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Efeito dos extratos de Spirulina maxima e Kefir no cultivo de folículos pré-antrais de suinoSaavedra Plazas, Diana Carolina January 2015 (has links)
Orientador : Prof. Dr. Carlos Ricardo Soccol / Coorientador : Prof. Dr. José Ricardo Figueiredo / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Tecnologia, Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia. Defesa: Curitiba, 24/04/2015 / Inclui referências : f.26-32 / Área de concentração: Saúde humana e animal / Resumo: Em reprodução de mamíferos, sabe-se que 99,9% dos folículos pré-antrais serão eliminados durante a vida reprodutiva das fêmeas. A recuperação dessas estruturas é importante para solucionar problemas de infertilidade e aumentar o potencial reprodutivo das fêmeas. Para isso é necessário desenvolver meios de cultivo ideais com propriedades que possam incrementar o número e desenvolvimento desses folículos. Nesse contexto o objetivo desse estudo foi avaliar a atividade de dois extratos naturais produzidos com Spirulina maxima e Kefir na manipulação de oócitos in vitro (MOIFOPA).Os ovários de 10 fêmeas suínas pré-púberes foram obtidos em abatedouro e manipulados em laboratório para o cultivo in vitro do tecido do córtex ovariano na presença de diferentes concentrações (10, 50, 100 e 200 ?g.mL¯¹) do extrato aquoso de Spirulina maxima e do extrato liofilizado de Kefir pelo período de um e sete dias. O grupo controle foi representado pelo tratamento semelhante aos demais com exceção da adição das substâncias testadas. Os estratos também foram caracterizados e analisados para determinar sua concentração de proteínas, carboidratos e lipídeos por HPSECMALLS e SDS-PAGE. Na caracterização dos extratos de S. maxima e de Kefir foi detectado total de 48,85 e 30,87% de proteínas, respectivamente. No cultivo de tecido ovariano para manipulação de oócitos in vitro (MOIFOPA) não foi observada citotoxicidade para o desenvolvimento de folículos pré-antrais, nas duas substâncias estudadas, sendo que o Kefir foi mais eficiente do que a S. maxima. Palavras chave: Folículos pré antrais, suíno. / Abstract: In reproduction of mammals 99.9% of preantral follicles are produced and released during reproductive stage of females. Retrieving of these follicles is important to confront infertility problems to increase the reproductive potential of females. Given this scenario developing ideal culture medias with nutritional properties which might increase the number and development of these follicles is necessary. The aim of this study was evaluate the activity of two natural extracts, one produced by the "blue-green algae" Spirulina maximum and "Kefir" in the biotechnique of the Manipulation of Oocytes Enclosed in Preantral Follicles (MOEPF). Each extract were characterized and analyzed to determine proteins, carbohydrates and lipids concentrations by the method HPSEC-MALLS and SDSPAGE. S. maxima extracts has 48.85% of proteins and "Kefir" had 30.87% proteins. Each extract were tested in ten ovarian cortex tissues from prepubertal swine obtained from a slaughterhouse. Cortex tissue were cultivated in vitro culture and citotoxicity were tested with different concentrations (10, 50, 100 and 200 ?g.mL¯¹) of Spirulina maxima aqueous extract and lyophilized extract of "Kefir" in periods of one and seven days each. The control group was not submitted to extracts but periods were the same. In ovarian tissue culture oocytes in vitro manipulation (MOEPF) cytotoxicity was not observed. For the development of preantral follicles in the two substances studied "Kefir" was more efficient than S. maximum. Key words: preantral follicles, swine, oocytes.
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