Foi realizado um estudo em resistência bacteriana, com um enfoque especial para o Mycobacterium tuberculosis. Fez-se também uma apreciação das implicações clínicas do fenômeno à luz de levantamentos realizados no Brasil e no exterior. Discutiram-se os testes de sensibilidade, examinando-se seu posicionamento nos programas de saúde pública e em medicina individual. Par atestar a sensibilidade dos bacilos isolados a partir de amostras de escarro de tuberculosos não tratados previamente, empregou-se o método das proporções de Canetti, Rist e Grosset. As drogas utilizadas foram a estreptomicina, hidrazida, rifampicina, estambutol e PAS. A resistência a uma ou mais de uma droga encontrada foi e 12,80%, com predomínio de germes resistentes a uma droga somente. Os medicamentos que com maior freqüência selecionaram mutantes resistentes foram a estreptomicina (6,40%) e hidrazida (5,60%). Os resultados encontrados mostraram semelhanças aos apontados por outros levantamentos.

Foi realizado um estudo em resistência bacteriana, com um enfoque especial para o Mycobacterium tuberculosis. Fez-se também uma apreciação das implicações clínicas do fenômeno à luz de levantamentos realizados no Brasil e no exterior. Discutiram-se os testes de sensibilidade, examinando-se seu posicionamento nos programas de saúde pública e em medicina individual. Par atestar a sensibilidade dos bacilos isolados a partir de amostras de escarro de tuberculosos não tratados previamente, empregou-se o método das proporções de Canetti, Rist e Grosset. As drogas utilizadas foram a estreptomicina, hidrazida, rifampicina, estambutol e PAS. A resistência a uma ou mais de uma droga encontrada foi e 12,80%, com predomínio de germes resistentes a uma droga somente. Os medicamentos que com maior freqüência selecionaram mutantes resistentes foram a estreptomicina (6,40%) e hidrazida (5,60%). Os resultados encontrados mostraram semelhanças aos apontados por outros levantamentos.

Foi realizado um estudo em resistência bacteriana, com um enfoque especial para o Mycobacterium tuberculosis. Fez-se também uma apreciação das implicações clínicas do fenômeno à luz de levantamentos realizados no Brasil e no exterior. Discutiram-se os testes de sensibilidade, examinando-se seu posicionamento nos programas de saúde pública e em medicina individual. Par atestar a sensibilidade dos bacilos isolados a partir de amostras de escarro de tuberculosos não tratados previamente, empregou-se o método das proporções de Canetti, Rist e Grosset. As drogas utilizadas foram a estreptomicina, hidrazida, rifampicina, estambutol e PAS. A resistência a uma ou mais de uma droga encontrada foi e 12,80%, com predomínio de germes resistentes a uma droga somente. Os medicamentos que com maior freqüência selecionaram mutantes resistentes foram a estreptomicina (6,40%) e hidrazida (5,60%). Os resultados encontrados mostraram semelhanças aos apontados por outros levantamentos.

Submitted by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2012-10-24T13:20:12Z No. of bitstreams: 1 chyntia_c_d_acosta_ioc_bcm_0014_2010.pdf: 6762215 bytes, checksum: eeda2289ddbc51f6797d64ab1bcdbead (MD5) / Made available in DSpace on 2012-10-24T13:20:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 chyntia_c_d_acosta_ioc_bcm_0014_2010.pdf: 6762215 bytes, checksum: eeda2289ddbc51f6797d64ab1bcdbead (MD5) Previous issue date: 2010 / CNPq Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud-Universidad Nacional de Asunción (IICS-UNA) / Fundação Oswaldo Cruz.Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A tuberculose (TB) é uma importante causa de mortalidade, sendo Mycobacterium tuberculosis (Mtb) o agente etiológico. Globalmente a família “Latin American- Mediterranean” (LAM) é responsável por aproximadamente 15% dos casos de TB. Dentro desta família, recentemente foi descrito um novo polimorfismo caracterizado por uma deleção de 26,3 kb e designado como LSP RDRio. Esta linhagem é freqüente (30%) no Rio de Janeiro e dados preliminares sugerem que cepas pertencentes a este genótipo apresentam maior virulência. Neste contexto, é de grande importância avaliar a distribuição e transmissibilidade deste genótipo em nível regional e global. O presente estudo descritivo teve como objetivo, primeiramente, estudar a variabilidade genética entre isolados de Mtb do Paraguai, da Argentina e da Venezuela pelas técnicas de Spoligotyping e MIRU-VNTR 12loci, países onde existe pouca informação sobre a presença e natureza de genótipos de Mtb. Outro foco abordado foi o estudo da família LAM, que alberga genótipos de grande importância em nível regional. Para detectar esta família recentemente foi descrito um novo marcador genético que implica o estudo da presença do SNP Ag85C (G103A) por PCR-RFLP. Este marcador pode servir como complemento ao método de Spoligotyping, para ajudar a classificar certos spoligotypes mal definidos ou convergentes. O mesmo pode também constituir uma alternativa rápida e simples para detectar isolados LAM, o que pode ser de grande importância para países de menos recursos. Finalmente, estudamos a freqüência da linhagem RDRio ao analisarmos além da presença do LSP RDRio, outros marcadores para esta linhagem como a deleção de RD174, a presença de 2 cópias alélicas no MIRU 2 e 1 cópia no MIRU 40 e genótipo LAM. Quanto ao primeiro objetivo, foi observada uma distribuição ampla diferença nas famílias de spoligotyping, de acordo com a região estudada. A maior taxa de agrupamentos de isolados observou-se na população de isolados venezuelanos, sugerindo um processo de transmissão contínua ou introdução de algumas linhagens muito tempo atrás. Quanto ao segundo objetivo, foi observado um comportamento variado do SNP Ag85C em referência ao seu papel como marcador da família LAM. Nos isolados paraguaios e venezuelanos houve um grau significativo de concordância com os resultados de spoligotyping enquanto nos pacientes argentinos houve baixa concordância. A relação entre a presença do SNP Ag85C (G103A) e o genótipo LAM, entretanto deve ser melhor estudada. Finalmente, foi observada a presença da linhagem RDRio nos três países, com maior frequência na Venezuela. A baixa freqüência no Paraguai chama a atenção e deve ser mais bem estudada. As características genéticas da linhagem RDRio, salvo poucas exceções, estiveram presentes nos isolados dos três países estudados. Após construção de árvores tipo MST com base nos spoligotypes, observamos, como previsto, a família LAM9 como nodo central que contem a linhagem RDRio e do qual derivam os outros subtipos da família LAM. No entanto, os agrupamentos dos isolados RDRio nos MST de MIRU-VNTR devem ser melhor estudados. Concluindo, no presente estudo descrevemos os genótipos circulantes de Mtb nos três países estudados. Os resultados geraram perguntas interessantes que devem ser abordados no futuro. / Tuberculosis (TB) still remains an important cause of death and its etiological agent is Mycobacterium tuberculosis (Mtb). Globally the “Latin American-Mediterranean” (LAM) accounts for 15% of the TB cases. Within this family, recently a new Long Sequence Polymorphism has been described, characterized by a 26,3kb deletion and assigned as RDRio-LSP. Currently this lineage constitutes the predominant clade (30%) of TB cases in Rio de Janeiro, and preliminary studies suggest that strains belonging to this genotype present enhanced virulence. Consequently it is of considerable importance to evaluate the distribution and the transmissibility of this genotype regionally as well as globally. The present descriptive study had three main objectives, starting with the study of the genetic variability of the Mtb strains of three Latin-American countries, Paraguay, Argentina, and Venezuela, with little information about the presence and nature of Mtb genotypes; by using spoligotyping and MIRU-VNTR 12 loci. The other focus was on the LAM family, which regionally is of extreme importance. To detect this family recently a new genetic marker has been described, which involves the detection of the SNP Ag85C (G103A) by PCR-RFLP. This marker allows classifying ill defined spoligopatterns or convergent spoligopatterns and it constitutes a simple and fast method, thus an important alternative in low resource countries. Finally our third goal was to study the prevalence of the RDRio lineage by analyzing the RDRio-LSP as well as other markers like the deletion of RD174, 2 allelic copies in MIRU 2 and 1 in MIRU 40, as well as LAM genotype. Regarding the first objective, the population structure obtained by spoligotyping varied considerably according to the geographical location.The highest clustering rate was detected within strains from Venezuela. As for the second objective, we observed a variable behavior of the SNP Ag85C as a marker for the LAM family. Both in strains from Paraguay and Venezuela, the marker had a significant concordance when compared with spoligotyping results. Nevertheless within Argentinean strains, the opposite was observed. Thus, the relationship between the presence of the Ag85C (G103A) SNP and the LAM genotype must be further studied. As for the third objective, we observed the presence of the RDRio lineage within the three countries, but with the highest prevalence in Venezuela. The low prevalence observed within Paraguayan strains deserves more studies. The genetic characteristics of the RDRio lineage were present within the RDRio strains of the three countries, with some few exceptions. Expectedly the construction of MST trees allowed us to observe a central node of the LAM9 family that contained the RDRio lineage and of which other sub-types of the LAM family derived. The nodes observed within the MST based on MIRU, must be further analyzed. In conclusion, we managed to describe the genotypes circulating within the three studied countries. From the results obtained, interesting questions were posed that should be analyzed in the future.