Darbo tikslas: Nustatyti adenozino receptorių (AR) genų raišką (informacinės RNR lygyje) plaučių kraujagyslių endotelio ląstelėse ir žiurkės plaučiuose, jų pokyčius esant hipoksijai, įvertinti AR poveikį endotelio ląstelių proliferacijai. Darbo uždaviniai: 1) Ištirti žiurkės plaučių smulkių kraujagyslių endotelio (PSKE) ir žiurkės plaučių arterijos endotelio (PAE) AR genų raišką, veikiant hipoksijai. 2) Nustatyti AR agonistų poveikį PSKE ląstelių proliferacijai. 3) Nustatyti AR genų raiškos pokyčius žiurkės plaučiuose esant hipoksijai. 4) Nustatyti adenozino receptorių A3 (A3R) pasiskirstymą plaučių arterinės hipertenzijos (PAH) paciento plaučių mėginyje, taikant imunohistocheminį tyrimą. Darbo metodai: genų raiška nustatyta taikant kiekybinę tikro laiko polimerazės grandininę reakciją (KTL-PGR) naudojant “Taqman®” pradmenis ir zondus adenozino receptoriams. Ląstelių proliferacija įvertinta tričiu žymėto timidino (3H-timidino) įjungimu į ląstelių DNR. A3R pasiskirstymas PAH paciento plaučiuose įvertinamas, taikant imunohistocheminį tyrimą. Tyrimo rezultatai: PSKE ląstelėse rasta adenozino receptorių A2B ir A3R. Hipoksijos aplinkoje A2BR genų raiška padidėjo 2 kartus po 24 val., 5 kartus po 40 val. A3R genų raiška sumažėjo 2 kartus po 24 val., 6 kartus po 40 valandų. PAE ląstelėse rasta AR: A1, A2AR ir A2BR. Hipoksijos aplinkoje A1R genų raiška padidėjo 2,5 karto po 24 val. ir išliko padidėjusi po 40 val. A2AR genų raiška padidėjo 2 kartus po 24 val. ir išliko padidėjusi... [toliau žr. visą tekstą] / Aims: Determine adenosine receptors (AR) gene expression in rat pulmonary microvascular endothelial cells (RPMVEC), rat pulmonary artery endothelial cells (RPAEC) and rat lungs during hypoxic conditions. Evaluate effects of adenosine receptors agonist to PRMVEC proliferation. Objectives: 1) Identify AR in RPMVEC and RPAEC. 2) Evaluate AR changes in RPMVEC and RPAEC during hypoxic conditions. 3) Determine adenosine receptors expression in rat lungs exposed to chronic hypoxia. 4) Perform immunohistochemical staining of A3R on a lung section from patient with pulmonary arterial hypertension (PAH). Methods: Adenosine receptors gene expression was determined by quantitative real time polymerase chain reaction (qRT-PCR) assay using “TaqMan®” primers. Cell proliferation was determined using a tritium labeled thymidine (3H-thymidine) assay. Immunohistochemistry was performed on paraffin embedded lung tissue sections. Results: RPMVEC express A2BR and A3R. During hypoxic conditions A2BR was upregulated 2-fold after 24 h. and 5-fold after 40h of hypoxic exposure. A3R was downregulated 2- fold after 24h. and 6-fold after 40h. RPAEC express A1R, A2AR and A2BR. During hypoxic conditions A1R expression was increased 2,5-fold after 24h and 40h. A2AR was upregulated 2-fold after 24h and 40h. A2BR expression was increased 2,5-fold after 24h and 40h of hypoxic exposure. The A3R agonist HEMADO treatment for 24h at the concentration of 10-7 M, increased RPMVEC proliferation 1,5-fold. AR... [to full text]