Thesis (Ph. D.)--University of Chicago. / From the Memorial Institute for Infectious Diseases, Chicago. Includes bibliographical references.

Thesis (Ph. D.)--University of Manitoba, 1997. / Includes bibliographical references.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / La caries secundaria es la principal razón para reemplazar restauraciones. No sólo se relaciona directamente con algún defecto marginal, también requiere de la formación de placa con potencial cariogénico. En la etiología de la caries dental la especie Streptococcus mutans se considera la más importante. Streptococcus sobrinus también se encuentra involucrado en este proceso. Amalgamas y resinas compuestas son los materiales más utilizados en la actualidad para restaurar dientes cariados. Se ha visto que resinas compuestas no poseen actividad antibacteriana, por lo que no impedirían el crecimiento de S.mutans sobre ellas. Además se han identificado específicamente S.mutans en márgenes de resinas compuestas. Se ha descrito que la amalgama posee actividad antibacteriana, por lo que se esperaría un menor desarrollo de S.mutans sobre ella en relación a resinas compuestas. Esta investigación planteó como hipótesis que “Existe mayor cantidad de Unidades Formadoras de Colonias de S. mutans y S. sobrinus en el margen de restauraciones oclusales de resina compuesta que en el margen de restauraciones oclusales de amalgama” y se propuso como objetivo general “Determinar el porcentaje de unidades formadoras de colonias de S. mutans y S. sobrinus en el margen de restauraciones directas oclusales de resina compuesta y de amalgama con el fin de evaluar el efecto de ambos materiales sobre el crecimiento de estas especies bacterianas.” Se seleccionaron 25 pacientes adultos de alto riesgo cariogénico, que portaran una amalgama oclusal y otros 25 pacientes que portaran una resina compuesta oclusal. Se obtuvo una muestra de placa bacteriana supragingival del margen de todas las restauraciones y se realizaron cultivos en agar TYCSB (medio selectivo) y agar sangre Columbia (medio no selectivo). Al analizar los resultados se pudo observar que no hubo diferencias significativas en el crecimiento de S. mutans sobre ambos materiales. No se detectó S.sobrinus en los pacientes, en base a la prueba de la Esculina.

Orientador: Marines Nobre dos Santos Uchoa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-15T10:37:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Monteiro-Oliveira_MarcelaPinto_M.pdf: 904499 bytes, checksum: 29ad85bc2d3181a740228954039bca7e (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Durante o processo conhecido como terapia fotodinâmica, a aplicação de fotossensibilizadores associados a uma fonte de luz de comprimento de onda complementar, gera produtos que podem danificar componentes essenciais das células, e causar a morte celular. Dentro desse contexto, a aplicação dessa terapia sobre microrganismos presentes em lesões de cárie é de grande valia, uma vez que poderá reduzir a quantidade de tecido dental a ser removido no tratamento da cárie, diminuir as chances de progressão da doença bem como os riscos de acometimento pulpar do elemento dentário. Assim, o objetivo deste estudo in vitro foi determinar parâmetros para o uso de um diodo emissor de luz (LED) associado ao corante azul de orto toluidina (TBO) na redução da contagem de Streptococcus mutans presentes em lesões de cárie dentinária. Para isto, 72 espécimes de dentina coronária de dentes bovinos foram imersos em cultura contendo Streptococcus mutans para produzir lesões de cárie. Tais espécimes foram divididos aleatoriamente em 6 grupos (n=12): Controle (exposição a NaCl a 0,9% por 5 min); TBO (exposição ao TBO a 0,01% por 5 min); LEDA (exposição ao LED por 4,2 min); LEDB (exposição ao LED por 6,5 min); PDTA (exposição ao corante associado ao LED por 4,2 min) e PDTB (exposição ao corante associado ao LED por 6,5 min). As densidades de energia utilizadas para os tempos de 4,2 e 6,5 min, foram de 166 e 249 J/cm2, respectivamente. Antes e após os tratamentos, amostras de tecido dentinário cariado foram coletadas e analisadas microbiologicamente, por meio da contagem das unidades formadoras de colônia (UFC) de S. mutans. A profundidade das lesões de cárie produzidas pelo modelo microbiológico utilizado foi determinada por meio da microscopia de luz polarizada. Foram utilizados os testes ANOVA/Tukey para comparar os valores de log redução dos grupos (a=5%). Observou-se redução significativa de S. mutans nos grupos em que aplicou-se TBO associado ao LED, com as duas densidades de energia utilizadas. Entretanto, nenhuma diferença significativa foi encontrada para os diferentes tempos de irradiação. Concluiu-se que os parâmetros utilizados no presente estudo, para o emprego do LED associado ao TBO, foram efetivos em reduzir a contagem de S. mutans presentes em lesões de cárie dentinária. / Abstract: Photodynamic therapy (PDT) is a technique that consists in the activation of certain photosensitizers by light in the presence of tissue oxygen, resulting in the production of reactive radicals capable of inducing cell death. In this context, this therapy may become a suitable approach to disinfect the dentin tissue during the caries treatment, and reduce the tissue removal, minimizing the probability of caries progression and pulp involvement. This randomized in vitro study determined parameters for using a light-emitting diode (LED) with toluidine blue O (TBO) for reduction of Streptococcus mutans counts inside dentin caries. Seventy two bovine coronary dentin slabs were immersed in Streptococcus mutans culture for demineralization production. Dentin slabs were allocated to 6 groups (n=12) as follows: Control (treated with 0.9% NaCl solution for 5 min); TBO (treated with 0.1 mg/ml TBO for 5 min); LEDA (submitted to irradiation for 4.2 min); LEDB (submitted to irradiation for 6.5 min); PDTA (treated with TBO plus irradiation for 4.2 min) and PDTB (treated with TBO plus irradiation for 6.5 min). The energy densities used for 4.2 and 6.5 min correspond at 166 and 249 J/cm2, respectively. Before and after treatments, dentin samples were analyzed with regard to S. mutans counts. The caries lesion depth produced by the microbiological model was analyzed by polarized light microscopy. ANOVA/Tukey tests were utilized to compare log reductions among groups (a=5%). Bacterial reduction was observed when dentin was exposed to both TBO and LED at both irradiation times. However, no difference in S. mutans reduction was found between the two energy densities. Concluding, although the use of LED combined with TBO was effective in reducing the Streptococcus mutans counts in carious dentin, this effect may not have clinical significance. / Mestrado / Odontopediatria / Mestre em Odontologia

Orientador: Renata de Oliveira Mattos-Graner / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-27T04:12:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vizoto_NataliaLeal_D.pdf: 2014309 bytes, checksum: c9893c670e96978a4923d0db115c76f9 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: Streptococcus mutans é uma espécie bacteriana comum da microbiota bucal de seres humanos envolvida na patogênese da cárie dentária e em endocardites infecciosas promovidas por bacteremias de origem bucal. Para ser transmitido e ocupar seus nichos ecológicos, S. mutans precisa persistir na saliva e se adaptar fisiologicamente a cada fase da colonização, um processo que provavelmente envolve diversas alterações do seu transcriptoma. Para isto, S. mutans utiliza sistemas reguladores de transcrição de dois componentes (SDC). O SDC SptRS foi identificado através de análises in silico do genoma da cepa S. mutans UA159, como ortólogo do sistema SptSR (Spt de Saliva persistence) de Streptococcus pyogenes. O objetivo deste trabalho foi investigar a participação do sistema SptRS de S. mutans em fenótipos importantes para a colonização bucal. Para isto, mutantes knockout dos genes sptR e sptS, SMU.927 e SMU.928 respectivamente, foram construídos a partir da cepa UA159 (UAsptR- e UAsptS-) e comparados com a cepa parental em análises de morfologia, crescimento planctônico sob diferentes condições nutricionais, persistência em saliva humana, formação de biofilme e autólise a 44oC. Além disto, genes do regulon de SptRS foram pesquisados através de ensaios da Imunoprecipitacão de Cromatina seguido de sequenciamento (ChIP-seq), RT-PCR quantitativo (RT-PCRq) e de Ensaios de Retardamento da Mobilidade Eletroforética (EMSA) com proteína recombinante SptRr de S. mutans. Os mutantes sptR e sptS mostraram crescimento planctônico lento em meios de cultura RPMI e em MQD comparados à cepa parental, além de atividade autolítica reduzida em 22,4 e 53,13%, respectivamente. Não foram observadas, entretanto, alterações significativas na morfogênese, formação de biofilmes in vitro, nem na persistência em saliva humana. Os dados de ChIP-seq e RT-qPCR indicaram que SptRS regula genes envolvidos na resposta de estringência (SMU.926), repressão catabólica (ccpA), metabolismo de múltiplos açúcares (SMU.78, SMU.137, SMU.542, SMU.1734), sistemas fosfoenolpiruvato-fosfotransferase (PTS) (SMU.2047, SMU.114, SMU.115) sistemas de transporte do tipo ABC (SMU.182, SMU.880, SMU.905, SMU.1035, SMU.1095, SMU.1178c, SMU.1939) e biogênese de parede celular (SMU.1091, SMU.2147, SMU.609, SMU.1434c, SMU.22). SptR funcionou como um regulador negativo em 86% (37/43) dos genes testados. Análises de RT-qPCR e EMSA indicaram ainda que SptR regula diretamente o regulador de transcrição CovR (SMU.1924), envolvido na repressão de genes de virulência e formação de biofilmes. Este estudo fornece evidências de que SptRS regula diversas funções de S. mutans importantes para a sobrevivência em condições nutricionalmente escassos, aparentemente coordenando o metabolismo com o crescimento bacteriano e com a expressão de genes de virulência / Abstract: Streptococcus mutans is a common bacterial species of the bucal microbiota of humans involved in the pathogenesis of dental caries and infectious endocarditis promoted by bacteremia of bucal origin. To be transmitted and occupy their ecological niches, S. mutans need to persist in saliva and adapt physiologically to each phase of colonization, a process that probably involves several changes in its transcriptome. To this end, S. mutans uses transcriptional regulatory systems called Two Component System (TCS). The TCS SptRS was identified in an in silico analysis of the genome of S. mutans strain UA159, as an orthologue of the SptRS system (Spt of Saliva persistence) of Streptococcus pyogenes. The aim of this study was to investigate the role of the TCS SptRS in functional traits important for S. mutans to colonize its bucal niches. Thus, knockout mutants of sptR and sptS (SMU.927 and SMU.928, respectively) were obtained in strain UA159 (UAsptR-, UAsptS-) and compared to parental strain regarding morphology, planktonic growth under different nutritional conditions and persistence in human saliva, biofilm formation and autolysis at 44oC. In addition, genes of SptRS regulon were analised by Chromatin Immunoprecipitation followed the sequencing (ChIP-seq), quantitative RT-PCR (RT- qPCR) and Electrophoretic Mobility Shift Assays (EMSA) with S. mutans SptR recombinant protein. Inactivation of sptR/S promotes slow planktonic growth in RPMI and CDM, culture media 22.4 to 53.13% reductions in autolysis respectively, but does not significantly affect morphogenesis. However, mutants do not show significant alterations in biofilm formation or in persistence in human saliva. ChIP-seq and RT-qPCR analyses showed that SptRS regulates genes for stringent response (SMU.926), metabolism of multiple sugars (SMU.78, SMU.137, SMU.542, SMU.1734), catabolite repression (SMU.1591, ccpA), phosphoenolpyruvate phosphotransferase systems (PTS), ABC transport systems (SMU.182, SMU.880, SMU.905, SMU.1035, SMU.1095, SMU.1178c, SMU.1939) and cell wall biogenesis (SMU.22, SMU.609, SMU.1091, SMU.1434c, SMU.2147) SptR worked as a negative regulator of 86% (37/43) of the tested genes. RT-qPCR and EMSA analyses further showed that SptR directly represses expression of the transcriptional regulator CovR (SMU.1924), which is a repressor of genes involved in biofilm formation and virulence. This study provides evidence that SptRS regulates several functions important for S. mutans survival under poor nutritional conditions, apparently coordinating metabolism with bacterial growth and expression of virulence genes / Doutorado / Microbiologia e Imunologia / Doutora em Biologia Buco-Dental

Thesis (doctoral)--Lund University, 1997. / Added t.p. with thesis statement inserted. Includes bibliographical references.

Thesis (doctoral)--Lund University, 1997. / Added t.p. with thesis statement inserted. Includes bibliographical references.

Thesis (M.S.)--University of Louisville, 1996. / School of Dentistry, Department of Oral Biology. eContent provider-neutral record in process. Description based on print version record. Includes bibliographical references.

Thesis (M.S.)--University of Louisville, 1996. / School of Dentistry, Department of Oral Biology. eContent provider-neutral record in process. Description based on print version record. Includes bibliographical references.

Berlin, Techn. Univ., Diss., 2004. / Computerdatei im Fernzugriff.