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Schistosoma mansoni (Trematoda: Digenea) Sambom, 1907: diagnóstico ultraestrutural e laboratorial

João, Roberto Carlos Ferreira January 2011 (has links)
Submitted by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2013-02-19T17:12:31Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO COMPLETA Final-2011.pdf: 13824393 bytes, checksum: c510c0328a108faa0f62ed4228a0215f (MD5) / Made available in DSpace on 2013-02-19T17:12:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO COMPLETA Final-2011.pdf: 13824393 bytes, checksum: c510c0328a108faa0f62ed4228a0215f (MD5) Previous issue date: 2011 / A esquistossomose é uma das parasitoses mais prevalentes no mundo e o Schistosoma mansoni Sambon, 1907 é o trematódeo agente da esquistossomose intestinal, endêmica em países da América do Sul, África, Oriente Médio e Caribe. Em Angola, os primeiros dados da esquistossomose foram registrados em 1897 na província do Bengo, mas a prevalência do S. mansoni é, no entanto pouco notificada. No âmbito da cooperação internacional Fiocruz (Brasil)-Fesa (Angola) que visa capacitar no Brasil profissionais da área de Saúde de Angola, este trabalho está voltado para estudos sobre a caracterização ultraestrutural e diagnóstico laboratorial do S. mansoni. Os objetivos incluíram: estudar a topografia de adultos de S. mansoni; caracterizar os tubérculos do tegumento do macho por microscopia eletrônica de varredura, de transmissão e por microscopia a laser confocal; descrever um método alternativo para exame de fezes, baseado no princípio de Kato-Katz, utilizando o fixador SAF e comparar o método Kato-Katz utilizado para o diagnóstico da esquistossomose com o método alternativo. A topografia dos machos evidenciou a presença de tubérculos na superfície dorsal do corpo que em cortes ultrafinos aparecem como evaginações tegumentares que abrem espaço entre as fibras musculares elevando as membranas basal e apical. Entre estas membranas que revestem os tubérculos, há vesículas eletrondensas, eletronlúcidas e corpos alongados. As vesículas formadas na região interna do tegumento, próximo ao núcleo das células são encontradas nos canais citoplasmáticos que chegam à superfície externa do sincício. Os espinhos dos tubérculos aparecem sobre a membrana basal, próximos às vesículas eletrondensas. No tegumento há organelas sensoriais contendo bulbo basal e projeção apical com cílio e corpos basais. O canal ginecóforo apresenta espinhos pequenos, uniformes e organelas sensoriais uniciliadas. A camada entre a membrana basal e a apical é mais homogênea e os espinhos aparecem de forma uniforme no tegumento sem a formação de tubérculos. Utilizando o diagnóstico laboratorial pelo Kato-Katz não foi possível visualizar os ovos no momento da montagem da lâmina (0h), mas a incidência de visualização aumentou em 24h. Na técnica modificada do SAF, os ovos foram identificados imediatamente e a visualização diminuiu ao longo do tempo. Comparando em função do tempo, as médias da análise de ovos por grama de fezes (OPG) das três infecções nas duas técnicas, observou-se que o número de ovos encontrados com a técnica de SAF (0h) foi maior em 7,7% do que com Kato-Katz (24 h). Não houve diferença significativa entre os resultados obtidos com SAF (0h) e Kato-Katz (24 h). O mesmo resultado foi verificado com 12 horas para as duas técnicas. No segundo experimento o OPG pelo SAF (1h) foi 13,1% maior do que Kato-Katz (24h) de leitura. Comparando os resultados obtidos nas duas técnicas com 24 h de leitura, o OPG foi 32,5% maior na técnica de Kato-Katz do que SAF. O método experimental baseado no fixador SAF é eficiente para diagnóstico laboratorial alternativo, simples, rápido, de baixo custo e eficiente para o diagnóstico de esquistossomose mansônica. Este estudo trará novos avanços no diagnóstico desta doença em Angola. / Schistosomiasis is one of the most prevalent parasitic diseases in the world and the trematode Schistosoma mansoni Sambon, 1907 is the agent of intestinal schistosomiasis, endemic in countries of South America, Africa, Middle East and the Caribbean. In Angola, the infection was first recorded in 1897 in the Bengo province, however the prevalence of S. mansoni remains underestimated. In the framework of an international cooperation between Fiocruz (Brazil)-Fesa (Angola), which aims to train health professionals from Angola in Brazil, this work is focused on ultrastructural studies and laboratory diagnosis of S. mansoni. The objectives included: to study the topography of adult S. mansoni; to characterize the tubercles of the tegument of the male by scanning and transmission electron microscopy and laser confocal microscopy; to describe an alternative method for stool examination, based on the principle of Kato-Katz method, using the SAF fixative, and compare the Kato- Katz method used for the diagnosis of schistosomiasis with the alternative method. The topography of the males showed the presence of tubercles on the dorsal surface of the body that in ultrathin cuts appear like tegumentary evaginations that interweave between the muscle fibers raising the basal and apical membranes. Between these membranes that cover the tubercles, there are electrondense and electronlucid vesicles, and elongated bodies. The vesicles formed in the inner region of the integument near the cell nucleus are found inside the cytoplasmic channels reaching the outer surface of the syncytium. The spines of the tubercles emerge over the basal membrane, near the electrondense vesicles. The integument has sensory organelles containing a basal bulb and apical projection with cilium and basal bodies. The ginecoforous channel presents uniform small spines, and uniciliate sensory organelles. The layer between the basal and apical membrane is more homogeneous with spines appearing evenly, without forming tubercles. The laboratory diagnosis using the Kato-Katz method was not successful to show the eggs at time (0h), but the display increased at 24h after the sampling. The modified technique of the SAF, showed the eggs immediately and display decreased over time. Comparing both methods by time, the mean number of eggs per gram of feces (EPG) by two techniques of the three infections, we found that the number of eggs found with the technique of SAF (0h) was higher by 7.7% than with Kato-Katz (24 h). There was no significant difference between the results obtained with SAF (0h) and Kato-Katz (24 h). The same result was observed for 12 hours with both techniques. In the second experiment, the EPG by SAF (1h) was 13.1% higher than Kato-Katz (24h). Comparing the results of the two techniques with 24 hours of sampling, the EPG was 32.5% higher in the Kato-Katz technique than SAF. The experimental method based on the SAF fixative is an efficient alternative for laboratory diagnosis, being simple, fast, inexpensive and efficient for the diagnosis of schistosomiasis. This study will bring new advances in the diagnosis of this disease in Angola.

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