Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Visando estudar os efeitos da retirada abrupta apÃs o tratamento crÃnico com brometo de ipratrÃpio (BI) ratos machos pesando 200-250 g no inÃcio dos experimentos, foram introduzidos em uma caixa de acrÃlico e submetidos durante 7 minutos à inalaÃÃo de brometo de ipratrÃpio (600ÂM). Este procedimento se repetiu a cada quatro horas durante um perÃodo de 14 dias. Foram utilizadas duas cÃmaras de inalaÃÃo, uma para o grupo experimental (tratado com BI) e outra para o grupo controle (CONT, salina). Outro grupo de animais foi sensibilizado (SENS) e submetido ao mesmo protocolo de inalaÃÃo com BIque inalaram o brometo de ipratrÃpio e outra para os animais controle. Os animais SENS foram desafiados 24 horas antes do sacrifÃcio com inalaÃÃes do antÃgeno (OVA: 1mg/ml; 5mg/ml; 15/15 minutos; grupo DESF). Ao fim de uma Ãnica inalaÃÃo ou ao tÃrmino do perÃodo de tratamento crÃnico com BI os animais foram sacrificados 0, 4, 8, 12 horas apÃs a Ãltima inalaÃÃo e as traquÃias rapidamente removidas. ApÃs a dissecaÃÃo a traquÃia foi montada sob a forma de anÃis, em banho para ÃrgÃo isolado contendo 8 ml de soluÃÃo de Krebs-Henseleit (37ÂC, 95% O2, 5% CO2). Foram entÃo, confeccionadas curvas concentraÃÃo-efeito (CCE), ao carbacol (Cch), serotonina (5-HT), potÃssio (KCl), cÃlcio(CaCl2) e estÃmulo elÃtrico. As CCE ao Cch obtidas com traquÃias isoladas de ratos apÃs uma Ãnica inalaÃÃo de brometo de ipratrÃpio demonstrou desvio para a direita com significativo aumento da CE50[CE50x10-7M: CONT=1,78(1,32 â 2,32); BI 14,6(2,05 â 58,1), p<0,05). Imediatamente apÃs o fim do tratamento crÃnico as CCE ao Cch tambÃm apresentaram aumento significativo da CE50 [CE50x10-7M: CONT=2,33(1,25 â 4,32); BI=42,5(21,1 â 85,8), p<0,01). Nos experimentos realizados com traquÃias isoladas de ratos 4, 8 e 12 horas apÃs o fim do tratamento crÃnico ocorreu um progressivo aumento da contratilidade, com a resposta mÃxima(RM) atingindo um valor mÃximo 12 horas apÃs a supressÃo do tratamento crÃnico com BI (RM 12h: CONT= 1,69Â0,04, BI 2,64Â0,23 gF, p<0,01). Esta supersensibilidade caracterizada por aumento vertical, tambÃm se manifestou para outros agonistas e estÃmulos contrÃteis. Assim, ocorreu supersensibilidade para a serotonina (RM-12h: CONT=0,59Â0,04; BI=1,06Â0,10gF, p<0,01) potÃssio (RM: CONT= 0,70Â0,05; BI=1,27Â0,17 gF; p<0,01) e ao estÃmulo elÃtrico (RM: CONT=1,25Â0,07; BI=1,64Â0,06 gF; p<0,01). As CCE obtidas 12 horas apÃs o fim do tratamento crÃnico com BI, pela adiÃÃo de cÃlcio ao lÃquido de incubaÃÃo, apÃs ter sido obtida resposta contrÃtil ao KCl ou ao Cch, as quais avaliaram, respectiva e indiretamente, a entrada de cÃlcio via canais VOC e ROC demonstraram que a entrada de cÃlcio està facilitada em ambos os tipos de canal de cÃlcio estudados (RM-12h CaCl2/KCl: CONT=1,00Â0,09; BI=1,54Â0,19 gF; p<0,01) (RM-12h CaCl2/Cch: CONT=1,27Â0,10; BI=1,66Â0,05 gF; p<0,01). Nos experimentos realizados com animais desafiados, a supressÃo do tratamento crÃnico imediatamente apÃs Ãltima inalaÃÃo diminuiu a sensibilidade desviando para a direita a CCE ao Cch [CE50x10-7M: CONT=2,10(1,28 â 3,44); BI=17,12(4,37 â 67,05), p<0,01)]. Enquanto que, traquÃias isoladas de animais desafiados 12 horas apÃs o fim do tratamento ocorreu aumento significativo da contratilidade e da resposta mÃxima obtida para o carbacol (RM-12h: CONT=2,48Â0,19; BI=3,48Â0,13 gF; p<0,01). Estes resultados sugerem que a supressÃo do processo de inalaÃÃo crÃnica com BI induz um aumento de resposta contrÃtil ao Cch atingindo um valor mÃximo 12 horas apÃs a interrupÃÃo do tratamento crÃnico. Esta supersensibilidade 12 horas apÃs a supressÃo do tratamento crÃnico com BI, tambÃm foi manifestada para vÃrios outros agonistas, bem como para o estÃmulo elÃtrico. A supersensibilidade foi tambÃm detectada na resposta contrÃtil ao Cch, seguindo o mesmo protocolo experimental de interrupÃÃo do tratamento em traquÃias isoladas de ratos desafiados a OVA. Este aumento de resposta contrÃtil observado na musculatura traqueal de ratos, 12 horas tambÃm que a supersensibilidade està presente, apÃs o desafio antigÃnico, com incremento ainda maior na resposta contrÃtil quando comparada traquÃias isoladas de animais nÃo desafiados submetidos à retirada abrupta apÃs tratamento crÃnico com BI / In order to evaluate ipratropium bromide (IB) abrupt withdrawal effects after chronic treatment in isolated rat tracheas, male rats weighing 200-250g were placed in plastic chambers and submitted to inhalation of IB (600ÂM) during seven minutes. This protocol was repeated each four hours during 14 days. Two inhalation chambers were used, one with experimental group (IB inhalation) and the other with control group (CONT, saline). Another group was ovalbumin (OVA) actively sensitized (SZ) and submitted to the same protocol of inhalation. These animals were challenged 24hours before the beginning of the experiments by antigen inhalation (OVA: 1mg/ml; 5mg/ml; 15/15 minutes) (group DESF). At the end of IB treatment period the animals were killed and 0, 4, 8, 12 hours after the last inhalation the tracheas were quickly removed. After dissection the tracheal rings were transferred to a 8 ml organ bath containing Krebs-Henseleit solution mMol/l: NaCl 113.0; KCl 4.7; CaCl2.2H2O 1.2; KH2PO4 1.2; MgSO4.7H2O 1.2; NaHCO3 25.0; Glucose 11.0; 37 C; 95%O2/5%CO2). Concentration-effect curves (CEC) were constructed to carbachol (Cch), serotonin (5-HT), potassium (KCl), calcium (CaCl2) and electric stimulus. CEC to Cch obtained with tracheas isolated from rats submitted to only one IB inhalation showed shift to the right with an increase in the EC50 values [EC50x10-7M: CONT=1.78(1.32-2.32); IB=14.6(2.05-58.1) p<0.05]. Immediately after chronic treatment CEC to Cch also showed significant increase at EC50 level [EC50x10-7M: CONT=2.33(1.25-4.32); IB=42.5(21.1-85.8); p<0,01]. Experiments realized with isolated rats tracheas 4, 8, 12 hours after ended the IB chronic treatment showed a Cch maximum response (MR) progressive increase, reaching the greater value 12 hours after IB chronic treatment interruption [MR-12h: CONT=1.69Â0.04; IB=2.64Â0.23 gF, p<0.01). This kind of supersensitivity characterized by a vertical increase, was also obtained to other agonists and contractile stimulus. In this way the results showed supersensitivity to serotonin (MR-12h: CONT=0.59Â0.04; IB=1.06Â0.10; gF; p<0.01), potassium (MR-12h: CONT=0.70Â0.05; IB=1.27Â0.17; gF; p<0.01) and electric stimulus (MR-12h: CONT=1.25Â0.07; IB=1.64Â0.06; gF; p<0.01). Calcium CCE were obtained 12hours after the end of IB chronic treatment, after the addition of KCl or Cch in calcium free buffer. This kind of experiment measured, respsctively and indirectly the influx of calcium by voltage operated channelsVOC) and by receptor operated channels(ROC). The results demonstrated that influx of calcium was facilitated in both calcium channels studied in this work (MR-12h: CaCl2/KCl: CONT=1.00Â0.09; IB=1.54Â0.19; gF; p<0.01) (MR-12h: CaCl2/Cch; CONT= 1.27Â0.10; IB=1.66Â0.05; gF; p<0.01). The experiments with OVA challenged animals, realized immediately after the end of chronic treatment, showed a decreased in the sensibility. The CEC to Cch were shift to the right [EC50X10-7M: CONT=2.10(1.28-3.44); IB=17.13(4.37-67.05), P<0,01]. However, trachea isolated from rat challenged 12 hours after the end of the treatment, showed an increase in the contractility and in the MR obtained to carbachol (MR-12h: CONT=2.48Â0.19; IB=3.48Â0.13; gF; p<0,01). These data suggest that IB chronic inhalation process follow suppression induced an evident Cch contractile response increase in isolated rat trachea, reaching a maximum value 12 hours after interrupted IB chronic treatment abrupt suppression, was here demonstrated to several agonists and electric stimulus. Supersensitivity was also detected to carbachol contractile response through the same withdrawal experimental protocol in isolated tracheas from rats challenged with OVA. This increased contractile response obtained in rats tracheal smooth muscle, 12 hours after the end of ipratropium bromide chronic treatment, could be related with a component linked with the facilitation influx of calcium by voltage operated channels (VOC) and/or receptor operated channels (ROC)