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Estudo da expressão de MMP-2 e MMP-9 por fibroblastos gengivais de camundongos estimulados por NaF via NF-kB, p44/42, p38 e PI3K /

Tiano, Gilberto Carlos. January 2007 (has links)
Orientador: Sandra Helena Penha de Oliveira / Banca: Marília Afonso Rabelo Buzalaf / Banca: Carlos Ferreira dos Santos / Resumo: O declínio mundial da cárie dentária é atribuído ao uso abrangente do flúor. Embora esse elemento seja capaz de proteger os dentes, seu uso excessivo pode levar a uma ação citotóxica causando a inibição do crescimento celular, da síntese de proteínas e até mesmo a morte celular. O primeiro objetivo deste estudo foi investigar a concentração ideal do NaF (NaF) capaz de ativar os fibroblastos gengivais de camundongos sem induzir morte celular. Observou-se que, nesses fibroblastos, a concentração de 40 μg F/mL induziu morte celular de 62,6 %. Na concentração de 20 μg F/mL a morte celular foi de apenas 22,1%. Com base nesses resultados, optou-se por utilizar a concentração de 20 μg F/mL como dose máxima para investigar os mecanismos envolvidos na ativação dos fibroblastos gengivais. Dessa forma, avaliou-se a capacidade do NaF induzir a expressão de MMP-2 e MMP-9 pelos fibroblastos gengivais de camundongos na presença ou ausência de LPS, assim como a produção da quimiocina CCL-3/MIP-1α e óxido nítrico. Avaliou-se também a participação das vias de sinalização intracelular p44/42, p38, PI3K e NF-кB envolvidas durante essa ativação, por meio da utilização dos respectivos inibidores PD98059 (50 μM), SB202190 (10 μM), LY294002 (30 μM) e dexametasona (10 μM). Observou-se que o NaF foi capaz de estimular os fibroblastos gengivais a expressarem MMP-9, mas não MMP-2, na concentração de 20 μg F/mL com pico máximo 6 horas após, retornando aos níveis normais 24 horas após. A produção da quimiocina CCL3/MIP-1α pelos fibroblastos estimulados pelo NaF também foi observada com a concentração de 20 μg F/mL com pico máximo 6 horas após estímulo. Na presença de LPS, observou-se uma potenciação da expressão de MMP-9 e produção de CCL3/MIP-1α na concentração de 20 μg F/mL, 6 horas após. / Abstract: The worldwide decline of the dental caries is attributed to the widespread use of fluoride. Although this element is capable of protecting the teeth, its excessive use, can lead to a cytotoxic action, causing an inhibition of the cell growth, of the protein synthesis and even the cellular death. Based on these results, we have chosen to use a concentration of 20 μ g F/mL as maximum concentration to investigate the mechanisms involved in the activation of the gingival fibroblasts. It was observed that, on those fibroblasts, the concentration of 40 μg F/mL has resulted in a death cellular index of 62.6%. In the concentration of 20 μg F/mL the cellular death was of 22.1% only. Based on these results, the concentration of 20 μg F/mL has been chosen as maximum concentration to investigate the mechanisms involved in the activation of the gingival fibroblasts. Later, the ability of NaF to induce the expression of MMP-2 and MMP-9 in gingival fibroblasts of mice in the presence or absence of LPS has been assessed, as well as the production of chemokine CCL-3/MIP-1a and nitric oxide. It also evaluated the participation of intracellular signaling pathways p44/42, p38, PI3K e NF-kB involved in this activation, through inhibitors PD98059 (50 μM), SB202190 (10 μM), LY294002 (30 μM) e dexamethasone (10 μM). It was observed that the NaF was capable to stimulate the gingival fibroblasts to express MMP-9, at the concentration of 20 μgF/mL with maximum peak 6 hours after, returning to normal levels 24 hours after. The expression of MMP-2 was not observed. The production of chemokine CCL3/MIP-1α was also observed with the concentration of 20 μgF/mL with maximum peak 6 hours after the stimulation. In the presence of LPS, it was observed an intensification in the expression of MMP-9 and also in the production of CCL3/MIP-1α at the concentration of 20 μgF/mL, 6 hours later. / Mestre
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Efeito do ácido zoledrônico usado no tratamento de dentes reimplantados tardiamente : estudo em ratos /

Miessi, Daniela Maria Janjacomo. January 2009 (has links)
Orientador: Graziela Garrido Mori / Banca: Sônia Regina Panzarini Barioni / Banca: Marco Antonio Húngaro Duarte / Resumo: O uso de substâncias que inibem a reabsorção radicular pode ser uma alternativa para o controle da reabsorção radicular, principalmente em casos de insucesso de reimplantes dentários. Frente a isso, este trabalho teve como objetivo avaliar o ácido zoledrônico, um inibidor da reabsorção, como medicação para o tratamento da superfície radicular para dentes reimplantados tardiamente. Vinte e quatro incisivos centrais superiores direitos de ratos foram avulsionados e mantidos a seco por 30 minutos. Todos os dentes tiveram o ligamento periodontal removido mecânicamente. Na seqüência, os dentes foram divididos em dois grupos. No grupo I, a superfície radicular foi tratada com solução de ácido zoledrônico a 10-6M por 20 minutos; no grupo II, foi usado o fluoreto de sódio a 2% fosfato acidulado, por 20 minutos. Todos os canais foram preenchidos com pasta de hidróxido de cálcio. Após esse procedimento, os dentes foram reimplantados em seus respectivos alvéolos. Passados 15 e 60 dias do reimplante, os animais foram eutanasiados e as peças obtidas, processadas em laboratório para análise microscópica e morfométrica. Os resultados demonstraram que o ácido zoledrônico foi eficiente para o tratamento da superfície radicular. Apesar da ausência de formação de um tecido à semelhança do ligamento periodontal, o ácido zoledrônico foi eficaz em retardar a reabsorção radicular. / Abstract: The use of substances that inhibit root resorption may be an alternative for cases of unsuccessful tooth reimplanted. Hence, the purpose of this study was to test the zoledronic acid, a resorption inhibitor, as an intracanal therapeutic agent for teeth submitted to late reimplantation. Twenty-four rat maxillary right central incisors were avulsed and kept dry for thirty minutes. The periodontal ligament were removed mechanically with aid of blade. Thereafter, the teeth were divided in two groups. In group I, the root surfaces was treated with 10-6M solution of zoledronic acid for 20 minutes; in group II, 2% sodium fluoride was used for 20 minutes. The canals were filling with calcium hydroxide paste. Teeth were then reimplanted in their respective socket. The animals were killed at 15 and 60 days after reimplantation and the samples processed for morphometric and microscopic analysis. The results showed that the zoledronic acid limited the root resorption. Although the absence of formation of periodontal tissue-like, zoledronic acid was efficient for restricted to root resorption. / Mestre
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Efeito do laser de Nd:YAG do fluoreto de sódio na prevenção da erosão em dentina bovina através de perfilometria /

Mollica, Fernanda Brandão. January 2011 (has links)
Resumo: Este estudo avaliou, através de perfilometria, a influência do laser de Nd:YAG, do verniz de flúor e da associação de ambos na perda de estrutura dentinária após 5 dias de desafio erosivo e após 7 dias de armazenamento em saliva artificial. Sessenta blocos de dentina bovina foram incluídos em resina acrílica, polidos e limpos em ultra-som. Cinco grupos (n=12) foram obtidos: C (controle); F (verniz NaF 5% por 6h); L (laser Nd:YAG: 1 W, 100 mJ, 10 Hz, 30 s, 124,37 J/cm2); LF (laser + verniz NaF); FL (verniz NaF + laser). Previamente aos tratamentos, metade da superfície foi protegida com fita para seladora e, após, realizou-se o desafio erosivo (ácido cítrico, 2 x 15 min/dia, 5 dias). A perfilometria foi realizada em três etapas: 1- após tratamento superfície; 2- após 5 dias de desafio erosivo; 3- após 5 dias de desafio erosivo + 7 dias de armazenamento. O objetivo da etapa 1 foi determinar a perda de estrutura pós-tratamento de superfície. Uma fatia de dentina adicional de cada grupo foi confeccionada para a realização de análise de Espectroscopia por Energia Dispersiva de Raio-x e de Microscopia Eletrônica de Varredura de cada etapa. Os dados de perfilometria das Etapas 2 e 3 foram analisados estatisticamente através de ANOVA de medidas repetidas dois fatores e Teste de Tukey (p<0,05). As médias de perda de estrutura dentinária na etapa 2, em μm, foram: F (5,50 bcd) >C (4,33 d) >FL (3,46 de) =LF (3,13 de) >L (1,45 e). Na etapa 3, foram: F (8,59 a) = FL (8,19 a) > LF (7,45 ab) >C (6,78 abc) >L (4,35 cd). Concluiuse que: a) após o desafio erosivo, todos os tratamentos reduziram a perda dentinária, exceto o verniz de flúor; b) após o desafio erosivo seguido de 7 dias de armazenamento, todos os tratamentos perderam a efetividade, exceto o laser de Nd:YAG; c) nenhum dos tratamentos deteve a perda de cálcio e fósforo por erosão; d) todos os tratamentos ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study evaluated, by profilometry, the influence of Nd:YAG laser, fluoride varnish and the combination of both in the dentin structure loss after 5 days of erosive challenge and after 7 days storage in artificial saliva. Sixty bovine dentin blocks were embedded in acrylic resin, polished and cleaned in ultrasound. Five groups (n = 12) were obtained: C (control), F (5% NaF varnish for 6h), L (Nd:YAG laser: 1 W, 100 mJ, 10 Hz, 30 s, 124,37 J/cm2), LF (laser + NaF varnish ), FL (NaF varnish + laser). Prior to treatment, half of the surface was protected with sealing tape and, after, the erosive challenge was performed (citric acid, 2 x 15 min/day, 5 days). The profilometry was performed in three steps: 1- after surface treatment, 2- after 5 days of erosive challenge; 3- after 5 days of erosive challenge + 7 days of storage. The objective of step 1 was to determine the structure loss after surface treatment. An additional dentin slice of each group was prepared to perform Energy Dispersive Spectroscopy x-ray analysis of and Scanning Electron Microscopy for each step. Profilometry data of steps 2 and 3 were analyzed with two-way ANOVA for repeated measures and Tukey test (p <0.05). The dentin structure average loss in step 2, in μm, were: F (5.50 bcd)> C (4.33 d)> FL (3.46 de) = LF (3.13 de)> L (1.45 e). In step 3, the average loss were: F (8.59 a) = FL (8.19 a)> LF (7.45 ab)> C (6.78 abc)> L (4.35 cd). It was concluded that: a) after erosive challenge, all treatments reduced dentin loss, except fluoride varnish; b) after erosive challenge and 7 days of storage, all treatments lost their effectiveness, except Nd:YAG laser, c) none of the treatments prevented calcium and phosphorus loss by erosion; d) all treatments contributed to eroded dentin surface remineralization, e) morphological analysis was not conclusive / Orientador: Maria Amélia Maximo de Araujo / Coorientador: Maria Filomena R. Lima Huhtala / Banca: Sérgio Eduardo de Paiva Gonçalves / Banca: Sergio Ricardo Garcia Badini / Banca: George Miguel Spyrides / Banca: Silvio Issáo Myaki / Doutor

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