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Eficiência de biofertilizante de rochas e matéria orgânica com adição de quitosana fungica na cultura da banana / Effectiveness of rock biofertilizers with organic matter adding fungi chitosan on banana crop

SILVA, Emmanuella Vila Nova da 26 February 2016 (has links)
Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-06-20T13:56:49Z No. of bitstreams: 1 Emmanuella Vila Nova da Silva.pdf: 2141238 bytes, checksum: 4195dd6b72ac80c98d8b491bfb7f52e3 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-20T13:56:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Emmanuella Vila Nova da Silva.pdf: 2141238 bytes, checksum: 4195dd6b72ac80c98d8b491bfb7f52e3 (MD5) Previous issue date: 2016-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / In a modern agriculture the use of fertilizers and correctives aim to promote increment in food production, attending economic criterious and also to maintain the biota diversity and soil fertility, reducing environmental problems. One viable alternative is the use of phosphate and potassic rocks plus sulfur inoculated with the oxidative bacteria Acidithiobacillus. The rock biofertilizers (BPK) may produce a complete biofertilizer (BNPK) mixing with organic matter inoculated with free living diazotrophic bacteria to enrich the substrate in N by the process of biological nitrogen fixation and produce a bioprotector (PNPK) introducing the fungi Cunninghamella elegans, that contain chitin and chitosan in their cellular wall which protect plants against pathogens. In this way the aim of the study is to evaluate the effectiveness of the biofertilizer and bioprotector to observe in vitro the antifungic activity of the pathogenic fungi Fusarium oxysporum f.sp. cubense (FOC) that promote the Panana disease on banana crop; and moreover to evaluate the effects of chitosan and of the bioprotector (PNPK) to control the phitopatogen and the nutritional status of banana seedlings in cultivar resistant and sensible to the disease. Also, the objective of the study is to evaluate the effects of different fertilization treatments in some soil attributes. In the rock biofertilizer production were used two rates of elemental sulfur (10 and 20 %) inoculated with the oxidative bacteria Acidithiobacillus thiooxidans strain FG01, applying viable cells in concentration 106 mL-1. The bacterium was added in proportion equivalent to 1mL per g of elemental sulfur. In the in vitro assay the antimicrobial activity was evaluated against the FOC using the macrodilution technique with Potato - Dextrose (PD) and inoculating 0.2 mL of the spore suspention with concentration 3.5 x 106 spores mL-1, and incubated in Potato-Dextrose-Agar (BDA) without test substrate to determine the MIC (Minimum Inhibitory Concentration) and the MFC (Minimal Fungicidic Concentration), respectively. The fungi were inclubated at 28 ˚C for 7 days. The chitosan were applied in different rates (12; 10; 8; 6; 4; 2; 1 a 0 mg mL-1). The rate of chitosan equivalent to 1.0 mg mL-1 inhibits the FOC growth, and the same value was found when determined the MFC. The greenhouse experiment (pots of 2 L) used a Red Yellow Argisoil (1.5 kg vaso-1) with one seedling per pot and applying the treatments 30 days before the FOC inoculation. The banana seedlings were harvested 40 days after the pathogen inoculation and evaluated: Index of disease severity, dry shoot biomass, analyses of total N, P and K in shoots, and the soil chemical analyzes. The results showed that the biofertilizes produced in laboratory may be used to replacement of soluble fertilizers, and manufactured by low and medium producers to promote opportunities for low farmers. The results in the in vitro assays showed the antimicrobial potential of the fungi chitosan against the phytopatogenic fungi (FOC) in the banana crop and may be alternative to control the Panamá disease. The greenhouse experiment confirmed that in a general the bioprotector applied in great rates PNPK2 (150% recommended rate) and PNPK2+Q (150% recommended rate plus fungi chitosan) resulted in reduction in the index of disease severity, and independent of the cultivar, showed the best results of shoot dry biomass. The best results of the chemical analyzes turn evident the use of new fertilizer sources for reduction of the soil problems. / Na agricultura moderna, a exigência do uso de fertilizantes e corretivos tem a finalidade de proporcionar incremento na produção de alimentos, atender os critérios econômicos, e também conservar a fertilidade e a biodiversidade do solo, procurando minimizar danos ao ambiente. Uma alternativa viável é a utilização de rochas fosfatadas (RP) e potássicas (RK) para produzir biofertilizantes, sendo misturados com enxofre elementar e inoculados com bactérias do gênero Acidithiobacillus. Os biofertilizantes de rocha (RP e RK) são misturados com matéria orgânica e inoculados com bactérias diazotróficas de vida livre, para incremento em N, nutriente tão exigido para o crescimento das plantas. Quando acrescido da biomassa do fungo Cunninghamella elegans, que possui quitina e quitosana em sua parede celular pode acrescentar ao material, propriedades antifúngicas e fungiostáticas (bioprotetor). O trabalho teve o objetivo de avaliar a eficiência do biofertilizante produzido em laboratório, a partir de RP e RK; verificar a atividade antifúngica da quitosana e da nanoquitosana, em experimentos in vitro em relação ao fungo patógeno Fusarium oxysporum f.sp. cubense (FOC) causador do mal-do-Panamá na cultura da banana; assim como avaliar o efeito da quitosana e do bioprotetor (PNPK) no controle de fitopatógeno e observar o status nutricional de mudas de banana (resistente e altamente susceptível). O trabalho também objetiva avaliar os efeitos do PNPK em atributos químicos do solo. Na produção do biofertilizante (fosfatado/potássico (BP/BK)), no laboratório, foram adicionadas duas doses (10 e 20%) de enxofre elementar inoculado com a bactéria acidificante Acidithiobacillus thiooxidans estirpe FG01, em concentração de células viáveis 106 mL-1. A inoculação com a bactéria foi efetuada ja uma proporção de 1mL por 1g de enxofre. No experimento in vitro, a atividade antimicrobiana da quitosana fúngica foi avaliada contra o FOC pela técnica de macrodiluição em caldo Batata-Dextrose (BD) com a inoculação de 0,2 mL de suspensão espórica, com 3,5 x 106 esporos mL-1, e posterior incubação em meio Batata-Dextrose-Ágar (BDA) sem substância teste, para determinar a Concentração Inibitória Mínima (CIM) e a Concentração Fungicida Mínima (CFM), respectivamente. Os fungos foram incubados a 28 ˚C durante 7 dias. E a concentração da quitosana variou de 12; 10; 8; 6; 4; 2; 1 a 0 mg mL-1. A concentração de 1,0 mg mL-1 de quitosana foi capaz de inibir o crescimento do patógeno FOC, e este mesmo valor foi encontrado para a determinação da CFM. O experimento em casa de vegetação foi realizado em vasos com solo Argissolo Vermelho Amarelo (1,5 kg vaso-1). No plantio foi utilizada uma planta por vaso, sendo aplicados os tratamentos de adubação 30 dias antes da inoculação do patógeno. As mudas de banana foram coletadas 40 dias após a inoculação do patógeno e avaliadas as seguintes variáveis: índice de severidade da doença, biomassa seca da parte aérea, análise de N, P e K das plantas e análise dos atributos químicos do solo. Os resultados dos experimentos mostram que os adubos produzidos no laboratório podem ser utilizados em substituição aos fertilizantes minerais solúveis, e também podem ser produzidos por pequenas e médias empresas, criando oportunidades para os agricultores de baixa renda; os resultados do experimento in vitro demonstraram o potencial antimicrobiano da quitosana fúngica em relação ao fungo fitopatogênico FOC da cultura da banana demonstrando uma alternativa para o controle do mal-do Panamá. O experimento em casa-de-vegetação confirmou que, de um modo geral, o bioprotetor PNPK2 (150% da dose recomendada) e PNPK2+Q (150% da DR acrescido de quitosana) resultaram no menor índice de severidade da doença, e independente da variedade apresentaram os melhores resultados da parte aérea, assim como os melhores resultados de atributos químicos do solo, reforçando o uso de novas fontes de nutrientes, que não agridam o solo e seja uma alternativa aos fertilizantes minerais solúveis.
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Otimização de biofertilizante de rochas com materiais orgânicos e de bioprotetor com quitosana fúngica

SOUSA, Lusiene Barbosa 07 July 2016 (has links)
Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-07-20T13:22:00Z No. of bitstreams: 1 Lusiene Barbosa Sousa.pdf: 1081264 bytes, checksum: 86b0b68b951e6e66878d4abd9b2c71f7 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-20T13:22:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lusiene Barbosa Sousa.pdf: 1081264 bytes, checksum: 86b0b68b951e6e66878d4abd9b2c71f7 (MD5) Previous issue date: 2016-07-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The use of alternative materials with potential for use in agriculture has been studied over many years. Economic material as phosphate and potassic rocks are frequently been used although, they not present nutrients in available forms for plant absorption. Rock biofertilizers produced from P and K rocks mixed with sulfur inoculated with Acidithiobacillus thiooxidans produces metabolic sulfuric acid and contributes decisively do release nutrients contained in rocks which constitutes alternative products for use in agriculture. The rock biofertilizers promoted acidity in soil and needs to be neutralized mixing organic matters to produce a mixed biofertilizer, and can be enriched in N by inoculation with free living diazotrophic bacteria and showed high agronomic efficiency. When the mixed biofertilizers are inoculates with fungi that contain chitosan produce a bioprotector that may protect plants against diseases. The work aim to evaluate the optimization of rock biofertilizers (BPK) mixing different proportions of organic matters and selecting the best diazotrophic bacteria for inoculation of the mixed biofertilizer (BNPK) and furthermore to select the best fungi containing chitosan in their cellular walls. Were obtained free living diazotrophic bacteria from different soils of the Brazilian Northeast region and evaluated the potential to realize the biological nitrogen fixation (FBN) process, by chromatographic analyzes and by the complete sequencing of the 16S gen. To study the mixed biofertilizer were realized three laboratorial experiments using trays. In the first experiment were used organic materials (OM) with treatments using different proportions of the OM, with 3 replicates. Were used Sugarcane Mud Cake (S); Earthworm compost (E) and Compost of Trees (C) and the 22 proportions in the respective: 1(5:0:0), 2(4:1:0),3(3:1:1), 4(2:3:0), 5(1:4:0), 6(4:0:1), 7(3:2:0), 8(3:0:1), 9(2:2:1), 10(2:1:2),11(1:3:1),12(1:1:3),13(1:2:2)14(0:5:0),15(0:4:1),16(0:1:4),17(0:3:2), 18(0:2:3), 19( 0:0:5),20(2:0:3)) (v/v). Samples were collected in times: (0); 10; 20; 30 and 40 days to determine: pH (H2O), Total C, N, available P and K, exchangeable Ca, Mg and Al+3. In the second experiment were used the best proportions screened in the first experiment (3:2:0 and 2:3:0), mixed with 1 volume of PK rock biofertilizer, inoculated with 100 and 200 mL (inocules from 4 isolates) with 3 replicates. The material were sampled during 40 days (0, 10, 20, 30 and 40 days) to determine: pH (H2O), total N, available P and K. In the third experiment were used the best proportion of Organic Matter and PK rock biofertilizer in proportion (2:3:1), inoculated with the Mucorales fungi (Cunninghamella elegans, Muco hiemalis, Rhizopus arrhizus), with 4 replicates. The experiments were conducted in a completely experimental design. The first experiments showed significant difference between the treatments, except to carbon-C and nitrogen -N, and in the second experiment occurred individual effect for P; K and C. Treatments 4; 7 and 11, contributed to increase nutrients in the biofertilizer, and they may be alternative as organic mineral product in replacement of conventional fertilizer. The strains NFB 4 and NFB 1003 presented the best results and increase N, P, K and C in the mixed biofertilizer in the period correspondent to 25 - 30 days. The mixed biofertilizer inoculation in a general increase total N. The mixed biofertilizer inoculated with free living diazotrophic bacteria increase total N. / O uso de insumos alternativos com potencial para produção agrícola tem se destacado com o passar dos anos. Os biofertilizantes de rocha fosfatada (BP) e potássica (BK) são insumos que já demonstraram eficiência agronômica em diferentes culturas, quando misturados com materiais orgânicos formando o biofertilizante misto (inoculado com bactérias de vida livre) e quando inoculado com fungos produtores de quitosana formando o bioprotetor. Objetivou-se avaliar o melhoramento do biofertilizante de rochas naturais (BPK), através da mistura de diferentes proporções de materiais orgânicos para 1 parte de rocha, da seleção da melhor bactéria diazotrófica para inoculação do substrato (biofertilizante misto-BNPK) e do fungo produtor de quitosana. Antes de realizar os experimentos foram isoladas bactérias de vida livre de solos de diferentes regiões do Nordeste. Estas bactérias foram avaliadas quanto ao potencial de fixar N por meio da estimativa da atividade de redução de acetileno, e pelo sequenciamento completo do gene 16S. Para o estudo do biofertilizante misto foram realizados três experimentos com ensaios em bandejas. No primeiro experimento utilizou-se diferentes materiais orgânicos em distintas proporções (T:H:C) representando os tratamentos com 3 repetições cada. Materiais orgânicos utilizados foram: T= Torta; H=húmus de minhoca; C=Composto de poda de árvores, 1(5:0:0),2(4:1:0),3(3:1:1),4(2:3:0),5(1:4:0),6(4:0:1),7(3:2:0),8(3: 0:1), 9(2:2:1), 10(2:1:2), 11(1:3:1), 12(1:1:3),13(1:2:2)14(0:5:0),15(0:4:1),16(0:1:4),17(0:3:2), 18(0:2:3), 19 (0:0:5),20(2:0:3)) (v/v). As amostragens foram realizadas após a instalação do experimento nos tempos. 0; 1; 2; 3; e 4 dias, para determinação de pH (H2O), C, N (total), P e K disponível, Ca, Mg trocável e Al+3 trocáveis. No segundo experimento utilizou-se as duas melhores proporções do experimento anterior (3:2:0; 2:3:0), e 1 parte de biofertilizante de rochas, as quais foram inoculadas com bactérias diazotróficas de vida livre. Esses materiais foram inoculados com 100 e 200 ml de inóculos de 4 isolados de bactérias de vida livre com 3 repetições, com amostragem desse material durante 40 dias e em 4 tempos (0: 10: 20: 30: 40), para analises de pH (H2O), N, C (totais) e P e K disponível. No terceiro experimento utilizou-se a melhor proporção de material orgânico do primeiro experimento (2:3:0) e 1 parte de biofertilizante de rochas, inoculando com fungos da ordem Mucorales (Cunninghamella elegans, Muco hiemalis, Rhizopus arrhizus) com 4 repetições. Os ensaios foram realizados no delineamento inteiramente casualizado. Para todos os experimentos houve diferença significativa entre os tratamentos analisados, exceto para o carbono-C e o nitrogênio-N do primeiro experimento, P; K; C no segundo experimento, havendo apenas efeito individual. Para o primeiro experimento os tratamentos 4(2:3:0); 7(3:2:0); 11(2:2:1), contribuíram de forma significativa para o acréscimo de nutrientes, podendo ser recomendados como substratos orgânico-mineral em substituição a fertilização comercial. No segundo experimentos as estirpes NFB4 e NFB 1003 apresentaram os melhores resultados. Houve aumento no teor de N, K, C, P no biofertilizante misto no período aproximado de 25 a 30 dias. Já para o terceiro experimento os fungos Rhizopus arrhizus e Cunninghamella elegans foram mais efetivos na produção de acidez do que Mucor hiemalis. O biofertilizante misto inoculado com fungos da Ordem Mucorales, de uma maneira geral, não mostrou grande variação na disponibilização de P e K disponível. As proporções de materiais orgânicos contribuíram para o acréscimo de nutrientes aos substratos. Os tratamentos 4-(2:3:0) 7-(3:2:0) 3-(3:1:1), apresentaram os melhores resultados. Pelo sequenciamento completo as estirpes diazotróficas utilizadas no segundo experimento foram identificadas como Bacillus subtilis, Mesorhizobium, Paenibacillus e Beijerinckia indica. A inoculação do biofertilizante misto com as diazotróficas de vida livre, de uma maneira geral, incrementou o teor de N. Não houve diferença entre as doses de bioprotetores aplicadas em relação ao crescimento radial do Fusarium solani.
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Bioprotetor com bactéria diazotrófica e quitosana fúngica em comparação com fertilizante mineral solúvel na uva Isabel / Bioprotector with diazotrophic bacteria and fungal chitosan compared to mineral fertilizer soluble grape Isabel

SILVA JÚNIOR, Sebastião da 31 July 2012 (has links)
Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-08-16T13:50:04Z No. of bitstreams: 1 Sebastiao da Silva Junior.pdf: 708266 bytes, checksum: 7c87068f4378906bfe5945f8009b5d88 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-16T13:50:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sebastiao da Silva Junior.pdf: 708266 bytes, checksum: 7c87068f4378906bfe5945f8009b5d88 (MD5) Previous issue date: 2012-07-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The grapes Vitis labrusca contributes activily for the Brazilian development social and economic, particularly in reference to the semiarid region of the médium San Francisco Irrigated area. To the improvement of the grape productivity is necessary the fertilizers application. Actually is recognized that the chitosan biopolymer has specific properties that display great potential for application to obtain various commercial products, especially due to its biocompatibility, biodegradability and reativity inerent to the aminic group. The chitosan may be applied in agriculture for plant protection against phytophatogenic agents. Assays “in vitro” were carried out with the aim to characterize and evaluate the effects of shrimp chitosan produced with different molecular weight (low, medium and high) against the pathogenic fungus Botrytis cinerea that promote the “Gray mold disease” on grape fruits. At the same time it was produced the bioprotector (P) from P and K rock biofertilizers mixed with organic matter inoculated with free living diazotrophic bacteria and with the fungi Cunninghamella elegans that produce the biopolymer chitosan that act increasing nutrient content and protect the plants against phitopatogens, and may be alternative furnishing nutrients and substitute the conventional fertilizers. In field experiments conductes at the Fine wine viniculture (Bottiecelli Company), were evaluated the effects of the bioprotector (P) in chemical soil attributes and in the grape yield, comparing the bioprotector effect (P) with the mineral soluble fertilizer (F). It was also evaluated the grape nutrition that constitute one of the most important factor that have influence on the yield parameter, especially for macronutrients. In a general way, the results showed that the bioprotector (P) may be alternative in substitution for conventional soluble fertilizers, because displayed great liberation of nutrients to the soil system and for the plants, and also present potential for antimicrobial use, in special against the Botrytis cinerea fungi that produce gray mold disease in grape fruits. / A uva Vitis labrusca contribui ativamente para o desenvolvimento sócioeconomico do País, em particular da região semiárido do médio São Francisco. Para incremento da produtividade da uva é necessário a aplicação de fertilizantes. É reconhecido, atualmente, que a quitosana possui propriedades específicas que mostram grande potencial para inúmeras aplicações em vários produtos comerciais, especialmente devido a sua biocompatibilidade, biodegradabilidade e reatividade do grupo amínico. A quitosana possa ser aplicada na agricultura com ação de proteção de planta contra agentes fitopatogênico. Ensaios in vitro foram realizados com o objetivo de caracterizar e avaliar os efeitos de quitosana de camarão com diferentes pesos moleculares (baixo, médio e alto) contra o fungo patogênico Botrytis cinerea causador da “podridão cinzenta” em frutos de uva. Paralelamente foi produzido o bioprotetor (P) a partir de biofertilizante de rochas em mistura com mais matéria orgânica inoculada com bactéria diazotrófica de vida livre e com Cunninghamella elegans que possui quitosana, biopolímero que atua fornecendo nutrientes e protege a planta contra fitopatógenos, podendo ser uma alternativa para substituição aos insumos convencionais. Em experimento de campo realizado na Vinícola Botticelli, procurou-se avaliar o efeito do bioprotetor (P) em atributos químicos do solo e na produtividade da uva, visando comparar o efeito de bioprotetor (P) e fertilizante mineral solúvel (F). Também foi avaliada a nutrição da videira que constitui um fator dos mais importantes para o desempenho produtivo, especialmente considerando os macronutrientes. De uma maneira geral, os resultados mostraram que o bioprodutor pode ser alternativo em substituição a fertilizantes convencionais solúveis, tendo em vista que mostrou maior liberação de nutrientes para o solo e para a planta, e também apresenta potencial para uso antimicrobiano, especialmente contra o fungo Botrytis cinerea causador da podridão cinzenta nos frutos da uva.

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