CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O desenvolvimento de novas tecnologias que buscam a reduÃÃo no uso de fertilizantes, especialmente os nitrogenados, à essencial para a sustentabilidade do sistema de produÃÃo na cultura do milho (Zea mays L.). O uso de microrganismos na agricultura à uma alternativa amplamente pesquisada, que busca a diminuiÃÃo no uso de fertilizantes nitrogenados com consequente reduÃÃo da degradaÃÃo do meio ambiente. O presente trabalho objetivou comprovar a hipÃtese do efeito da inoculaÃÃo de bactÃrias diazotrÃficas endofÃticas, sobre o crescimento e teores de nutrientes em dois hÃbridos de milho submetidos a quatro doses de adubaÃÃes nitrogenadas e sobre a atividade microbiana do solo. O experimento foi conduzido em casa de vegetaÃÃo, por um perÃodo de 90 dias. O delineamento experimental utilizado foi em blocos casualizados, avaliando-se dois hÃbridos de milho (AG 1051 e BM 3061), os tratamentos foram dispostos no esquema fatorial 2 x 4, com quatro repetiÃÃes, inoculado e nÃo inoculado com o produto comercial a base de Azospirillum brasilense e submetidos a quatro diferentes doses de nitrogÃnio (0; 0,5; 1,0 e 1,5 g vaso-1). Neste ensaio, houve interaÃÃo significativa entre os fatores inoculaÃÃo e doses de nitrogÃnio para o acÃmulo de nitrogÃnio da raiz e no acÃmulo de fÃsforo da parte aÃrea do hÃbrido AG 1051, em relaÃÃo ao hÃbrido BM 3061 apresentou interaÃÃo significativa sobre o acÃmulo do potÃssio da parte aÃrea. Na avaliaÃÃo, houve efeitos isolados dos fatores inoculaÃÃo e doses de nitrogÃnio para a massa seca da raiz, no acÃmulo de nitrogÃnio e potÃssio da parte aÃrea do hÃbrido AG 1051, para o hÃbrido BM 3061 efeitos significativos para o teor de fÃsforo da parte aÃrea e do potÃssio na raiz. O fator isolado da inoculaÃÃo com Azospirillum brasilense revelou efeito significativo apenas sobre a respiraÃÃo basal do solo sob influencia do hÃbrido BM 3061. Os dados relativos à altura, diÃmetro do colmo, Ãrea foliar, teor de clorofila, massa seca das folhas, colmo e raiz das plantas de milho, cultivadas em condiÃÃes de casa de vegetaÃÃo, revelam que houve efeitos significativos atribuÃdos apenas à adiÃÃo de fertilizantes nitrogenados, independentemente da inoculaÃÃo com Azospirillum brasilense. Conclui-se que a inoculaÃÃo com Azospirillum brasilense nesse estudo pouco contribuiu com as variÃveis avaliadas, o hÃbrido de milho AG 1051 se mostrou mais sensÃvel à inoculaÃÃo do que o BM 3061, e que os hÃbridos de milhos sÃo sensÃveis à variaÃÃo do teor de nitrogÃnio aplicado no solo. / The development of new technologies that seek to reduce the use of fertilizers, especially nitrogen, is essential for the sustainability of the production system in maize (Zea mays L.). The use of microorganisms in agriculture is a widely researched alternative, seeking a reduction in the use of nitrogen fertilizers with consequent reduction in environmental degradation. This study aimed at proving the hypothesis of the effect of inoculation with endophytic diazotrophic bacteria on growth and nutrient content in two maize hybrids subjected to four levels of nitrogen fertilization and on the soil microbial activity. The experiment was conducted in a greenhouse for a period of 90 days. The experimental design was randomized blocks, evaluating two maize hybrids (AG 1051 and BM 3061), the treatments were arranged in a 4 x 2 factorial design, with four replicates, inoculated and not inoculated with the commercial product based on Azospirillum brasilense and subjected to four different doses of nitrogen (0, 0.5, 1.0 and 1.5 g pot-1). In this trial, there was a significant interaction between inoculation factors and nitrogen doses root nitrogen accumulation and shoot phosphorus accumulation of the hybrid AG 1051. Regarding the BM 3061 hybrid, it showed a significant interaction on the shoot potassium accumulation. In the assessment, there have been isolated factors of inoculation and nitrogen doses for root dry mass, the accumulation of nitrogen and potassium of shoots for AG 1051. For BM 3061 hybrid, there were significant effects of phosphorus content of shoots and root potassium. The isolated factor of inoculation with Azospirillum brasilense showed significant effect only on the basal soil respiration under the influence of the hybrid BM 3061. Data on height, stem diameter, leaf area, chlorophyll content, dry mass of leaves, stems and roots of maize plants grown under greenhouse conditions showed significant effects attributed solely to the addition of nitrogen fertilizer, regardless of inoculation with Azospirillum brasilense. It was concluded that inoculation with Azospirillum brasilense in this study contributed little to the parameters evaluated, the maize hybrid AG 1051 was more sensitive to the inoculation with BM 3061, and that the maize hybrids are sensitive to the variation of the nitrogen content applied to the soil.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / O Leuconostoc mesenteroides B742 produz a enzima dextrana-sacarase em meio sintÃtico contendo sacarose (fonte de carbono), fonte de nitrogÃnio e sais. Esta enzima catalisa a formaÃÃo de dextrana quando em meio contendo acarose como Ãnico substrato. Entretanto, quando em meio contendo um aceptor (maltose, frutose, glicose ou outro aÃÃcar simples) como substrato predominante e sacarose como segundo substrato, a enzima produz oligossacarÃdeos prÃbiÃticos. Estes carboidratos nÃo sÃo digeridos por humanos e ao chegarem no intestino grosso sÃo metabolizados pelas bifidobactÃrias e lactobacilos, ali presentes, estimulando o seu crescimento. A maioria dos trabalhos publicados sobre a sÃntese de oligosscarÃdeos com dextrana-sacarase de Leuconostoc mesenteroides sÃo relativos à linhagem B512F e utilizam substratos sintÃticos. O caju, largamente cultivado no CearÃ, possui castanha (verdadeiro fruto) e pedÃnculo (pseudofruto) que à fonte de vitamina C. Considerando-se que o pedÃnculo corresponde a 90% do peso do caju, calcula-se que o paÃs produza cerca de 1,5 milhÃo de toneladas desse produto. No entanto, apenas 5% desse total à aproveitado industrialmente ou para consumo in natura, sendo grande parte perdida no campo. Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo o aproveitamento do pedÃnculo como substrato para a sÃntese de oligossacarÃdeos prebiÃticos pela reaÃÃo do aceptor com a enzima dextranasacarase, obtida via processo fermentativo a partir do Leuconostoc mesenteroides B742 no suco de caju clarificado in natura. A substituiÃÃo parcial do extrato de levedura por sulfato de amÃnio como fonte de nitrogÃnio foi tambÃm avaliada. Com base nos resultados obtidos pode-se concluir que o suco de caju clarificado pode ser empregado como uma alternativa de substrato de baixo custo para o crescimento do Leuconostoc mesenteroides B742 e para a produÃÃo de oligossacarÃdeos prebiÃticos via sÃntese enzimÃtica. A enzima bruta apresentou estabilidade superior no suco de caju quando comparada ao meio sintÃtico, tornando este substrato bastante interessante do ponto de vista industrial, uma vez que a purificaÃÃo da enzima à uma das etapas mais caras em processos enzimÃticos. A substituiÃÃo parcial do extrato de levedura por sulfato de amÃnio na produÃÃo da enzima se mostrou eficaz nÃo causando perdas na produÃÃo da enzima. / Leuconostoc mesenteroides B742 produces the enzyme dextransucrose in a medium containing sucrose (carbon source), a nitrogen source and mineral salts. This enzyme catalyses dextran synthesis when the only carbon source is sucrose. When acceptors (maltose, fructose, glucose or other simple sugar) are present as the main substrate and sucrose is the second one, the enzyme synthesizes prebiotic oligosaccharides. These carbohydrates are not digested by humans and reach the large intestine where they are metabolized by bifidobacteria and lactobacilli, the intestine endogenous microbiota, increasing their growth. The most published papers about oligosaccharides synthesis using dextransucrase from Leuconostoc mesenteroides are related to the strain B512F and the synthesis is carried out using synthetic substrates. The cashew tree, largely grown in Cearà state, has a peduncle (pseudofruit) which is wasted. Considering that the peduncle corresponds to 90 % of the fruit weight, its annual estimated production is about 1,5 millions tons. However, only 5% of this production is industrially used or consumed in natura, being large amounts wasted in the field. This work aimed to the study of the prebiotic oligosaccharide synthesis through the acceptor reaction with dextransucrase enzyme from Leuconostoc mesenteroides B742 in natura clarified cashew apple juice. The partial substitution of yeast extract by ammonium sulfate as nitrogen source was also investigated. According to the results obtained, the clarified cashew apple juice can be used as low cost alternative substrate to grow L.mesenteroides B742 and to produce prebiotic oligosaccharide through enzyme synthesis. The crude enzyme showed higher stability in the clarified cashew apple juice when compared to the synthetic medium, making this substrate interesting for industrial applications because enzyme purification protocols are one of the most expensive steps in enzyme process. The partial substitution of yeast extract by ammonium sulfate also showed technical viability without enzyme yield losses.