Tetraciklinų nustatymas piene atliktas efektyviąja skysčių chromatografija ir įteisintas remiantis ES išleista direktyva 2002/657/EB. Metodas atitinka visus kriterijus aprašytus šioje direktyvoje. Antibakterinių medžiagų likučiai iš pieno ekstrahuojami Mcllvaine-EDTA buferiniu tirpalu, o po to valymas atliekamas naudojant OASIS HLB kietafazės ekstrakcijos kolonėles. Chromatografinėje kolonėlėje atskyrimas atliekamas naudojant 10 mM oksalo rūgšties vandeninio tirpalo ir ACN gradientinį režimą, tėkmės greitis 0,9 ml/min, 100 μl injekcija, bangos ilgis 355 nm ir optimali kolonėlės temperatūra (LiChroCART Superspher 60 RP C8 (250 x 4,6 mm, dalelių dydis 5 m)) – 30 oC. Visi rezultatai apskaičiuoti naudojant kompiuterinę duomenų apdorojimo programą “Interval”. Tetraciklinų išgavos nuo 86,20 % iki 107,19 %, o nustatymo ribos yra intervale nuo 26,7 μg/l iki 49,3 μg/l. / Analysis of tetracycline compounds was performed using high performance liquid chromatography and validated according to EU commition decision 2002/657/EC. Method is compliant at all criteria described in the decision. Antibacterial material residues were extracted from milk with Mcllvaine-EDTA buffer followed by clean-up on OASIS HLB cartridges. Separation was performed using 10 mM oxalic acid/ACN gradient with flow rate 0.9 ml/min, 100 μl injection, detection at 355 nm and the optimal temperature of column (LiChroCART Superspher 60 RP C8 (250 x 4.6 mm, size of particles 5 m)) – 30 oC. All the results were evaluated statistically with “Interval” data processing program. Recoveries are at the range from 86.20 % to 107.19 %. The determination limits for tetracyclines were carried out from 26.7 μg/L to 49.3 μg/L in this study.