Submitted by Luanna Matias (lua_matias@yahoo.com.br) on 2015-03-11T18:57:33Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Lorena Lopes Ferreira - 2013.pdf: 653277 bytes, checksum: 4c9aa7d38ca40c4e856a2bcb3c40a6f2 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Matias (lua_matias@yahoo.com.br) on 2015-03-11T20:01:36Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Lorena Lopes Ferreira - 2013.pdf: 653277 bytes, checksum: 4c9aa7d38ca40c4e856a2bcb3c40a6f2 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-11T20:01:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Lorena Lopes Ferreira - 2013.pdf: 653277 bytes, checksum: 4c9aa7d38ca40c4e856a2bcb3c40a6f2 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-09-20 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Ticks are external parasites distributed in the world. Its parasitism causes direct and indirect damage to their hosts. Rhipicephalus microplus is the principal ectoparasite of the livestock causing economic and sanitary implications in the tropics regions. Control strategies are still a challenge and new alternatives are being sought to avoid the use of chemical methods that are reprehensible in relation to animal and human health, and also the environment. It is known that Bos indicus are more resistant to ticks than Bos taurus, while their crosses have a moderate resistance. The olfactory and gustatory senses allow these parasites to seek hosts, mating partners and distinguish between food and harmful substances. The receptors of these sensory organs are present throughout the body and appendages of arthropods, being pore sensilla in the chelicerae important when it comes to ticks taste receptors. Electrophysiology assists in the discovery of active principles that attract or repel these parasites and this will be proven after a behavioral test. This work was performed in order to characterize R. microplus electrophysiological responses to phagostimulants in different concentrations like salts (NaCl and KCl, 10-3 a 10-1M), glucose (10-4 a 10-1M), adenosine triphosphate (ATP, 10-6 a 10-2M), reduced glutathione (GSH, 10-6 a 10-2M), a mixture of substances (MIX, glucose1M+ATP10- 2M+GSH10-3M) and sera of susceptible and resistant cattle to ticks. A single cell electrophysiology technique was used in the taste sensila of R. microplus. Engorged nymphs of R. microplus were collected from naturally infested bovines. Females ticks were fed on rabbits for a period of three to five days. The females were removed and taken directly to the electrophysiology room in order to be prepared for the test. At least 10 females were tested per substance. The shape, frequency and amplitude of spikes were analyzed with the program Autospike. The statistical analysis was performed with the software R applying ANOVA followed by Tukey HSD post-hoc (5%). In relation to the phagostimulants it was observed that the taste receptors of the chelicerae were responsive for all substances tested, having a more intense responses at higher concentrations. The frequency of responses to salts ranged from 11.09 ± 0.98 to 28.50 ± 3.49 spikes/s; to glucose from 25.40 ± 2.33 to 37.15 ± 4.47 spikes/s, to ATP from 17.91 ± 1.28 to 37.30 ± 4.77 spikes/s; to GSH from 19.10 ± 2.84 to 56.6 ± 5.08 spikes/s and the MIX 50.60 ± 4.42 spikes/s. The responses were uni or multicellular depending on the concentration. Sera from resistant cattle xiii triggered a higher frequency of spikes/s (average of 53.48 ± 1.89 spikes/s, ranging from 48.45 ± 4.28 to 61.05 ± 5.14 spikes/s) when compared with the susceptible cattle (average of 40.33 ± 1.63 spikes/s, ranging from 33.30 ± 3.02 to 49.05 ± 5.20 spikes/s). The records analyzed showed that R. microplus was more stimulated by sera from resistant cattle than those from susceptible animals. It is known that in the serum has phagostimulants which probably triggered spikes in both groups. On the other hand, the greater number of spikes to resistant bovine serum might be due to the presence of deterrents compounds. Both sera showed a multicellular response. It was also observed that there were variations in the spikes frequency between animals of the same group according to the characteristic of spikes recorded. It was concluded that R. microplus respond in a dose dependent pattern to the phagostimulants tested. And also that, this tick was able differentiated the sera of susceptible to sera of resistant bovines. / Carrapatos são ectoparasitas obrigatoriamente hematófagos de diversas espécies e estão distribuídos mundialmente. Seu parasitismo acarreta danos diretos e indiretos a seus hospedeiros. Rhipicephalus microplus é o principal ectoparasita da pecuária causando problemas econômicos e sanitários nas regiões tropicais e subtropicais. O seu controle ainda é um desafio e novas alternativas estão sendo buscadas para evitar o uso de métodos químicos que são condenáveis em relação à saúde animal, humana e também ao meio ambiente. Sabe-se que os bovinos Bos indicus são mais resistentes que os Bos taurus, enquanto que seus cruzamentos possuem uma resistência moderada. A olfação e gustação permitem que esses parasitas busquem por hospedeiros, parceiros para cópula e distingam entre alimentos e substâncias nocivas a eles. Há receptores desses sentidos distribuídos por todo o corpo e apêndices dos artrópodes, sendo as porossensilas das quelíceras dos carrapatos importantes quando se refere a receptores gustativos. A eletrofisiologia auxilia na descoberta de compostos químicos que atraem ou repelem esses parasitos. Este trabalho foi feito com intuito de caracterizar as respostas eletrofisiológicas das porossensilas de R. microplus frente a alguns fagoestimulantes em diferentes concentrações como sais (NaCl e KCl, 10-3 a 10-1M), glicose (10-4 a 10-1M), adenosina trifosfato (ATP, 10-6 a 10-2M), glutationa reduzida (GSH, 10-6 a 10-2M) e uma mistura de substâncias (MIX, Glicose1M + ATP10-2M + GSH10-3M). Objetivou ainda avaliar as respostas eletrofisiológicas para soros de bovinos sensíveis (Girolando) e resistentes (Nelore) ao carrapato. Para isso foi utilizada a técnica de registro em sensila única nas porossensilas de fêmeas de R. microplus. Fêmeas alimentadas em coelhos por três a cinco dias foram usadas. Foram testadas no mínimo dez fêmeas por concentração e substância. Após o registro, analisou-se a forma, frequência e amplitude de spikes com o auxílio do programa Autospike. A análise estatística foi feita com o software R aplicando ANOVA seguido de Teste de Tukey com nível mínimo de significância de 5%. As porossensilas foram responsivas a todos os fagoestimulantes testados, mostrando resposta mais intensa nas maiores concentrações. A frequência de spikes/s para os sais variou de 11,09 ± 0,98 a 28,50 ± 3,49; para glicose 25,40 ± 2,33 a 37,15 ± 4,47; para o ATP de 17,91 ± 1,28 a 37,30 ± 4,77; para o GSH de 19,10 ± 2,84 a 56,6 ± 5,08 e o MIX de 50,60 ± 4,42. As respostas foram uni ou multicelulares. Os soros dos bovinos resistentes xi desencadearam uma maior frequência de spikes/s (média de 53,48 ± 1,89 spikes/s, variando 48,45 ± 4,28 a 61,05 ± 5,14 spikes/s) quando comparado com o grupo dos soros dos bovinos sensíveis (média de 40,33 ± 1,63 spikes /s, variando de 33,30 ± 3,02 a 49,05 ± 5,20 spikes/s). Os registros analisados mostraram que as porossensilas de R. microplus foram mais estimuladas pelo soro de animais resistentes do que aqueles de animais sensíveis. A maior frequência de spikes desencadeada pelos soros de bovinos resistentes pode ter ocorrido pela presença de compostos deterrentes além dos fagoestimulantes existentes no soro. Para ambos os soros foi observada uma resposta multicelular. Observou-se também que dentro de um mesmo grupo houve variações em relação à frequência dos spikes, que foi atribuído à resistência dos animais. Concluiu-se que as porossensilas de R. microplus responderam de forma dose dependente aos fagoestimulantes testados e também apresentaram uma maior atividade para soros de bovinos resistentes do que soros de bovinos sensíveis.