O plasma seminal é uma fração do ejaculado masculino, produzido por contribuição de várias glândulas acessórias masculinas. Deveria ser reconhecido, como ocorre em outras espécies, como agente necessário ao “condicionamento” do endométrio, favorecendo o processo de implantação do embrião. A composição e conseqüente atividade imunossupressora do plasma seminal parece estar relacionados com o favorecimento da viabilidade da gravidez. Nessa tese, em estudo em que foram comparadas amostras de plasma seminal de pacientes considerados férteis frente a amostras de homens considerados inférteis (com oligozoospermia ou astenozoospermia) não foi encontrada diferença estatística entre níveis de diversas citocinas envolvidas no processo implantação. Amostras de plasma seminal dos dois grupos estudados demonstraram ter o mesmo potencial em diminuir a secreção de fator de necrose tumoral (TNF)-alfa e estimular a secreção de interleucina (IL)-6 e IL-8 por células mononucleares periféricas (PBMC), comprovando a atividade imunomoduladora do plasma seminal. A habilidade do sistema imune materno em manter tolerância frente ao feto pode ser reflexo do ambiente criado nos tecidos envolvidos e não somente de citocinas liberadas exclusivamente por células do sistema imune. Em outro estudo aqui apresentado, demonstrou-se que o perfil de expressão gênica de células endometriais epiteliais cultivadas in vitro pode ser modulado pela ação de plasma seminal em cultura. Análises de ontologia gênica apontam a regulação negativa de genes envolvidos com a resposta imune e estimulação de agentes envolvidos com a quimiotaxia, podendo estar relacionados com a expansão de linfócitos T reguladores observados durante gestações bem sucedidas. Regulação positiva de 133 genes e resolução negativa de 12 genes endometriais epiteliais foram descritas pela primeira vez nesse trabalho de tese e podem contribuir para a compreensão do processo envolvido na simbiose materno-fetal. Em ensaio clínico apresentado nessa tese envolvendo pacientes submetidas à Fertilização in vitro (FIV) ou Injeção intracitoplasmática de espermatozóides (ICSI) voluntárias a participar do estudo piloto duplo-cego, observou-se que pacientes que recebiam plasma seminal intracervical e intravaginal no dia da coleta dos oócitos exibiam maior taxa de gravidez do que a do grupo controle (salina). Ainda permanece pouco esclarecido o exato mecanismo pelo qual o plasma seminal é capaz de levar a aumento relativo de 45% na taxa de gravidez em mulheres que receberam plasma seminal, por vias intracervical e intravaginal, no dia da coleta dos oócitos. / Seminal plasma (SP) is a fraction of the masculine ejaculate, produced by contribution of some masculine accessory glands. Seminal plasma must be recognized, as it occurs in other species, as a necessary agent for “conditioning” of the endometrium, favoring the embryo implantation process. The SP imunossupressor activity seems to be responsible for the viability of the pregnancy. In this thesis, we compared SP from fertile patients with samples from infertile (oligozoospermia or astenozoospermia) patients. There were no significant differences between levels of several cytokines in the different groups. SP samples of both groups had similar effects in inhibiting TNF-alpha secretion and stimulating the secretion of IL-6 and IL-8 from peripheral mononuclear cells (PBMC), indicating that SP displays imunomoduladory activity. The ability of the maternal immune system in keeping tolerance to the embryo, can be related to the environment created in surrounding tissues and not only to cytokines produced by immune cells. We also show the profile genomic change of epithelial endometrial cells cultivated in vitro, under SP stimulation. Gene ontology analysis pointed genes related to negative regulation of genes enrolled in the immune response. SP stimulatory effect, on gene expression in endometrial epithelial cells, notably of chemokines, could be related with the expansion of T reg cells observed during successful gestations. Up-regulation of 133 genes and down-regulation of 12 epithelial endometrial genes might contribute to a better understanding of the process involved in the maternal-fetal symbiosis. In a clinical trial involving patients submitted to the FIV/ICSI and volunteers to participate of a double-blind pilot study. We observed that patients receiving SP by intracervical and intravaginal routes at the time of oocyte retrieval, showed greater pregnancy rates when compared to the control group (saline). The molecular mechanisms underlying the conditioning effect of SP, which could explain the 45% relative increase in pregnancy rate in patients receiving local seminal plasma treatment, remain to be established.

O plasma seminal é uma fração do ejaculado masculino, produzido por contribuição de várias glândulas acessórias masculinas. Deveria ser reconhecido, como ocorre em outras espécies, como agente necessário ao “condicionamento” do endométrio, favorecendo o processo de implantação do embrião. A composição e conseqüente atividade imunossupressora do plasma seminal parece estar relacionados com o favorecimento da viabilidade da gravidez. Nessa tese, em estudo em que foram comparadas amostras de plasma seminal de pacientes considerados férteis frente a amostras de homens considerados inférteis (com oligozoospermia ou astenozoospermia) não foi encontrada diferença estatística entre níveis de diversas citocinas envolvidas no processo implantação. Amostras de plasma seminal dos dois grupos estudados demonstraram ter o mesmo potencial em diminuir a secreção de fator de necrose tumoral (TNF)-alfa e estimular a secreção de interleucina (IL)-6 e IL-8 por células mononucleares periféricas (PBMC), comprovando a atividade imunomoduladora do plasma seminal. A habilidade do sistema imune materno em manter tolerância frente ao feto pode ser reflexo do ambiente criado nos tecidos envolvidos e não somente de citocinas liberadas exclusivamente por células do sistema imune. Em outro estudo aqui apresentado, demonstrou-se que o perfil de expressão gênica de células endometriais epiteliais cultivadas in vitro pode ser modulado pela ação de plasma seminal em cultura. Análises de ontologia gênica apontam a regulação negativa de genes envolvidos com a resposta imune e estimulação de agentes envolvidos com a quimiotaxia, podendo estar relacionados com a expansão de linfócitos T reguladores observados durante gestações bem sucedidas. Regulação positiva de 133 genes e resolução negativa de 12 genes endometriais epiteliais foram descritas pela primeira vez nesse trabalho de tese e podem contribuir para a compreensão do processo envolvido na simbiose materno-fetal. Em ensaio clínico apresentado nessa tese envolvendo pacientes submetidas à Fertilização in vitro (FIV) ou Injeção intracitoplasmática de espermatozóides (ICSI) voluntárias a participar do estudo piloto duplo-cego, observou-se que pacientes que recebiam plasma seminal intracervical e intravaginal no dia da coleta dos oócitos exibiam maior taxa de gravidez do que a do grupo controle (salina). Ainda permanece pouco esclarecido o exato mecanismo pelo qual o plasma seminal é capaz de levar a aumento relativo de 45% na taxa de gravidez em mulheres que receberam plasma seminal, por vias intracervical e intravaginal, no dia da coleta dos oócitos. / Seminal plasma (SP) is a fraction of the masculine ejaculate, produced by contribution of some masculine accessory glands. Seminal plasma must be recognized, as it occurs in other species, as a necessary agent for “conditioning” of the endometrium, favoring the embryo implantation process. The SP imunossupressor activity seems to be responsible for the viability of the pregnancy. In this thesis, we compared SP from fertile patients with samples from infertile (oligozoospermia or astenozoospermia) patients. There were no significant differences between levels of several cytokines in the different groups. SP samples of both groups had similar effects in inhibiting TNF-alpha secretion and stimulating the secretion of IL-6 and IL-8 from peripheral mononuclear cells (PBMC), indicating that SP displays imunomoduladory activity. The ability of the maternal immune system in keeping tolerance to the embryo, can be related to the environment created in surrounding tissues and not only to cytokines produced by immune cells. We also show the profile genomic change of epithelial endometrial cells cultivated in vitro, under SP stimulation. Gene ontology analysis pointed genes related to negative regulation of genes enrolled in the immune response. SP stimulatory effect, on gene expression in endometrial epithelial cells, notably of chemokines, could be related with the expansion of T reg cells observed during successful gestations. Up-regulation of 133 genes and down-regulation of 12 epithelial endometrial genes might contribute to a better understanding of the process involved in the maternal-fetal symbiosis. In a clinical trial involving patients submitted to the FIV/ICSI and volunteers to participate of a double-blind pilot study. We observed that patients receiving SP by intracervical and intravaginal routes at the time of oocyte retrieval, showed greater pregnancy rates when compared to the control group (saline). The molecular mechanisms underlying the conditioning effect of SP, which could explain the 45% relative increase in pregnancy rate in patients receiving local seminal plasma treatment, remain to be established.

O plasma seminal é uma fração do ejaculado masculino, produzido por contribuição de várias glândulas acessórias masculinas. Deveria ser reconhecido, como ocorre em outras espécies, como agente necessário ao “condicionamento” do endométrio, favorecendo o processo de implantação do embrião. A composição e conseqüente atividade imunossupressora do plasma seminal parece estar relacionados com o favorecimento da viabilidade da gravidez. Nessa tese, em estudo em que foram comparadas amostras de plasma seminal de pacientes considerados férteis frente a amostras de homens considerados inférteis (com oligozoospermia ou astenozoospermia) não foi encontrada diferença estatística entre níveis de diversas citocinas envolvidas no processo implantação. Amostras de plasma seminal dos dois grupos estudados demonstraram ter o mesmo potencial em diminuir a secreção de fator de necrose tumoral (TNF)-alfa e estimular a secreção de interleucina (IL)-6 e IL-8 por células mononucleares periféricas (PBMC), comprovando a atividade imunomoduladora do plasma seminal. A habilidade do sistema imune materno em manter tolerância frente ao feto pode ser reflexo do ambiente criado nos tecidos envolvidos e não somente de citocinas liberadas exclusivamente por células do sistema imune. Em outro estudo aqui apresentado, demonstrou-se que o perfil de expressão gênica de células endometriais epiteliais cultivadas in vitro pode ser modulado pela ação de plasma seminal em cultura. Análises de ontologia gênica apontam a regulação negativa de genes envolvidos com a resposta imune e estimulação de agentes envolvidos com a quimiotaxia, podendo estar relacionados com a expansão de linfócitos T reguladores observados durante gestações bem sucedidas. Regulação positiva de 133 genes e resolução negativa de 12 genes endometriais epiteliais foram descritas pela primeira vez nesse trabalho de tese e podem contribuir para a compreensão do processo envolvido na simbiose materno-fetal. Em ensaio clínico apresentado nessa tese envolvendo pacientes submetidas à Fertilização in vitro (FIV) ou Injeção intracitoplasmática de espermatozóides (ICSI) voluntárias a participar do estudo piloto duplo-cego, observou-se que pacientes que recebiam plasma seminal intracervical e intravaginal no dia da coleta dos oócitos exibiam maior taxa de gravidez do que a do grupo controle (salina). Ainda permanece pouco esclarecido o exato mecanismo pelo qual o plasma seminal é capaz de levar a aumento relativo de 45% na taxa de gravidez em mulheres que receberam plasma seminal, por vias intracervical e intravaginal, no dia da coleta dos oócitos. / Seminal plasma (SP) is a fraction of the masculine ejaculate, produced by contribution of some masculine accessory glands. Seminal plasma must be recognized, as it occurs in other species, as a necessary agent for “conditioning” of the endometrium, favoring the embryo implantation process. The SP imunossupressor activity seems to be responsible for the viability of the pregnancy. In this thesis, we compared SP from fertile patients with samples from infertile (oligozoospermia or astenozoospermia) patients. There were no significant differences between levels of several cytokines in the different groups. SP samples of both groups had similar effects in inhibiting TNF-alpha secretion and stimulating the secretion of IL-6 and IL-8 from peripheral mononuclear cells (PBMC), indicating that SP displays imunomoduladory activity. The ability of the maternal immune system in keeping tolerance to the embryo, can be related to the environment created in surrounding tissues and not only to cytokines produced by immune cells. We also show the profile genomic change of epithelial endometrial cells cultivated in vitro, under SP stimulation. Gene ontology analysis pointed genes related to negative regulation of genes enrolled in the immune response. SP stimulatory effect, on gene expression in endometrial epithelial cells, notably of chemokines, could be related with the expansion of T reg cells observed during successful gestations. Up-regulation of 133 genes and down-regulation of 12 epithelial endometrial genes might contribute to a better understanding of the process involved in the maternal-fetal symbiosis. In a clinical trial involving patients submitted to the FIV/ICSI and volunteers to participate of a double-blind pilot study. We observed that patients receiving SP by intracervical and intravaginal routes at the time of oocyte retrieval, showed greater pregnancy rates when compared to the control group (saline). The molecular mechanisms underlying the conditioning effect of SP, which could explain the 45% relative increase in pregnancy rate in patients receiving local seminal plasma treatment, remain to be established.

Introdução: O desenvolvimento de técnicas de Reprodução Assistida, que consistem em todos os tipos de tratamento que incluem a manipulação in vitro (no laboratório) em alguma fase do processo, de gametas masculinos (espermatozóides), femininos (oócitos) ou embriões, tem favorecido com que casais inférteis tenham a possibilidade de alcançar a gravidez. Estas técnicas permitem a doação de óvulos, doação de sêmen, adoção de embriões ou útero de substituição, o que na prática, favoreceu o surgimento de novas formas de parentalidade e conjugalidade (paternidade homoparental, famílias uniparentais, produção independente, filho de Reprodução Assistida). Objetivo: verificar em uma amostra brasileira a freqüência e fatores implicados na intenção de revelar ou não revelar à criança acerca da maneira como foi gerada, ou seja, através de uma das técnicas de Reprodução Assistida. Método: estudo transversal, desenvolvido no Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), Clínica particular (SEGIR) Serviço de Ecografia, Genética e Reprodução Humana, em Porto Alegre e Centro de Reprodução Humana (FERTIVITRO) em São Paulo. Aceitaram participar do estudo 37 mães e 28 pais que responderam a um questionário semi-estruturado. Resultados: 96,8% desta amostra brasileira de famílias homólogas têm a intenção de revelar acerca do método utilizado, resultado diametralmente oposto de estudos internacionais. Além disto, obtivemos respostas mais elaboradas ao explorar os aspectos qualitativos. Vimos que o estigma da infertilidade é um mecanismo não resolvido e pode ser um importante fator que poderá influir posteriormente na decisão de contar ou não contar. Considerações finais: Os resultados são opostos de todos os estudos internacionais e necessitam de novos estudos para avaliar tal discrepância. O estigma da infertilidade ainda é um tema que necessita ser melhor abordado no caso de uso de métodos de Reprodução Assistida. Além disto, a equipe envolvida no acompanhamento destes casais deve estar atenta para esta temática, na medida em que estas famílias tendem a sobrepor o discurso da tecnologia em relação ao vinculo pais e filhos e as ansiedades decorrentes da expectativa de ser pai e mãe. / Introduction: The development of techniques in assisted reproduction, which consist of all types of treatment that include the manipulation in vitro (laboratory) at some stage, the male gametes (Sperm), female (oocytes) or embryos, has been helping infertile couples to get pregnancy. These techniques allow the egg donation, sperm donation, embryo adoption or replacement uterus, which in practice favored the emergence of new forms of parenting and marital status (paternity homoparental, single-parent families, independent production, child of Assisted Reproduction ). Objective: To verify in a Brazilian sample the frequency and factors associated with the intention to disclose or not disclose the child about the way it was generated, in other words, through one of the techniques of assisted reproduction. Method: cross sectional study, developed at Hospital de Clinicas de Porto Alegre (HCPA), Federal University of São Paulo (UNIFESP), Private Clinic (SEGIR) Ultrasound Service, Genetics and Human Reproduction in Porto Alegre and Center for Human Reproduction (FERTIVITRO ) in São Paulo. Agreed to participate in the study 37 mothers and 28 fathers who responded to a semi-structured questionnaire. Results: 96.8% of this sample of Brazilian homologous families are intended to reveal about the method used, diametrically opposite result of international studies. Moreover, we obtained more elaborate responses to explore the qualitative aspects. We saw that the stigma of infertility is a not solved mechanism and may be an important factor that could influence later in the decision of telling or not telling. Conclusion: The results are opposite of all the international studies and need further studies to evaluate such discrepancy. The stigma of infertility is still an issue that needs to be better addressed in the case of using methods of assisted reproduction. In addition, the team involved in monitoring these couples should monitor this issue, once these families tend to overlap the speech of technology in relation to bond parents and children and the anxieties arising from the expectation of being a father and mother.

Introdução: O desenvolvimento de técnicas de Reprodução Assistida, que consistem em todos os tipos de tratamento que incluem a manipulação in vitro (no laboratório) em alguma fase do processo, de gametas masculinos (espermatozóides), femininos (oócitos) ou embriões, tem favorecido com que casais inférteis tenham a possibilidade de alcançar a gravidez. Estas técnicas permitem a doação de óvulos, doação de sêmen, adoção de embriões ou útero de substituição, o que na prática, favoreceu o surgimento de novas formas de parentalidade e conjugalidade (paternidade homoparental, famílias uniparentais, produção independente, filho de Reprodução Assistida). Objetivo: verificar em uma amostra brasileira a freqüência e fatores implicados na intenção de revelar ou não revelar à criança acerca da maneira como foi gerada, ou seja, através de uma das técnicas de Reprodução Assistida. Método: estudo transversal, desenvolvido no Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), Clínica particular (SEGIR) Serviço de Ecografia, Genética e Reprodução Humana, em Porto Alegre e Centro de Reprodução Humana (FERTIVITRO) em São Paulo. Aceitaram participar do estudo 37 mães e 28 pais que responderam a um questionário semi-estruturado. Resultados: 96,8% desta amostra brasileira de famílias homólogas têm a intenção de revelar acerca do método utilizado, resultado diametralmente oposto de estudos internacionais. Além disto, obtivemos respostas mais elaboradas ao explorar os aspectos qualitativos. Vimos que o estigma da infertilidade é um mecanismo não resolvido e pode ser um importante fator que poderá influir posteriormente na decisão de contar ou não contar. Considerações finais: Os resultados são opostos de todos os estudos internacionais e necessitam de novos estudos para avaliar tal discrepância. O estigma da infertilidade ainda é um tema que necessita ser melhor abordado no caso de uso de métodos de Reprodução Assistida. Além disto, a equipe envolvida no acompanhamento destes casais deve estar atenta para esta temática, na medida em que estas famílias tendem a sobrepor o discurso da tecnologia em relação ao vinculo pais e filhos e as ansiedades decorrentes da expectativa de ser pai e mãe. / Introduction: The development of techniques in assisted reproduction, which consist of all types of treatment that include the manipulation in vitro (laboratory) at some stage, the male gametes (Sperm), female (oocytes) or embryos, has been helping infertile couples to get pregnancy. These techniques allow the egg donation, sperm donation, embryo adoption or replacement uterus, which in practice favored the emergence of new forms of parenting and marital status (paternity homoparental, single-parent families, independent production, child of Assisted Reproduction ). Objective: To verify in a Brazilian sample the frequency and factors associated with the intention to disclose or not disclose the child about the way it was generated, in other words, through one of the techniques of assisted reproduction. Method: cross sectional study, developed at Hospital de Clinicas de Porto Alegre (HCPA), Federal University of São Paulo (UNIFESP), Private Clinic (SEGIR) Ultrasound Service, Genetics and Human Reproduction in Porto Alegre and Center for Human Reproduction (FERTIVITRO ) in São Paulo. Agreed to participate in the study 37 mothers and 28 fathers who responded to a semi-structured questionnaire. Results: 96.8% of this sample of Brazilian homologous families are intended to reveal about the method used, diametrically opposite result of international studies. Moreover, we obtained more elaborate responses to explore the qualitative aspects. We saw that the stigma of infertility is a not solved mechanism and may be an important factor that could influence later in the decision of telling or not telling. Conclusion: The results are opposite of all the international studies and need further studies to evaluate such discrepancy. The stigma of infertility is still an issue that needs to be better addressed in the case of using methods of assisted reproduction. In addition, the team involved in monitoring these couples should monitor this issue, once these families tend to overlap the speech of technology in relation to bond parents and children and the anxieties arising from the expectation of being a father and mother.

Introdução: O desenvolvimento de técnicas de Reprodução Assistida, que consistem em todos os tipos de tratamento que incluem a manipulação in vitro (no laboratório) em alguma fase do processo, de gametas masculinos (espermatozóides), femininos (oócitos) ou embriões, tem favorecido com que casais inférteis tenham a possibilidade de alcançar a gravidez. Estas técnicas permitem a doação de óvulos, doação de sêmen, adoção de embriões ou útero de substituição, o que na prática, favoreceu o surgimento de novas formas de parentalidade e conjugalidade (paternidade homoparental, famílias uniparentais, produção independente, filho de Reprodução Assistida). Objetivo: verificar em uma amostra brasileira a freqüência e fatores implicados na intenção de revelar ou não revelar à criança acerca da maneira como foi gerada, ou seja, através de uma das técnicas de Reprodução Assistida. Método: estudo transversal, desenvolvido no Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), Clínica particular (SEGIR) Serviço de Ecografia, Genética e Reprodução Humana, em Porto Alegre e Centro de Reprodução Humana (FERTIVITRO) em São Paulo. Aceitaram participar do estudo 37 mães e 28 pais que responderam a um questionário semi-estruturado. Resultados: 96,8% desta amostra brasileira de famílias homólogas têm a intenção de revelar acerca do método utilizado, resultado diametralmente oposto de estudos internacionais. Além disto, obtivemos respostas mais elaboradas ao explorar os aspectos qualitativos. Vimos que o estigma da infertilidade é um mecanismo não resolvido e pode ser um importante fator que poderá influir posteriormente na decisão de contar ou não contar. Considerações finais: Os resultados são opostos de todos os estudos internacionais e necessitam de novos estudos para avaliar tal discrepância. O estigma da infertilidade ainda é um tema que necessita ser melhor abordado no caso de uso de métodos de Reprodução Assistida. Além disto, a equipe envolvida no acompanhamento destes casais deve estar atenta para esta temática, na medida em que estas famílias tendem a sobrepor o discurso da tecnologia em relação ao vinculo pais e filhos e as ansiedades decorrentes da expectativa de ser pai e mãe. / Introduction: The development of techniques in assisted reproduction, which consist of all types of treatment that include the manipulation in vitro (laboratory) at some stage, the male gametes (Sperm), female (oocytes) or embryos, has been helping infertile couples to get pregnancy. These techniques allow the egg donation, sperm donation, embryo adoption or replacement uterus, which in practice favored the emergence of new forms of parenting and marital status (paternity homoparental, single-parent families, independent production, child of Assisted Reproduction ). Objective: To verify in a Brazilian sample the frequency and factors associated with the intention to disclose or not disclose the child about the way it was generated, in other words, through one of the techniques of assisted reproduction. Method: cross sectional study, developed at Hospital de Clinicas de Porto Alegre (HCPA), Federal University of São Paulo (UNIFESP), Private Clinic (SEGIR) Ultrasound Service, Genetics and Human Reproduction in Porto Alegre and Center for Human Reproduction (FERTIVITRO ) in São Paulo. Agreed to participate in the study 37 mothers and 28 fathers who responded to a semi-structured questionnaire. Results: 96.8% of this sample of Brazilian homologous families are intended to reveal about the method used, diametrically opposite result of international studies. Moreover, we obtained more elaborate responses to explore the qualitative aspects. We saw that the stigma of infertility is a not solved mechanism and may be an important factor that could influence later in the decision of telling or not telling. Conclusion: The results are opposite of all the international studies and need further studies to evaluate such discrepancy. The stigma of infertility is still an issue that needs to be better addressed in the case of using methods of assisted reproduction. In addition, the team involved in monitoring these couples should monitor this issue, once these families tend to overlap the speech of technology in relation to bond parents and children and the anxieties arising from the expectation of being a father and mother.

Resumo não disponível

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A maturação in vitro (MIV) de oócitos é uma técnica de Reprodução Assistida (RA) que apresenta inúmeras vantagens e aplicabilidades. No entanto, a qualidade dos gametas imaturos que são destinados a ela é bastante divergente, tornando-se necessário o desenvolvimento de técnicas que auxiliem na seleção dos gametas competentes, ou seja, aptos à MIV. A partir do conhecimento de que oócitos em fase de crescimento apresentam alta atividade específica da enzima glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PDH), e que oócitos que finalizaram seu crescimento apresentam baixa atividade específica dessa enzima, foi proposta a coloração dos gametas com o corante Azul Cresil Brilhante (BCB) como método de seleção dos oócitos competentes. Esse corante é capaz de ser metabolizado pela G6PDH, resultando na coloração dos gametas capacitados (classificados como BCB positivo), mas não dos gametas que ainda estão em fase de crescimento, que permanecem incolores e são classificados como BCB negativo. Em animais, foi demonstrado que essa técnica permite selecionar melhor os gametas e, consequentemente, aumentar não só as taxas de maturação oocitária nuclear e citoplasmática, como também as taxas de fertilização, de formação de blastocisto e de nascidos vivos. No entanto, apenas modelos animais foram utilizados até o presente momento. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência e a segurança da exposição de gametas humanos ao BCB como método de seleção de gametas competentes antes da MIV. Para isso, três diferentes perfis de pacientes tiveram seus oócitos imaturos incluídos no estudo: 6 pacientes cuja ovulação foi induzida e gametas imaturos foram captados (17 oócitos); 3 pacientes ooforectomizadas (20 oócitos recuperados); e 32 gestantes cujos oócitos foram captados durante a cesareana (92 oócitos recuperados). Os oócitos imaturos foram divididos em dois grupos: controle (colocado imediatamente para MIV) e tratado – exposto a 26 μM de BCB por 60 minutos. Após coloração, de acordo com a coloração do citoplasma, o grupo tratado foi classificado em BCB positivo ou negativo e destinado à MIV. Após 24 e 48 horas de MIV, foi avaliado o grau de maturação nuclear. A taxa de MIV dos oócitos recuperados de pacientes estimuladas e ooforectomizadas foi igual entre os grupos após 24 e 48 horas. No entanto, a taxa de MIV foi significativamente superior no grupo BCB positivo quando comparado com o grupo BCB negativo, tanto para os oócitos de todas as pacientes (P = 0,024 e P = 0,015) como quando os oócitos das gestantes (P = 0,004 e P = 0,032) foram avaliados separadamente, após 24 e 48 horas de MIV, respectivamente. O grupo controle foi similar ao grupo BCB positivo. A taxa de retomada de meiose (ausência de vesícula germinativa) após 24 horas foi igual entre os grupos, independente da fonte de recuperação dos gametas. Contudo, ao avaliar todos os gametas após 48 horas de MIV, a taxa de retomada de meiose foi superior no grupo BCB positivo, quando comparado com os demais grupos (P = 0,035). Quando os oócitos foram avaliados em conjunto, o grupo BCB positivo apresentou as menores taxas de degeneração (P = 0,002). Tendo em vista os resultados obtidos, podemos concluir que o BCB pode ser um bom marcador na seleção de oócitos humanos competentes e não é tóxico para o gameta humano. / The in vitro maturation (IVM) is an Assisted Reproduction Technique (ART) that presents many advantages. However, the quality of immature oocytes destined to IVM is very divergent. That’s why pre-selection procedures of developmentally competent oocytes are important. Growing oocytes synthesize glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PDH), but this enzyme is inactivated in oocytes that have completed their growth phase. Once Brilliant Cresyl Blue (BCB) can be reduced by G6PDH, it is suggested that BCB staining can select fully grown oocytes, when exposed to BCB – the cytoplasm of these eggs will appear blue, being classified as BCB positive, whereas oocytes still in growth phase will not be stained (cytoplasm will appear colourless, being classified as BCB negative). It has been already demonstrated that this selection can improve not only nuclear and cytoplasmic oocyte maturation, but also fertilization and blastocyst rates. However, only animal models were utilized until the present. Consequently, the aim of the experiment was to evaluate the efficiency and safety of BCB staining as a selection of developmentally competent immature human oocytes before IVM. Three kinds of patients were included in the study: 6 hormonal stimulated patients with immature oocytes at retrieval (17 oocytes); 3 ooforectomized patients (20 oocytes recovered); and 32 pregnant patients during cesarean section (92 oocytes recovered). Immature oocytes were divided into groups: control (disposed directly to IVM) and treated - exposed to BCB 26μM during 60 minutes. After staining, treated group was classified as cytoplasm coloration, BCB positive or negative, and then disposed to IVM. After 24 and 48 hours of IVM, nuclear status was checked. The IVM rate of immature oocytes recovered from stimulated and ooforectomized patients was equal among groups either after 24 or 48 hours of IVM. Nevertheless, IVM was higher in BCB positive compared to BCB negative after 24 and 48 hours of IVM analyzing oocytes recovered from all patients (P = 0.024 and P = 0.015), and from cesarean patients (P = 0.004 and P = 0.032). The control group was equal to BCB positive. The meiosis resumption rate (absence of germinal vesicle) after 24 hours of IVM was equal among groups, but higher in BCB positive compared to other groups after 48 hours when all gametes were analyzed jointly (P = 0.035). Degeneration rate was lower in BCB positive compared to their counterparts when oocytes were analyzed jointly (P = 0.002). In conclusion, BCB test can be a good marker in pre-selection procedures of developmentally competent human oocytes and, apparently, it is not toxic to the gamete.