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Étude physiologique et métabolique de la production de la flocculosine chez pseudozyma flocculosa

Hammami, Walid 17 April 2018 (has links)
Le champignon Pseudozyma flocculosa a été particulièrement étudié pour son activité biologique contre le blanc (Érysiphales). Par génie génétique, un glycolipide à activité antifongique, la flocculosine, a été isolé et caractérisé. Bien que le spectre d'activité de cette molécule ait été identifié, les conditions in vitro et in vivo dans lesquelles ce composé est synthétisé ne sont pas encore élucidées. La première partie de ce travail consistait à déterminer les besoins nutritionnels de P. flocculosa ainsi que les paramètres jouant un rôle primordial dans la synthèse de la flocculosine. Suite à cette étude, nous avons pu atteindre une productivité de 15 g/1 de flocculosine et définir certains éléments influençant la synthèse de la molécule. En bref, la disponibilité d'une source de carbone et l'ajout de l'extrait de levure sont apparus comme les deux principaux facteurs ayant un impact majeur sur la synthèse du glycolipide. Dans la deuxième partie de ce projet, nous nous sommes intéressés à l'investigation des changements métaboliques corrélés à la synthèse de la flocculosine. Pour ce faire, nous avons effectué une étude protéomique dans deux conditions de production différentes (inductrice et répressive). La comparaison des deux profils protéomiques a montré une diminution drastique du nombre total des protéines suggérant que le champignon produit cette molécule pour contourner le déséquilibre métabolique provoqué par la condition de stress. Enfin, nous avons tenté de déterminer le rôle exact de la flocculosine dans le cadre de la relation tritrophique plante-agent pathogène-P. flocculosa. Nous avons suivi en particulier l'expression du gène cypl, impliqué dans la synthèse de cette molécule, lorsque P. flocculosa était soumis à différentes conditions environnementales. Cette étude nous a permis de conclure que P. flocculosa synthétisait la flocculosine in vivo en réponse aux disponibilités variables des substrats à la surface de la feuille.

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