluta. Pantoea agglomerans apresentou os melhores resultados de colonização de plantas de tomateiro \"Micro-Tom\" e lagartas de T. absoluta, além de estarem presentes em tecidos preferencialmente utilizados na alimentação das lagartas. Porém, lagartas não apresentaram diferenças na mortalidade larval ao se alimentarem de plantas de tomateiro \"Micro-Tom\" inoculadas com bactérias de P. agglomerans transformadas. / The use of RNAi technique has been evaluated in several insect pests because it is an innovative strategy that can be integrated in the management of important agricultural pests. Insects of the Order Lepidoptera are recognized to present recalcitrance to gene silencing using dsRNA. Thus, adjustments should be done to dsRNA delivery methods to have molecule stability until it reaches the mRNA target for silencing in the insect. Gene silencing by RNAi has potential use to control the tomato leafminer Tuta absoluta (Meyrick, 1917) (Lepidoptera: Gelechiidae), one of the main insect pests of tomato crop worldwide. The objective of this work was to select and evaluate the silencing of T. absoluta genes using dsRNA delivery method via E. coli HT115 (DE3) bacterium, offered in artificial diet. Also, aiming the applicability of the use of bacteria growing in the same habitat of insect pests, we evaluate the colonization of the endophytic bacteria Pantoea agglomerans strain 33.1, Burkholderia sp. strain SCMS54 and Burkholderia ambifaria strain RZ2MS16 in tomato plants and T. absoluta larvae for further transformation and potential use as dsRNA delivery strategy for silencing target genes of T. absoluta. We evaluated eight genes of T. absoluta: juvenile hormone inducible protein - JHP; juvenile hormone epoxide hydrolase protein - JHEH; ecdysteroid 25-hydroxylase - PHM; chitin synthase A - CHI; glutathione S-transferase epsilon 2 - GST; carboxylesterase - COE; alkaline phosphatase - AP and; arginine kinase - AK. Evaluating biological parameters (larval mortality, larval stage duration and pupal weight) and gene expression in five feeding periods, we proved the efficiency of the methodology in the evaluation of gene silencing by RNAi, and evaluated the effects of gene silencing on the development of T. absoluta. The genes AK, CHI and JHP presented positive results regarding gene silencing and larval mortality, being promising to use RNAi silencing as a strategy to control T. absoluta. Pantoea agglomerans showed good results colonizing \"Micro-Tom\" tomato plants and T. absoluta larvae, besides being present in tissues preferentially used by larvae for feeding. However, larvae did not show differences in larval mortality when feeding on tomato plants inoculated with transformed P. agglomerans.

Soybean [Glycine max (L.) Merrill] is the most important crop grown in Brazil and worldwide. Nevertheless, the yield is still limited by several issues in which the damages by caterpillars and stink bugs are main ones if not controlled efficiently. The pest control is usually achieved by insecticide application, which results in an increased production cost, disturb biological control, and causes contamination in harvest and environment, so it is necessary to develop news techniques aiming to reduce the amount of sprayed insecticides. The preset study was carried out in five soybean grown areas during 2010/11 and 2011/12. This experiment aimed to analyze the spatial and temporal distribution in order to perform site-specific control of caterpillars and stink bugs by using agriculture-precision tools for mapping and control of insects. In addition, the technical and economic effects of this approach were surveyed. The first chapter shows the site-specific control for caterpillars while the chapter two for stink bugs. The population of soybean caterpillars can be suppressed by site-specific approach where the population exceeds the economic threshold and therefore saving insecticide. The site-specific control for stink bugs in soybean allows save insecticide and decreases the bugs population, but causes outbreaks far beyond the economic threshold. Economically speaking, the site-specific control of caterpillars and stink bugs is possible, but requires further studies to optimize the sampling procedure. / A soja [Glycine max (L.) Merrill] é uma cultura de grande expressão no Brasil e no mundo, no entanto a sua produtividade ainda é limitada por diversos fatores, onde destacam-se os danos significativos causados pelas lagartas e percevejos quando não manejadas eficientemente. O controle destes insetos é geralmente feito com aplicações de inseticidas, o que ocasiona o aumento dos custos da lavoura, prejudica o controle biológico pela morte de inimigos naturais, e deixa resíduos tóxicos no produto colhido e no ambiente, por isso, se faz necessário desenvolver técnicas visando a sua utilização mais eficiente, que resulte em menores quantidades aplicadas. Este estudo foi realizado em cinco áreas de cultivo com soja nas safras 2010/11 e 2011/12 objetivando analisar a distribuição espacial e temporal e realizar o controle localizado de lagartas e percevejos em soja, utilizando técnicas de agricultura de precisão para o mapeamento e controle dos insetos. Também foi realizada a análise técnica e econômica deste sistema de manejo. O primeiro capítulo apresenta o estudo do controle localizado de lagartas e o segundo capítulo o estudo do controle localizado de percevejos em soja. A população de lagartas da soja pode ser controlada de forma localizada nos pontos onde a população ultrapassa o nível de controle, proporcionando economia de inseticida. O controle localizado de percevejos em soja permite economia de inseticida e reduz a população, mas não impede a reinfestação da área acima do nível de controle. Em termos econômicos, o controle localizado de lagartas e percevejos é viável, porém são necessários estudos para aperfeiçoar o sistema de amostragem.

O uso da técnica de RNAi vem sendo avaliada em diversos insetos-pragas pois, é uma estratégia inovadora que pode ser integrada no manejo de importantes pragas agrícolas. Os insetos da Ordem Lepidoptera são reconhecidos por apresentarem recalcitrância à técnica de silenciamento utilizando dsRNA. Assim, ajustes devem ser feitos aos métodos de entrega de dsRNA para que haja estabilidade da molécula até atingir o mRNA alvo de silenciamento no inseto. O silenciamento gênico por RNAi possui potencial de uso para o controle da \"traça-do-tomateiro\" Tuta absoluta (Meyrick, 1917) (Lepidoptera: Gelechiidae), uma das principais pragas do tomateiro no mundo. O objetivo do trabalho foi selecionar e avaliar o silenciamento de genes de T. absoluta, utilizando o método de entrega de dsRNA via bactéria E. coli HT115 (DE3), disponibilizada em dieta artificial. Também, objetivando a aplicabilidade da utilização de bactérias que se desenvolvam no mesmo hábitat de insetos-pragas, estudou-se a colonização das bactérias endofíticas Pantoea agglomerans linhagem 33.1, Burkholderia sp. linhagem SCMS54 e Burkholderia ambifaria linhagem RZ2MS16 em plantas de tomateiro e lagartas de T. absoluta, para posterior transformação e tentativa de utilização como estratégia de entrega de dsRNA para silenciamento de genes alvos de T. absoluta. Foram avaliados, por meio da metodologia de dieta artificial, oito genes de T. absoluta: juvenile hormone inducible protein - JHP; juvenile hormone epoxide hydrolase protein - JHEH; ecdysteroid 25-hydroxylase - PHM; chitin synthase A - CHI; glutathione S-transferase epsilon 2 - GST; carboxylesterase - COE; alkaline phosphatase - AP e; arginine kinase - AK. Por meio de avaliação dos parâmetros biológicos (mortalidade larval; duração da fase larval e peso de pupas) e expressão gênica em cinco períodos de alimentação, comprovou-se a eficiência da metodologia na avaliação do silenciamento gênico por RNAi, sendo possível realizar screening de grande quantidade de genes e avaliar os efeitos do silenciamento gênico no desenvolvimento de T. absoluta. Os genes AK, CHI e JHP apresentaram resultados positivos quanto ao silenciamento gênico e mortalidade larval, sendo promissores para uso de silenciamento por RNAi como estratégia de controle de T. absoluta. Pantoea agglomerans apresentou os melhores resultados de colonização de plantas de tomateiro \"Micro-Tom\" e lagartas de T. absoluta, além de estarem presentes em tecidos preferencialmente utilizados na alimentação das lagartas. Porém, lagartas não apresentaram diferenças na mortalidade larval ao se alimentarem de plantas de tomateiro \"Micro-Tom\" inoculadas com bactérias de P. agglomerans transformadas. / The use of RNAi technique has been evaluated in several insect pests because it is an innovative strategy that can be integrated in the management of important agricultural pests. Insects of the Order Lepidoptera are recognized to present recalcitrance to gene silencing using dsRNA. Thus, adjustments should be done to dsRNA delivery methods to have molecule stability until it reaches the mRNA target for silencing in the insect. Gene silencing by RNAi has potential use to control the tomato leafminer Tuta absoluta (Meyrick, 1917) (Lepidoptera: Gelechiidae), one of the main insect pests of tomato crop worldwide. The objective of this work was to select and evaluate the silencing of T. absoluta genes using dsRNA delivery method via E. coli HT115 (DE3) bacterium, offered in artificial diet. Also, aiming the applicability of the use of bacteria growing in the same habitat of insect pests, we evaluate the colonization of the endophytic bacteria Pantoea agglomerans strain 33.1, Burkholderia sp. strain SCMS54 and Burkholderia ambifaria strain RZ2MS16 in tomato plants and T. absoluta larvae for further transformation and potential use as dsRNA delivery strategy for silencing target genes of T. absoluta. We evaluated eight genes of T. absoluta: juvenile hormone inducible protein - JHP; juvenile hormone epoxide hydrolase protein - JHEH; ecdysteroid 25-hydroxylase - PHM; chitin synthase A - CHI; glutathione S-transferase epsilon 2 - GST; carboxylesterase - COE; alkaline phosphatase - AP and; arginine kinase - AK. Evaluating biological parameters (larval mortality, larval stage duration and pupal weight) and gene expression in five feeding periods, we proved the efficiency of the methodology in the evaluation of gene silencing by RNAi, and evaluated the effects of gene silencing on the development of T. absoluta. The genes AK, CHI and JHP presented positive results regarding gene silencing and larval mortality, being promising to use RNAi silencing as a strategy to control T. absoluta. Pantoea agglomerans showed good results colonizing \"Micro-Tom\" tomato plants and T. absoluta larvae, besides being present in tissues preferentially used by larvae for feeding. However, larvae did not show differences in larval mortality when feeding on tomato plants inoculated with transformed P. agglomerans.