Les virus à tropisme respiratoire, tels que le rhinovirus, le virus respiratoire syncytial et le virus influenza A, ont pour cibles principales les cellules épithéliales bronchiques (CEB) et les cellules dendritiques (DC). Ces virus représentent la cause majeure des exacerbations de l’asthme de l’enfant. L’immunité innée et adaptative jouent un rôle essentiel dans la réponseantivirale et l’allergie. Au niveau bronchique, les CEB et les DC pulmonaires qui coopèrentactivement du fait de leur colocalisation, font partie des principaux acteurs de l’immunitéinnée. Le développement de la réponse immunitaire nécessite à la fois la mobilisation derécepteurs de reconnaissance impliqués dans l’endocytose, parmi lesquels les récepteursd’épuration ou SR, ainsi que des récepteurs de signalisation tels que les Toll-like receptors(TLR) qui coopèrent afin d’ajuster la réponse de l’hôte aux pathogènes. Au cours desinfections virales respiratoires, l’activation des CEB par les ARN double brin (ARNdb)viraux via le TLR3 et les hélicases à ARN constitue un élément clé de la réponse antivirale.Dans ce contexte, notre objectif a consisté à élucider les rôles respectifs du TLR3 et des SR del’épithélium bronchique dans les infections virales du tractus respiratoire et les mécanismescellulaires et moléculaires impliqués dans les exacerbations asthmatiques d’origine virale.L’expression des SR au niveau des CEB étant peu documentée, nous avons tout d’abord misen évidence l’expression de certains SR et leur régulation par le TNF-a. Cette expression estassociée à une internalisation des LDL acétylées, ligands de SR, et d’un ligand protéique:l’ovalbumine maléylée (OVAm) au niveau de l’épithélium bronchique, confirmant lafonctionnalité de ces récepteurs. L’ajout de différents ligands de SR permet de bloquerl’activation des CEB par les ARNdb viraux soulignant le rôle de corécepteur de ces SR. Cesligands de SR agissent en limitant la capture des ARNdb et en bloquant l’activation des voiesde signalisation dépendantes de NF-κB et d’IRF3. In vivo, l’administration de ligand de SRpermet d’inhiber l’action proinflammatoire de l’ARNdb et le développement de la réponseimmune, en limitant la migration des DC vers les ganglions lymphatiques drainants. D’autrepart, nous avons évalué les rôles respectifs des CEB, des DC myéloïdes (mDC) et de la voiede signalisation TRIF, dans un modèle murin d’exacerbation de l’asthme, par administrationd’ARNdb. Nous avons pu démontrer que cette administration induit l’exacerbation de laréaction allergique pulmonaire. L’utilisation de souris invalidées pour le gène trif a permis demontrer que la signalisation dépendante de TLR3/TRIF est indispensable à ce phénomèned’exacerbation de la réaction allergique pulmonaire. Le transfert de mDC dérivées de lamoelle osseuse exposées à l’ovalbumine et à l’ARNdb induit également l’exacerbation de laréaction allergique pulmonaire, soulignant le rôle majeur des mDC dans ce processus. Enfin,nous avons observé qu’en réponse à la stimulation par l’ARNdb, les CEB issues de sourissauvages participent au recrutement des mDC et des cellules inflammatoires via la productionde chimiokines.L’ensemble de ces travaux souligne le rôle des SR dans la réponse de l’épithéliumbronchique à l’ARNdb. Ces résultats permettent d’envisager l’implication de ces SR dans lesinfections virales. D’autre part, nos données révèlent le rôle clé de la voie de signalisationTLR3/TRIF dans un modèle murin d’exacerbation allergique pulmonaire d’origine virale.Elles soulignent également le rôle crucial des CEB qui participent au recrutement des mDC etdes cellules de l’inflammation. Ces observations laissent entrevoir de nouvelles approchesthérapeutiques visant à renforcer ou à contrôler une réponse immune antivirale. / Viral airway infections by rhinovirus, respiratory syncytial virus and influenza Avirus, mainly target airway epithelial cells and pulmonary dendritic cells (DCs). Theseinfections are the major cause of exacerbations associated with allergic asthma in children.Innate and adaptative immunity have an essential role in the antiviral response and allergy.The main actors in innate immunity of the lung include bronchial epithelial cells (BECs) andDCs, which actively cooperate. Induction of innate immune responses involves patternrecognition receptors (PRRs) implicated in endocytosis such as scavenger receptors (SRs) andsignalling receptors like Toll-like receptors (TLRs), which both cooperate to adjust theresponse to pathogens. During respiratory viral infections, BEC activation by double-strandedRNA (dsRNA) is linked to the mobilization of TLR3 and RNA-helicases and represents a keycomponent of the antiviral response.In this context, our aim was to elucidate TLR3 and SRs functions in BECs in respiratory viralinfections and cellular and molecular mechanisms implicated in asthma exacerbations.Since expression of SRs in BECs is not well-known, we have first demonstrated SRsexpression in these cells and their regulation by TNF-a. This increased expression is relatedwith a higher capacity to bind and to internalize SRs ligands such as acetylated LDL ormaleylated ovalbumin (mOVA). Addition of SRs ligands inhibits dsRNA-induced activation,showing that SRs act as coreceptors for TLR3 and RNA-helicases. Ligands of SRs are able toinhibit viral dsRNA binding and NF-κB and IRF3 signalling pathways. In vivo, administrationof SRs ligand allows to partially control proinflammatory effects of dsRNA and thedevelopment of the immune response by limiting DCs migration towards draining lymphnodes. Next, we defined the role of BECs, myeloid DCs (mDCs) and of the signallingpathways TRIF in a mouse model of lung allergic exacerbation based on the localadministration of dsRNA. Our data demonstrated that treatment with dsRNA induces lungallergic exacerbation. The use of trif -/- mice showed that the TLR3/TRIF pathway was criticalin lung allergic exacerbation induced by dsRNA. Intratracheal transfer of bone marrowdendritic cells (BMDC) primed with IL-4/dsRNA/ovalbumin in wild type mice reproducesexacerbation of the allergic reaction, whereas cells primed with dsRNA/ovalbumin have amore limited effect. These data show the importance of mDCs in this mechanism. The role ofairway epithelium is related to the dsRNA induced production of chemokines which isimplicated within mDCs and inflammatory cell recruitment towards the lung.All these data underline the important role of SRs in BECs response to dsRNA. Theseobservations allow to hypothesize the implication of SRs in infections by respiratory viruses.Moreover, our work reveals the key role of TLR3/TRIF pathway in exacerbation of theallergic reaction and the importance of BECs/mDCs crosstalk in these settings. Theseobservations suggest new therapeutic approaches in order to strengthen or to limit antiviralimmune response.

Les kinines sont des peptides exerçant des fonctions régulatrices au niveau cardiovasculaire et rénal, une activité pro-inflammatoire ainsi qu'un rôle important dans la perception de la douleur. Leurs effets dépendent de leur liaison à deux récepteurs à sept domaines transmembranaires couplés aux protéines G, soient les récepteurs Bi et B2 des kinines. Suivant leur activation, les récepteurs se distinguent grandement l'un de l'autre par les voies de désensibilisation et les partenaires moléculaires recrutés, et ultimement l'arrêt de leur signalisation. Les présents travaux de doctorat ont permis une meilleure compréhension de l'adaptation des récepteurs Bj et B2, grâce à l'utilisation de modèles cellulaires exprimant les récepteurs recombinants, de type sauvage ou fusionnés à un epitope myc ou à une protéine fluorescente verte. D'abord, l'utilisation d'agonistes peptidiques et non peptidique du récepteur B2 résistants au métabolisme permit un raffinement des connaissances sur les événements essentiels au niveau endosomal pour une réexpression du récepteur à la membrane, ainsi que sur les caractérisiques des interactions entre celui-ci et les

Le récepteur B1 des kinines (B1R) est une molécule de signalisation inductible, dont le rôle est de relayer le récepteur B2 des kinines, rapidement désensibilisé, dans des situations de stimulation prolongée inflammatoire ou nociceptive. Dans un premier temps, l'étude s'est portée sur la régulation positive de l'expression du B1R dans le muscle lisse vasculaire humain en culture, des stimulants déterminant son induction et des mécanismes les sous-tendant. Deux types de stimuli ont été identifiés, ceux qui stabilisent uniquement l'ARNm du B1R et ceux dont la stabilisation de l'ARNm est accompagnée d'une activation de sa transcription. Puis, l'induction du B1R fut étudiée chez le lapin, suite à des traitements aigus pro- et anti-inflammatoires ainsi qu'à un traitement chronique à un inhibiteur de l'enzyme de conversion de l'angiotensine I (IECA). Le traitement à l'IECA induisit une hausse légère de l'expression du B1R, plus subtile toutefois que celle observée dans d'autres modèles animaux.

En se basant sur les modèles de liaison de certaines hormones peptidiques à leur récepteur, nous avons suggéré que ces hormones pourraient être modifiées avec un cargo protéique fonctionnel. Nous avons généré des ligands biotechnologiques pour les récepteurs B₁ et B₂ de la bradykinine (B₁R et B₂R; BK) et pour le récepteur PTH₁R de la parathormone (PTH). Pour le récepteur PTH₁R, nous avons créé une protéine recombinante formée du tériparatide (PTH(1-34)) fusionné par son extrémité C-terminale à la protéine fluorescente verte (GFP). Pour le récepteur B₂R, la GFP a été fusionnée à l’extrémité N-terminale de la maximakinine (un analogue de la BK). Pour le récepteur B₁R, nous avons testé 7 protéines de fusion afin d’en identifier une avec une affinité d’ordre nanomolaire. Cette protéine, EGFP-S4P1, est basée sur la Lys-des-Arg⁹BK fusionné par son extrémité N-terminale à un spacer formé d’un dimère d’asparagine-glycine (NG)n lié à la GFP.

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Tableau d’honneur de la Faculté des études supérieures et postdoctorales, 2010-2011 / En liant la portion constante des IgGs, les récepteurs Fcy (FcyRs) participent à l'ingestion des pathogènes opsonisés et des complexes immuns. La régulation fine de cette fonction est requise pour éviter le développement de pathologies autoimmunitaires. Le neutrophile humain est un phagocyte particulier puisqu'il exprime constitutivement deux isoformes activateurs (FcyRIIa et FcyRIIIb), sans toutefois posséder l'isoforme inhibiteur (FcyRIIb). Cette particularité est à l'origine des deux projets présentés dans cette thèse. D'une part, nos travaux ont étudié la coordination des signaux entre les deux isoformes lors de la stimulation du neutrophile humain avec du zymosan opsonisé par des IgGs et avec des complexes d'IgGs aggrégées (HA-IgG). D'abord, une forte interdépendance entre les deux isoformes nécessaire aux fonctions de phagocytose et de production d'anion superoxyde ainsi que pour la génération du profil de phosphorylation sur résidus tyrosine a été observée. Cependant, un influx de calcium extracellulaire essentiel à la phagocytose a été attribué à l'engagement spécifique du FcyRIIIb. Ce rôle exclusif du FcyRIIIb s'avère dépendant de l'intégrité des domaines membranaires résistants aux détergents (DRMs) dans lesquels les deux isoformes sont co-recrutés à la suite de leur engagement. D'autre part, un nouveau mode de régulation de l'activation des FcyRs a été décrit, indépendant de l'inhibition par le FcyRIIb. Par l'entremise de l'ubiquitine-ligase c-Cbl, le FcyRIIa est poly-ubiquitinylé puis dégradé par le protéasome. Ce processus de régulation est contrôlé positivement par la protéine adaptatrice CIN85 de manière dépendante des PKCs classiques. Cette voie s'avère également dépendante de l'intégrité des DRMs, plateforme de colocalisation entre le FcyRIIa, c-Cbl et CTN85. En conclusion, ces travaux ont permis de comprendre la signification biologique de l'expression combinée du FcyRIIa et du FcyRIIIb et l'interdépendance entre ces deux isoformes, tant du point de vue de la signalisation intracellulaire que des fonctions qui en découlent. De plus, un nouveau mode de régulation est proposé pour pallier à l'absence de l'isoforme FcyRIIb sur le neutrophile humain et ainsi éviter l'activation exacerbée des fonctions du neutrophile humain dépendantes de l'engagement des FcyRs.

Les Récepteurs aux Rétinoïdes sont impliqués dans le développement et dans l’homéostasie cellulaire. Des altérations de leurs expressions ont été observées dans les cancers bronchiques. Cependant, les essais de chimioprévention utilisant les rétinoïdes dans des populations à risques ont échoué. Par conséquent, avant de procéder à de nouveaux essais cliniques utilisant des rétinoïdes de seconde génération, il apparaît nécessaire de mieux comprendre les mécanismes moléculaires impliqués dans la signalisation des rétinoïdes. Tel est ici notre objectif en présentant la validation d’outils de recherches destinés à l’étude de ces récepteurs, et en particulier à celle du Récepteur à l’Acide Rétinoïque ß, dont le rôle majeur dans le cancer du poumon est documenté. Des outils bioinformatiques ont été utilisés afin de reconstituer in silico l’organisation génomique de RARß. Les caractéristiques d’un promoteur potentiel P1’-RARß ont été étudiées expérimentalement. Des mesures spécifiques, réalisées dans des essais de qRT-PCR Syber Green et avec un triplex de sondes Taqman, ont été validées extensivement afin d’établir des valeurs de référence de l’expression ARNm des Récepteurs aux Rétinoïdes dans les cellules épithéliales bronchiques humaines normales. Les expressions relatives des différentes isoformes ARNm RRs ont ensuite été quantifiées dans des échantillons de tumeurs bronchiques ainsi que dans plusieurs lignées de cellules cancéreuses. Enfin, un anticorps reconnaissant toutes les isoformes protéiques RARß, a été conçu et validé extensivement par western-blot et immunoprécipitation. Aucune activité promotrice n’a pu être démontrée pour P1’-RARß. Une augmentation des quantités d’ARNm P2-RARß signe la différenciation normale de l’épithélium bronchique, alors qu’une diminution significative de ces ARNm est observée dans la plupart des lignées de cellules cancéreuses bronchiques. Une sous-régulation concomitante de RARß et RXRß a également été mise en évidence dans les tumeurs bronchiques. En utilisant des extraits nucléaires de cellules BEAS-2B et de cellules bronchiques normales, seule l’isoforme protéique longue RARß2 a été reconnue par notre anticorps. Un traitement rigoureux des échantillons ainsi qu’une analyse bioinformatique exhaustive sont les points clés de cette étude. Des valeurs ARNm de référence ainsi que des outils validés sont maintenant disponibles pour faire progresser la recherche sur le signal rétinoïde dans les cellules bronchiques. / Retinoid Receptors are involved in development and cell homeostasis. Alterations of their expressions have been observed in lung cancer. However, retinoid chemoprevention trials in populations at risk to develop such tumours have failed. Therefore, the pertinence of new clinical trials using second generation retinoids requires prior better understanding of the molecular mechanisms involved in the retinoid signalling. This is our aim when validating extensively research tools, focused on the Retinoic Acid Receptor ß, whose major role in lung cancer is documented. Biocomputing was used to draw in silico an updated RARß genomic organisation. Features of a putative P1'-RARß promoter were investigated experimentally. Specific measures realised, with qRT-PCR Syber Green assays and a triplex of Taqman probes, were extensively validated to establish Retinoid Receptors mRNAs reference values for normal human bronchial epithelial cells. Relative expressions of the different RRs mRNA isoforms were further quantified in lung tumour samples and in several cancer cell lines. Finally, an antibody recognising all the RARß protein isoforms, was generated and extensively validated by western-blot and immunoprecipitation. No promoter-like activity was found for P1'-RARß. P2-RARß mRNA increase signs the normal differentiation of the human bronchial epithelium while a significant decrease is observed in most lung cancer cell lines. Accordingly, it is also, along with RXRß, down-regulated in lung tumours. When using nuclear extracts of BEAS-2B and normal lung cells, only the P2-long RARß2 protein isoform was recognised by our antibody. Rigorous samples processing and extensive biocomputing, were the key factors for this study. mRNA reference values and validated tools are now available to advance researches on retinoid signalling in the lung.

L'objectif de cette thèse est de développer un instrument - récepteur hétérodyne à 600 GHz basé sur un mélangeur Schottky pour améliorer la sensibilité de la spectroscopie moléculaire en laboratoire, combiné avec l'analyse des molécules d'intérêt astrophysique.Le spectre de rotation de deux molécules organiques complexes d'intérêt astrophysique, 13C isotopologues du cyanure d'éthyle, 13CH313CH213CN et du méthoxyisocyanate, CH3ONCO, ont été étudiées dans les gammes de fréquences millimétrique et sub- millimétrique avec le spectromètre à balayage rapide du laboratoire PhLAM. Ces molécules seront recherchées à l’aide de radio télescopes tels que : celui de l’IRAM 30m, ALMA et NOEMA afin de détecter leur présence dans le milieu interstellaire. D'autre part, la spectroscopie moléculaire de laboratoire dans la gamme THz nécessite le développement instrumental pour améliorer les performances du spectromètre : sensibilité, résolution, précision, etc. Nous avons conçu, développé et testé un récepteur hétérodyne Schottky à 600 GHz avec le spectromètre à balayage rapide à PhLAM. / The objective of this PhD thesis is to develop an instrument - a 600 GHz Schottky heterodyne receiver for more sensitive molecular spectroscopy in the laboratory, combined with the analysis of the molecules of astrophysical interest.The rotational spectrum of two complex organic molecules of astrophysical interest, triple- 13C isotopologues 13CH313CH213CN of ethyl cyanide and methoxyisocyanate, CH3ONCO, have been studied in millimeter and sub-millimeter ranges with fast scan DDS spectrometer in PhLAM. These molecules will be searched by radio telescopes as IRAM 30m, ALMA and NOEMA in order to detect their presence in the interstellar medium. On the other hand, laboratory molecular spectroscopy requires the development in instrumentation that can improve the total performance of a spectrometer, its sensitivity, resolution, accuracy measurement etc. We have designed, developed a 600 GHz Schottky heterodyne receiver, and tested it with fast scan DDS spectrometer in PhLAM.

La leucémie lymphoïde chronique reste une pathologie incurable même si les nouveaux moyens thérapeutiques permettent d’obtenir des réponses de bonne qualité. Les déterminants idiotypiques des lymphocytes B représentent une cible idéale pour la génération de cellules T spécifiques dirigées contre le clone malin. Dans ce cadre, l’induction d’une réponse immunitaire efficace semble donc intéressante. L’objectif principal de cette étude était d’augmenter l’immunogénicité des cellules tumorales de LLC-B. Pour cela, la possibilité d'une activation de ces cellules par des agonistes de Toll-like récepteurs (TLRs) a été explorée. Tout d’abord, le profil d’expression protéique des TLRs a été recherché au niveau des lymphocytes B sains et pathologiques par cytométrie de flux. La mise en évidence d'une expression significative de TLR-7 et TLR-9 a ensuite permis d'analyser l’effet d'une stimulation par des ligands de ces TLRs par immunophénotyage, cytomorphologie, analyse de l’apoptose par la méthode TUNEL et étude de la prolifération par marquage CFSE. Le profil cytokinique des suspensions cellulaires stimulées ou non a également été examiné par cytométrie de flux. Enfin, une analyse fonctionnelle a été réalisée dans un modèle de stimulation allogénique afin de mesurer la capacité de ces cellules stimulées à activer des lymphocytes T naïfs. Les résultats obtenus montrent un profil d’expression des TLR-4, -7, -9 et -10 similaire pour les cellules B de LLC et les lymphocytes B sains avec toutefois une expression plus importante de TLR-9 dans les cellules tumorales. L’engagement de TLR-4 a pour conséquence une faible activation de HLA-DR sur les cellules B saines et tumorales. L’activation de TLR-7 via les plus fortes concentrations d'imiquimod R837 induit surtout une apoptose rapide et importante des cellules de LLC-B ainsi qu'une augmentation modérée de l'expression des marqueurs de costimulation et de présentation des cellules B saines et tumorales. La stimulation de TLR-9 via les ODN CpG entraîne une activation des cellules B saines et tumorales et protège les cellules tumorales de l'apoptose. Les profils cytokiniques des suspensions cellulaires ont montré que ces ligands de TLRs orientent les réponses cellulaires vers un profil pro-inflammatoire, éventuellement propice à la génération de réponses cellulaires, potentiellement anti-tumorales via la production d'IL-8 et de TNF. Enfin, il est apparu que les cellules amygdaliennes et tumorales stimulées avec les ODN CpG n'étaient pas capables d'activer des lymphocytes T naïfs allogéniques, ce qui pourrait être lié à la faible production d'IL-2 ou à la production d'IL-10 par ces cellules. En conclusion, TLR-7 et TLR-9 représentent des cibles thérapeutiques intéressantes dans le traitement de la LLC-B. L’imiquimod R837 pourrait aider à la clairance tumorale dans les LLC-B. L’activation cellulaire induite par via les ODN CpG M362 pourrait par contre être utilisée pour augmenter le potentiel de cellules présentatrices d’antigènes des cellules B de LLC à condition de parvenir à contrecarrer l'environnement tolérogène et à différencier les cellules B en cellules activatrices de réponses Th1 et cytotoxiques. / thesis

Le laboratoire d’accueil a identifié la chémérine, une protéine de 16 kDa encodée par le gène Tig2, comme le ligand endogène du récepteur ChemR23. Cette molécule chimioattractante pour différentes populations leucocytaires est présente en abondance dans divers échantillons pathologiques d’origine inflammatoire. La chémérine est produite sous la forme d’un précurseur inactif, la prochémérine, qui nécessite pour devenir active le clivage protéolytique de 6 ou 7 acides aminés à son extrémité carboxy-terminale. En plus de ChemR23, la chémérine est capable de se lier avec une haute affinité à deux autres récepteurs, GPR1 et CCRL2, mais la signalisation induite par GPR1 est très modeste et elle est absente pour CCRL2. Plusieurs études ont décrit une forte diminution de l’expression de la chémérine dans diverses tumeurs solides humaines telles que le mélanome et les cancers du poumon, de la prostate, du sein et du colon, et cette diminution est corrélée au grade de la tumeur. Nous avons également observé que les souris déficientes pour ChemR23 développaient des tumeurs spontanées sur des zones de peau sujettes à des lésions chroniques.Compte tenu de ces éléments, nous avons étudié le rôle de la chémérine et de ses récepteurs dans la tumorigenèse. Nous avons tout d’abord généré et caractérisé un nouveau modèle murin dans lequel une forme bioactive de chémérine est surexprimée dans les kératinocytes. Dans cette lignée transgénique, l’expression de chémérine est restreinte aux couches basales de la peau et des épithéliums malpighiens de la bouche, l’œsophage et les sinus, et des taux élevés de chémérine ont été retrouvés dans le sang. Nous avons ensuite étudié l’effet de l’expression de la chémérine dans divers modèles de développement tumoral. Dans des modèles de greffe de lignées tumorales établies (mélanome B16 et carcinome pulmonaire de Lewis, LLC), la surexpression de chémérine, par les cellules tumorales ou par les kératinocytes, a ralenti la croissance tumorale, démontrant que l’effet anti-tumoral de la chémérine est indépendant du site d’expression. Un modèle de carcinogenèse chimique basé sur l’application topique de DMBA et TPA, plus proche de l’évolution naturelle d’une tumeur à travers ses différents stades, a également été utilisé. Dans ce modèle, nous avons montré que la chémérine présente de puissantes propriétés anti-tumorales, en induisant un retard dans l’apparition des papillomes, une diminution du nombre de papillomes et un ralentissement de leur progression vers des formes agressives. En limitant l’expression de chémérine à des périodes limitées du protocole, nous avons établi que cet effet protecteur était limité aux stades tardifs de la tumorigenèse. En parallèle, le rôle des différents récepteurs liant la chémérine a été étudié dans ces divers modèles de développement tumoral, en utilisant des lignées de souris invalidées pour chaque récepteur, en combinaison ou non avec la surexpression de chémérine par les cellules tumorales ou par les kératinocytes. Nous avons montré que l’activité anti-tumorale de la chémérine est essentiellement dépendante de ChemR23 dans tous les modèles, mais que GPR1 contribuait également à cet effet dans certains d’entre eux. Quant à CCRL2, son invalidation retarde la croissance des tumeurs B16 et LLC, mais accélère le développement tumoral dans le modèle DMBA/TPA. Ces effets sont attribués à une modification de la distribution et la biodisponibilité de la chémérine entre les différents tissus. Les effets de l’absence de CCRL2 sont abolis chez les souris invalidées pour ChemR23, démontrant qu’ils sont médiés par la chémérine et son principal récepteur ChemR23.Enfin, nous avons étudié les populations cellulaires potentiellement impliquées dans l’effet anti-tumoral de la chémérine. Etonnamment, nous n’avons observé aucune modification dans le recrutement de populations leucocytaires au sein des tumeurs dans les différents modèles où un effet anti-tumoral est observé. L’utilisation de souris sévèrement immunodéficientes a confirmé que les défenses immunitaires n’étaient pas impliquées dans les effets induits par la chémérine. Il a par contre été observé que l’expression de chémérine ou l’invalidation de CCRL2 dans les modèles de croissance tumorale augmente fortement le caractère hypoxique et nécrotique des tumeurs, et s’accompagne d’une diminution de la vascularisation. L’étude du transcriptome de ces tumeurs a confirmé l’existence d’une signature hypoxique ainsi qu’une régulation négative de l’expression de gènes décrits comme constituant une signature d’angiogenèse tumorale. Nous avons également montré que la chémérine provoquait une diminution de l’interaction entre cellules endothéliales et péricytes dans des contextes tumoraux (greffe de cellules B16 et LLC) et non tumoraux (implants de matrigel), suggérant que la néoangiogenèse inefficace résulte d’un manque de maturation et de stabilisation des néovaisseaux. En conclusion, notre étude a permis de mettre en évidence le rôle antitumoral de la chémérine et de ses récepteurs dans divers modèles de développement tumoral in vivo, suggérant ainsi que des agonistes de ChemR23 pourraient constituer des agents thérapeutiques potentiels pour le traitement de tumeurs solides chez l’homme. / Doctorat en Sciences biomédicales et pharmaceutiques (Médecine) / info:eu-repo/semantics/nonPublished