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Production inductible d'anhydrase carbonique par Pichia pastoris

Boudreau, Vanessa 18 April 2018 (has links)
Une alternative intéressante pour la capture du dioxyde de carbone réside dans l'utilisation de l'anhydrase carbonique pour produire du bicarbonate. Un des goulots d'étranglement du procédé se situe au niveau de la quantité élevée d'enzyme nécessaire. Pour résoudre ce problème, un système d'expression inductible d'anhydrase carbonique humaine de type II utilisant Pichia pastoris (P. pastoris) a été développé, ce qui permettrait éventuellement une production intégrée à moindre coût de l'enzyme. Les cinétiques de croissance et de production du nouveau système d'expression ont été caractérisées par le moyen de cultures en bioréacteur complètement automatisé. Deux constructions ont été sélectionnées et comparées dans cette étude. Une production de l'ordre du gramme d'enzyme par litre, purifiée selon deux étapes simples (clarification et concentration) a été obtenue. Le coût du milligramme de protéine obtenue est estimé à moins d'un dollar.

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