Os óleos essenciais provenientes de plantas da flora Latino-americana, têm-se apresentado como candidatos à utilização em formulações cosméticas como fragrâncias, promotores de permeação cutânea, antioxidantes e conservantes naturais. A segurança de componentes da formulação deve ser avaliada por testes toxicológicos validados, que geram resultados reprodutíveis e confiáveis. Os ensaios de citotoxicidade (OECD/GD 129), fototoxicidade in vitro (OECD 432), micronúcleo in vitro (OECD 487) e atividade antioxidante intracelular correspondem a métodos alternativos pautados nos princípios dos 3R\'s: Refinament ou Refinamento; Reduction ou Redução; e Replacement ou Substituição. Com essa diretriz, o objetivo proposto foi avaliar a citotoxicidade, a fototoxicidade in vitro, o potencial genotóxico e a atividade antioxidante intracelular dos óleos essenciais das espécies Minthostachys setosa (Briq.) Epling, Pimenta pseudocaryophyllus (Gomes) Landrum e Drimys brasiliensis Miers provenientes de plantas da flora Latino-americana, candidatos ao uso em cosméticos. Os óleos essenciais foram extraídos por hidrodestilação e foi avaliada a sua dispersão em meio de cultura. A partir dos resultados dos ensaios de citotoxicidade na linhagem BALB/3T3 clone A31, foi calculado o valor de concentração que inibe e 50 % (IC50) de células desafiadas. Na avaliação da fototoxicidade in vitro na linhagem BALB/3T3 clone A31 e no ensaio do micronúcleo in vitro na linhagem CHO-K1, verificou-se respectivamente, os potenciais fototóxico e genotóxico das amostras. Com exceção do óleo essencial da Drimys brasiliensis, a atividade antioxidante foi avaliada na linhagem WS1. Os óleos essenciais da Minthostachys setosa, Pimenta pseudocaryophyllus e Drimys brasiliensis não apresentaram potencial citototóxico, fototóxico e genotóxico, além disso, a atividade antioxidante foi expressiva para Pimenta pseudocaryophyllus. / Essential oils from plants flora Latin America, have been presented as candidates for use in cosmetic formulations as fragrances, skin permeation enhancers, antioxidants and natural preservatives. The safety of the formulation components should be assessed by validated toxicological tests. The cytotoxicity assays (OECD/GD 129), in vitro phototoxicity (OECD 432), in vitro micronucleus (OECD 487) and intracellular antioxidant activity correspond to alternative methods guided by the 3R\'s principles: Refinament, Reduction and Replacement. In this scenario, the proposed objective was to evaluate the cytotoxicity, phototoxicity in vitro, the genotoxic potential and intracellular antioxidant activity of Minthostachys setosa (Briq.) Epling, Pimenta pseudocaryophyllus (Gomes) Landrum and Drimys brasiliensis Miers essential oils, from Latin American plants candidates for use in cosmetics. The essential oils were extracted by hydrodistillation and its dispersion was evaluated in culture medium. The results obtained in cytotoxicity assays on line BALB/3T3 clone A31 was calculated the IC50. In vitro phototoxicity in BALB/3T3 clone A31 cell line and the micronucleus assay in vitro in the CHO-K1 cell line, it was verify phototoxic and genotoxic potential, respectively. With the exception of essential oil Drimys brasiliensis, the intracellular antioxidant activity was assessed in WS1 cell lines. In conclusion Minthostachys setosa, Pimenta pseudocaryophyllus and Drimys brasiliensis Miers essential oils showed no cytotoxic, phototoxic and genotoxic potential, moreover, the antioxidant activity was expressive for Pimenta pseudocaryophyllus.

Os óleos essenciais provenientes de plantas da flora Latino-americana, têm-se apresentado como candidatos à utilização em formulações cosméticas como fragrâncias, promotores de permeação cutânea, antioxidantes e conservantes naturais. A segurança de componentes da formulação deve ser avaliada por testes toxicológicos validados, que geram resultados reprodutíveis e confiáveis. Os ensaios de citotoxicidade (OECD/GD 129), fototoxicidade in vitro (OECD 432), micronúcleo in vitro (OECD 487) e atividade antioxidante intracelular correspondem a métodos alternativos pautados nos princípios dos 3R\'s: Refinament ou Refinamento; Reduction ou Redução; e Replacement ou Substituição. Com essa diretriz, o objetivo proposto foi avaliar a citotoxicidade, a fototoxicidade in vitro, o potencial genotóxico e a atividade antioxidante intracelular dos óleos essenciais das espécies Minthostachys setosa (Briq.) Epling, Pimenta pseudocaryophyllus (Gomes) Landrum e Drimys brasiliensis Miers provenientes de plantas da flora Latino-americana, candidatos ao uso em cosméticos. Os óleos essenciais foram extraídos por hidrodestilação e foi avaliada a sua dispersão em meio de cultura. A partir dos resultados dos ensaios de citotoxicidade na linhagem BALB/3T3 clone A31, foi calculado o valor de concentração que inibe e 50 % (IC50) de células desafiadas. Na avaliação da fototoxicidade in vitro na linhagem BALB/3T3 clone A31 e no ensaio do micronúcleo in vitro na linhagem CHO-K1, verificou-se respectivamente, os potenciais fototóxico e genotóxico das amostras. Com exceção do óleo essencial da Drimys brasiliensis, a atividade antioxidante foi avaliada na linhagem WS1. Os óleos essenciais da Minthostachys setosa, Pimenta pseudocaryophyllus e Drimys brasiliensis não apresentaram potencial citototóxico, fototóxico e genotóxico, além disso, a atividade antioxidante foi expressiva para Pimenta pseudocaryophyllus. / Essential oils from plants flora Latin America, have been presented as candidates for use in cosmetic formulations as fragrances, skin permeation enhancers, antioxidants and natural preservatives. The safety of the formulation components should be assessed by validated toxicological tests. The cytotoxicity assays (OECD/GD 129), in vitro phototoxicity (OECD 432), in vitro micronucleus (OECD 487) and intracellular antioxidant activity correspond to alternative methods guided by the 3R\'s principles: Refinament, Reduction and Replacement. In this scenario, the proposed objective was to evaluate the cytotoxicity, phototoxicity in vitro, the genotoxic potential and intracellular antioxidant activity of Minthostachys setosa (Briq.) Epling, Pimenta pseudocaryophyllus (Gomes) Landrum and Drimys brasiliensis Miers essential oils, from Latin American plants candidates for use in cosmetics. The essential oils were extracted by hydrodistillation and its dispersion was evaluated in culture medium. The results obtained in cytotoxicity assays on line BALB/3T3 clone A31 was calculated the IC50. In vitro phototoxicity in BALB/3T3 clone A31 cell line and the micronucleus assay in vitro in the CHO-K1 cell line, it was verify phototoxic and genotoxic potential, respectively. With the exception of essential oil Drimys brasiliensis, the intracellular antioxidant activity was assessed in WS1 cell lines. In conclusion Minthostachys setosa, Pimenta pseudocaryophyllus and Drimys brasiliensis Miers essential oils showed no cytotoxic, phototoxic and genotoxic potential, moreover, the antioxidant activity was expressive for Pimenta pseudocaryophyllus.

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmacology and Toxicology Student: Kateřina Kafuňková Supervisor: RNDr. Jana Maixnerová, Ph.D. Title of diploma thesis: Evaluation of liver toxicity in vitro The subject of the diploma thesis is toxicity evaluation of newly synthesised substances on a cellular model representing a hepatocyte. The tested substances have been provided by the Department of Organic and Bioorganic Chemistry at the Faculty of Pharmacy in Hradec Králové, Charles University, as potential antifungal pharmaceuticals and medicine effective against Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MK-NO2-1, MK-NO2-2, DAB-5-K, PABA-Me-5, PABA-Et-5, MK-F-1, PABAN- 3, PABAN-5, MK-F-2, MK-CF3-1, MK-CF3- 2). In order to determine the toxicity we have implemented two methods. The first method is based upon measuring metabolic activity of cells by means of reducing tetrazolium to a colored product. The second method detects the amount of LDH released as a marker of toxicity. The human hepatoma cell line HepG2was used as a model. . The IC50 and EC50 parameters were used to assess the degree of viability and cytotoxicity. The final values obtained from the first method indicated all tested substances showed a certain level of toxicity to the hepatic tissue. MK-CF3-2 is the most...