Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción: Streptococcus sanguinis (S. sanguinis) es un colonizador primario de la biopelícula dental asociada a salud. Esta bacteria produce peróxido de hidrógeno (H2O2), un sub-producto del crecimiento y que es bacteriostático para otros streptococci orales, como Streptococcus mutans (S. mutans), quien, bajo condiciones determinadas de pH y disponibilidad de carbohidratos fermentables, se relaciona con el inicio y progresión de la caries dental. En este contexto, actualmente se propone una relación sinérgica entre S. mutans y Candida albicans (C. albicans), levadura comensal de la cavidad oral capaz de causar diversas patologías en humanos. El efecto de S. sanguinis, mediante la producción de (H²O²), en C. albicans no ha sido completamente estudiado. Según lo mencionado anteriormente, el objetivo de este estudio es determinar preliminarmente si existe modulación del crecimiento de C. albicans, en co-cultivo con S. sanguinis. Material y Métodos: Se utilizó S. sanguinis SK36, S. mutans ATCC 25175, C. albicans ATCC 90029 y un aislado clínico de C. albicans (P1-1) (proveniente de un niño con caries activas). Se realizaron ensayos de competencia en medio líquido y sólido de S. sanguinis o S. mutans con C. albicans (cepa de referencia o aislado clínico), se determinó pH y células viables para cada pareja en co-cultivo líquido. Inhibición del crecimiento en medio sólido fue evaluada según presencia de halo inhibitorio próximo a alguno de los microorganismos. Ensayos fueron incubados en microaerofilia a 37 ºC durante 48 h con agitación. Además, se realizó un test de concentración inhibitoria mínima (CIM) de (H²O²) para ambas cepas de C. albicans y también se determinó la cantidad de (H²O²) producida por S. sanguinis, de acuerdo a una curva estándar previamente diseñada. Los datos fueron analizados de manera descriptiva, comparando medianas entre distintos grupos y dentro de un mismo grupo. Resultados: En medio sólido, C. albicans produjo halo inhibitorio sobre S. sanguinis. En medio líquido, S. sanguinis y C. albicans (ATCC y P1-1) aumentaron su crecimiento en co-cultivo, respecto de su crecimiento aislado. Además, generaron siempre una alcalinización del medio, respecto al pH inicial. A 0,1 mM de (H²O²) la sobrevivencia de ambas cepas de C. albicans se redujo en un 70%, definiendo esta concentración como la CIM. La cantidad estimada de (H²O²) producida por S. sanguinis fue de 0,059 µM en todas las etapas de crecimiento. Conclusiones: De acuerdo a los resultados obtenidos y a las limitaciones del estudio, se puede concluir que S. sanguinis no inhibe el crecimiento de C. albicans. Asimismo, ambos podrían contribuir en mantener el pH del microambiente en niveles compatibles con salud oral. El co-cultivo de C. albicans con S. mutans podría beneficiar el crecimiento de la bacteria, en desmedro de la levadura. No obstante, cuando la levadura proviene de una biopelícula cariogénica, su relación con la bacteria podría tornarse más sinérgica. Entonces, el rol de C. albicans dentro del proceso de caries podría depender de la condición que presenta el microambiente, previo a la presencia de la levadura. El (H²O²) podría influir negativamente en el crecimiento de C. albicans, sin embargo, este efecto estaría supeditado a su concentración en el medio. / Adscrito a Proyecto U-inicia Difarp 40/13, VID, U. de Chile.

Cell surfaces of aggregation, adherence or hydrophilic variants of Streptococcus sanguis were compared to cell surfaces of the parent strain with regard to their protein and antigenic constituents. Cell surface molecules were released by digestion with mutanolysin. Extraction with SDS-BME, urea, lithium chloride and boiling water did not solubilize any material which stained with silver nitrate in an SDS-polyacrylamide gel. The parent organism S. sanguis 12 which aggregates in saliva, adheres to saliva coated hydroxyapatite (S-HA) and is hydrophobic was found to possess a prominently staining 160,000 MW protein. This protein was almost completely absent from strain I2na, a hydrophobic non-aggregating variant, and was completely absent from the hydrophilic non-aggregating, non-adherent strain 12L. Trypsinization of strain 12 resulted in the coincident loss of the 160,000 MW protein and the ability to aggregate in saliva. Trypsin treatment reduced, but did not eliminate the hydrophobic character of the cells. Boiling destroyed the ability to aggregate but did not alter hydrophobicity. Cell wall digests of strain 12 contained a large number of proteins which were absent from strains 12na and 12L. Mutanolysin digests of the hydrophilic strains contained no material that was visible in a silver stained SDS-polyacrylamide gel. Electron microscopy of phosphotungstic acid stained cells showed a thick capsular material spread evenly over the cell surface of the parent strain 12. This layer was thinner around the cells of strain 12na and appeared patchy on hydrophilic strains. Electron microscopy of uranyl acetate stained cells revealed that strain 12 had short fibrillar structures evenly distributed over the cell surface, and long fibrils which were more concentrated at the end of the cell. The hydrophilic strain 12L lacked both types of fibrils. Crossed immunoelectrophoresis confirmed that the major cell surface antigens were located in the 160,000 MW region. Cell wall digests of strain 12 and 12na inhibited adherence of strain 12 to S-HA by 36% and 19% respectively. The digests of hydrophilic strain 12L were not inhibitory. The inhibitory activity was sensitive to heat and SDS. / Science, Faculty of / Microbiology and Immunology, Department of / Graduate

Thesis (doctoral)--Rijksuniversiteit te Utrecht.

Thesis (M.S.)--University of Louisville, 1996. / School of Dentistry, Department of Oral Biology. eContent provider-neutral record in process. Description based on print version record. Includes bibliographical references.

Thesis (M.S.)--University of Louisville, 1996. / School of Dentistry, Department of Oral Biology. eContent provider-neutral record in process. Description based on print version record. Includes bibliographical references.

Thesis (Ph. D.)--University of Minnesota, 1999. / eContent provider-neutral record in process. Description based on print version record. Includes bibliographical references.

Thesis (doctoral)--Rijksuniversiteit te Utrecht.

Thesis (Ph. D.)--University of Minnesota, 1999. / Includes bibliographical references.

Thesis (doctoral)--Karolinska Institutet, Stockholm, 1990. / Extra t.p. with thesis statement inserted. Includes bibliographical references.

Thesis (doctoral)--Karolinska Institutet, Stockholm, 1990. / Extra t.p. with thesis statement inserted. Includes bibliographical references.