Made available in DSpace on 2016-06-02T19:29:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseAJM.pdf: 1132829 bytes, checksum: d7a4ea748d124c0e0dddf18933cbad53 (MD5) Previous issue date: 2003-04-29 / Universidade Estadual de Maringá / Genetic and chemical variability of Maytenus ilicifolia Maytenus ilicifolia is a native plant of Southern Brazil commonly used as a popular medicine for indigestion, gastritis and ulcers. The large use of this plant has increased the degradation of the species, and thus it is presently included in FAO´s list for priority species for studying and conservation in South America. In this context, this work aimed to contribute with studies that help the conservation of this species. Initially, a survey in herbaria and in the field was performed to identify the incidence and distribution of the genus Maytenus in the State of Rio Grande do Sul. Three new species (M. glaucenscens Reiss, M. gonoclada Mart. and M. robusta Reiss) were found in this State. The genetic variability study of three populations showed that the intrapopulational variation (variance from 0.102 to 0.140) is higher than the interpopulational (variance between 0.076 and 0.099%). The three populations analyzed grouped themselves with low significance level and 7.6% of the present alleles are rare. The genetic variability study involving 18 native populations of Maytenus ilicifolia, Maytenus aquifolia and Maytenus evonymoidis demonstrated that the species may be separated with 100% of confidence, and that M. ilicifolia and M. aquifolia are genetically more similar. The populations of Maytenus ilicifolia analyzed formed three groups with low confidence levels. Group I included the populations of Ponta Porã, group II the populations of Santana do Livramento, Vale Verde, Canguçu and Unistalda, and group III was formed by the other 13 populations. A similarity in the genetic and environmental grouping of such species was observed. The chemical characterization was performed by gas chromatography of the extracts obtained with high pressure CO2. An increase in the yield of extract was obtained when the temperature of extraction as well as the solvent density were increased. The compounds that presented higher yield in the first fractions were dodecanoic acid, geranyl acetone, phytol, squalene, vitamin E and stigmast-5-enol. The compounds friedelan-3-ol and friedelin were extracted in higher yields in the following fractions. The chemical variability study of the volatile and semi-volatile compounds of populations of M. ilicifolia showed a yield of extract (0,488 a 0,976 %) significantly different between the populations. In addition no relation between the chemical and environmental or between the chemical and genetic grouping could be established. / Maytenus ilicifolia (espinheira-santa) é uma planta nativa da região sul do Brasil empregada na medicina popular para tratamentos de indigestão, úlceras e gastrites. A ampla utilização de Maytenus ilicifolia na medicina popular, tem levado à perda de populações da espécie, encontrando-se atualmente na lista da FAO como uma das espécies prioritárias para estudo e conservação na América do Sul. Neste sentido, o presente trabalho teve como objetivo realizar estudos que subsidiem protejos de conservação desta espécie. Inicialmente foi realizado um levantamento em herbários e a campo, verificando a ocorrência e distribuição do gênero Maytenus no estado do Rio Grande do Sul, sendo encontradas três novas espécies: M. glaucescens Reiss, M. gonoclada Mart. e M. robusta Reiss. No estudo da variabilidade genética em três populações, a variação intrapopulacional (0,102 a 0,140) é superior à interpopulacional (0,076 a 0,099). As três populações analisadas se agruparam com baixos valores de significância e 7,6% dos alelos presentes são raros. No estudo da variabilidade genética envolvendo 18 populações nativas de Maytenus ilicifolia e plantas de Maytenus aquifolia e Maytenus evonymoidis, pode-se separar as espécies com 100% de confiança e M. ilicifolia e M. aquifolia estão mais próximas geneticamente em relação a M. evonymoidis. As populações de Maytenus ilicifolia analisadas formaram 3 grupos com valores baixos de índice de confiança baixos, sendo o grupo I a população de Ponta Porá, o grupo II as populações de Santana do Livramento, Vale Verde, Canguçu e Unistalda e o grupo III formados pelas 13 populações restantes. Observou-se semelhança no agrupamento genético e ambiental destas populações. No estudo da caracterização química, via cromatografia gasosa dos extratos obtidos por CO2 a alta pressão, observou-se um acréscimo na eficiência de extração com aumento de temperatura e densidade do solvente. Os compostos ácido dodecanóico, geranil acetona, fitol, Esqualeno, Vitamina E e Stigmast-5-enol foram extraídos em maior concentração nas primeiras frações, independente das condições de extração, enquanto que os compostos Friedelan-3-ol e Friedelin, foram extraídos em maior quantidade nas frações seguintes. Na análise da variabilidade química dos compostos voláteis e semi-voláteis das populações de Maytenus ilicifolia ). Verificou-se no rendimento de extrato (0,488 a 0,976 %) e concentração dos compostos analisados diferenças significativas entre as populações analisadas e não houve relação entre o agrupamento químico das populações com os agrupamentos ambientais e genéticos.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:30:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseRLC.pdf: 1717916 bytes, checksum: a24259cd3e84bb299a7f0093b50f8ad8 (MD5) Previous issue date: 2003-04-29 / Universidade Estadual de Maringá / Ilex paraguariensis, known as mate tea, is processed in many ways and commercialized as tea, soluble powder, essences, and processed leaves for preparation of mate tea without sugar ( chimarrão and tererê ). Aiming the conservation of this species, this work studied the intra- and interpopulational genetic variabilities of I. paraguariensis and its volatiles and semi-volatiles composition in 20 populations inside the area of incidence of this species in Brazil. Paternity tests were also performed to identify a favorable crossing for obtaining lineages with the characteristics of interest, reducing then the impact of extractive harvest on the native plants. Genetic variability of I. paraguariensis analyzed by RAPD markers (Random Amplified Polymorphic DNA) is lower to the reported variability in other dioic arboreal species. Intrapopulational variability is higher than interpopulational in this species. In intra and interpopulational studies alleles with the same allele sequence were identified, as well as alleles with very different sequences, what evidences the incidence of genetic flux among populations that are close geographically, but with alleles specific of each population. The environmental differences taken into account were not enough to explain genetic and chemical differences found among the populations. These results show the possibility of influences of microenvironmental factors and non-analyzed genes in the analyzed chemical composition of mate tea leaves. The population of Ponta Porã, geographically separated from the others, proved to be genetically distinct. Species-specific fragments were obtained for I. paraguariensis, I. dumosa and I. theezans. However, more studies for confirmation and utilization of such fragments must be carried out. The differences in the volatiles and semivolatiles composition among the populations turned their separation possible, and may be useful for identification and inclusion of genotypes, superior in specific compounds, in germoplasm collections. For conservation of this species in germoplasm collections ex situ, material collecting must be based on genetic analysis, as well as on geographical distribution, due to the higher intrapopulational variability and occurrence of rare alleles in the species. The RAPD technique may be used for paternity identification, mainly in arboreal species, making possible to obtain genetic improvement by performing controlled crossings. Based on these results, it was possible the discussion concerning the conservation aspects of this species. / Ilex paraguariensis, mais conhecida como erva-mate, é beneficiada por diversas formas e comercializada como chá, pó solúvel, essências e erva para chimarrão e tererê. Visando sua conservação, foram estudadas sua variabilidade genética intra e interpopulacional e sua composição química em 20 populações na área de ocorrência da espécie no Brasil. Também foram realizados testes de paternidade para identificação de um cruzamento favorável à obtenção de progênies com características de interesse, objetivando reduzir o impacto sobre ervais nativos causados pelo extrativismo. A variabilidade genética analisada por marcadores moleculares RAPD (polimorfismo de DNA amplificado ao acaso) em I. paraguariensis é inferior à variabilidade reportada em outras espécies arbóreas dióicas. A variabilidade intrapopulacional é maior que a variabilidade interpopulacional nesta espécie. Em estudos intra e interpopulacionais identificaram-se alelos com mesma freqüência alélica e alelos com freqüências bastante distintas, evidenciando a ocorrência de fluxo gênico entre populações próximas geograficamente, porém com alelos característicos de cada população. As diferenças ambientais consideradas não foram suficientes para explicar as diferenças genéticas e químicas encontradas entre as populações, demonstrando a possibilidade de haver interferências micro-ambientais e de genes ainda não analisados, influenciando na composição química da erva-mate. A população de Ponta Porã, separada geograficamente das demais, mostrou-se distinta geneticamente. Fragmentos espécie específicos foram obtidos para I. paraguariensis, I. dumosa e I. theezans, porém requerendo mais estudos neste sentido para confirmação e utilização destes. As diferenças nas análises dos compostos voláteis e semi-voláteis entre as populações, permitiram a separação destas e podem ser úteis para a identificação e inclusão de genótipos superiores em determinados compostos em bancos de germoplasma. Para a conservação desta espécie em bancos de germoplasma ex situ a coleta de materiais deve ser baseada em análises genéticas, além da distribuição geográfica, devido à maior variabilidade intrapopulacional e ocorrência de alelos raros na espécie. A técnica de RAPD pode ser utilizada para a identificação de paternidade, principalmente em espécies arbóreas, podendo-se obter ganhos genéticos com a condução de cruzamentos controlados. Os resultados obtidos embasaram discussões sobre aspectos de conservação desta espécie.