FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / A doenÃa de Chagas à causada pelo parasito intracelular Trypanosoma cruzi e afeta em torno de 17 milhÃes de pessoas na AmÃrica Latina. A fase crÃnica da doenÃa caracteriza-se por baixo nÃvel de parasitemia e alto nÃvel de anticorpos Anti-T.cruzi e o diagnÃstico à feito preferencialmente utilizando-se mÃtodos sorolÃgicos, incluindo imunofluorescÃncia indireta (IFI), hemaglutinaÃÃo indireta (HAI) e imunoensaio enzimÃtico (ELISA). SÃo testes que apresentam alta sensibilidade, mas sofrem de baixa especificidade, e um variÃvel nÃmero de indivÃduos apresenta testes sorolÃgicos inconclusivos. Nos Ãltimos anos, muitos estudos tÃm usado a tecnologia da ReaÃÃo em Cadeia da Polimerase (PCR) para detectar sequÃncias de DNA de T. cruzi em sangue de pacientes chagÃsicos crÃnicos. A alta especificidade da PCR tem apontado para sua aplicaÃÃo como mÃtodo confirmatÃrio no diagnÃstico de pacientes com provas sorolÃgicas inconclusivas. O objetivo desse trabalho foi realizar uma anÃlise comparativa entre a PCR e os mÃtodos convencionais mais utilizados para o diagnÃstico - sorologia e xenodiagnÃstico, na detecÃÃo da infecÃÃo por T. cruzi, em indivÃduos com doenÃa de Chagas crÃnica. Sangue de 67 pacientes chagÃsicos crÃnicos, ambos os sexos, provenientes do ambulatÃrio de doenÃa de Chagas do Hospital UniversitÃrio Walter CantÃdio, da Universidade Federal do CearÃ, foram avaliados para T. cruzi, utilizando testes sorolÃgicos (IFI, HAI e ELISA), PCR-Multiplex e xenodiagnÃstico. AlÃm disso, foi avaliado tambÃm a PCR-Multiplex em dejetos de triatomÃneos provenientes do xenodiagnÃstico destes pacientes. De acordo com o resultado dos testes sorolÃgicos, os pacientes foram classificados em 3 grupos: 1Â. Sorologia positiva (quando 2 ou 3 resultados dentre os 3 testes sorolÃgicos foram positivos), 2Â. Sorologia inconclusiva ou indeterminado (apenas 2 resultados foram negativos) e 3Â. Sorologia negativa (quando os 3 resultados foram negativos). Dentre as 59 amostras com sorologia positiva foram obtidos 18 (30,5%) resultados positivos de PCR-Multiplex em sangue perifÃrico e 41 (69,5%) resultados negativos. Nos PCR-Multiplex em dejetos de triatomÃneos foram obtidos 20 (33,9%) resultados positivos e 39 (66,1%) resultados negativos. As 2 amostras com sorologia inconclusiva foram negativas na PCR-Multiplex, tanto em sangue perifÃrico como em dejetos de triatomÃneos. As amostras com sorologia negativa (n=6) apresentaram 2 resultados positivos (33,3%) na PCR-Multiplex em sangue e 4 resultados negativos (66,7%). Nos dejetos de triatomÃneos, as 6 amostras com sorologia negativa foram negativas na PCR-Multiplex. Estes resultados mostraram que o ensaio da PCR-Multiplex em amostras de sangue perifÃrico e em dejetos de triatomÃneos, empregando iniciadores para regiÃes diferentes, no caso, DNA nuclear e DNA do cinetoplasto, podem ser aplicados para o diagnÃstico da doenÃa de Chagas crÃnica (mesmo com diferentes metodologias de extraÃÃo de DNA total). Os dados mostraram tambÃm que a PCR-Multiplex em dejetos de triatomÃneos à mais sensÃvel que o ensaio do xenodiagnÃstico.

The Human Chagas disease still affects a great number of people around the world, and the Northeast of Brazil has attracted the attention of public health authorities, due to the presence of native insects and dwellings of poor quality, prone to colonization of triatomines responsible for transmission of this disease. Aiming to check the infection rate of triatomines and research the human infection with Trypanosoma cruzi in a rural area of Tobias Barreto in the southern state of Sergipe, was developed a study with two model approaches. Initially retrospective data were collected at the Laboratório Central de Sergipe to identify the species and the infection rate of triatomines with Trypanosoma cruzi in this municipality. The species found were: Triatoma pseudomaculata, Triatoma tibiamaculata, Triatoma melanocephala, Panstrongylus megistus, Panstrongylus lutzi and Panstrongylus geniculates. It was observed a wide variation in the rate of infection in different species - 31.2 to 100.0% (from 2006 to 2011). Proceeded with a cross-sectional study involving 235 individuals, aged 1-30 years old, in the villages of Alagoinhas and Poço da Clara. We collected blood samples from 235 individuals of this population. These samples were submitted to serological tests for Chagas Disease (ELISA and indirect immunofluorescence), but did not identify the disease in the population studied. It is possible that this seronegativity is result of factors such as young age (under 30 years), vector-parasite interaction (with lower rates of metacyclogenesis) or the influence of host genetics in susceptibility to infection. It wasn´t detected human infection in the population aged 1-30 years old, despite high infection rate of triatomines with Trypanosoma cruzi in the region, suggesting no recent transmission of the Chagas Disease. / A Doença de Chagas Humana ainda atinge um grande número de pessoas em todo o mundo, sendo que a região Nordeste do Brasil tem despertado atenção das autoridades em saúde pública, devido à presença de triatomíneos autóctones e moradias de baixa qualidade, propícias à colonização de triatomíneos transmissores desta doença. Com o objetivo de verificar a taxa de infecção triatomínica e a pesquisa de infecção humana por Trypanosoma cruzi em uma área rural de Tobias Barreto, sul do Estado de Sergipe, foi realizado um estudo com dois modelos de abordagem. Inicialmente foram coletados dados retrospectivos no Laboratório Central de Sergipe para identificar as espécies e a taxa de infecção dos triatomíneos por Trypanosoma cruzi neste município. As espécies encontradas foram: Triatoma pseudomaculata, Triatoma tibiamaculata, Triatoma melanocephala, Panstrongylus megistus, Panstrongylus lutzi e Panstrongylus geniculates. Foi encontrada grande variação na taxa de infecção nas diferentes espécies - 31,2 a 100,0% (no período de 2006 a 2011). Prosseguiu-se com a realização de estudo transversal, envolvendo 235 indivíduos, com idades entre 1 a 30 anos, nos povoados Alagoinhas e Poço da Clara. Foram coletadas amostras de sangue dos 235 indivíduos desta população. Estas amostras foram submetidas aos testes sorológicos para Doença de Chagas (ELISA e Imunofluorescência Indireta), contudo, não se identificou a infecção na população estudada. É possível que essa soronegatividade seja resultado de fatores como: faixa etária jovem (menor de 30 anos), interação parasito-vetor (menores taxas de metaciclogênese) ou a influência das características genéticas do hospedeiro na susceptibilidade à infecção. Não foi detectada a infecção humana na população entre 1 a 30 anos de idade, apesar da elevada taxa de infecção dos triatomíneos pelo Trypanosoma cruzi na região, sugerindo não haver transmissão recente da doença.