Orientadores: Ubirajara Ferreira, Wagner José Fávaro / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-27T12:56:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Stopiglia_RafaelMamprin_D.pdf: 6417556 bytes, checksum: 52b7e5f09e9aa811c8597b3dbd50aae3 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: Em diferentes tipos de cânceres uma população muito pequena de células tem sido reconhecida como células-tronco, por apresentarem capacidade de auto-renovação e diferenciação. Para o seu mapeamento, nos tumores uroteliais, diversos marcadores de superfície celular são utilizados para caracterizar tanto células-tronco normais (CTU) quanto cancerosas (CTC), destacando-se entre eles os antígenos de superfície CD44, CD117 e CD133 e o transportador de membrana do tipo ATP Binding Cassette (ABCG2). Com relação a sinalização dos receptores toll-like (TLRs) no câncer, ainda é uma questão controvertida, pois dados conflitantes os apontam como reguladores negativos ou positivos da carcinogênese. Assim, os objetivos principais do presente estudo foram caracterizar e comparar os perfis das potenciais células-tronco uroteliais e correlacioná-los com a expressão e sinalização dos TLRs 2 e 4 no câncer da bexiga urinária. Para isso, foram selecionados tecidos de bexiga humana sem lesões uroteliais e outras com tumores não-músculo invasivos e músculo invasivos e separadas 30 (trinta) amostras obtidas de homens na faixa etária de 50 a 80 anos (média de 61 anos). Dez dessas amostras de bexiga foram provenientes de necropsia de pacientes sem diagnóstico de lesão urotelial ou doença urológica. As outras 20 amostras vesicais foram obtidas de pacientes submetidos à ressecção transuretral (RTU) e cistectomia radical. Em seguida, divididos em 3 grupos com 10 amostras cada e assim denominados: Grupo Normal, Grupo Câncer Não-Músculo Invasivo e Grupo Câncer Músculo Invasivo de bexiga. E por fim, as amostras foram processadas e submetidas às análises histopatológicas e imunohistoquímicas. Os resultados observados são os seguintes: As imunorreatividades para CD44 e CD133 foram significativamente intensas no grupo câncer músculo invasivo quando relacionadas aos demais grupos. O biomarcador ABCG2 apresentou intensa imunorreatividade nos grupos não-músculo e músculo invasivos, enquanto que no grupo normal a imunorreatividade para esse biomarcador foi ausente. Fraca imunorreatividade para o biomarcador CD117 foi verificada tanto no grupo normal quanto nos grupos não-músculo e músculo invasivos. Assim, as potenciais CTC apresentaram positividade para CD44/CD133/ABCG2 e ocorreram somente nos grupos tumores não-músculo e músculo invasivos. Com relação à caracterização das células-tronco uroteliais normais (CTU), estas foram positivas para CD44/CD133/CD117 e ocorreram com maior frequência no grupo normal em relação aos grupos não-músculo e músculo invasivos. Portanto, os 4 receptores analisados foram reconhecidos como possíveis identificadores de células tronco normais e cancerosas na bexiga. Com relação a análise dos receptores toll-like, as imunorreatividades para TLR2 e TLR4 foram significativamente reduzidas no grupo de pacientes com câncer não-músculo e músculo invasivos, sendo que a imunorreatividade para TLR2 foi ausente neste último. Assim, verificamos que no desenvolvimento dos tumores vesicais a partir de células tronco cancerosas, essas puderam ser identificadas com os marcadores propostos neste estudo e também que a expressão dos receptores TLR 2 e 4 nesta população celular foi mínima ou ausente, atuando, provavelmente, como receptores negativos na carcinogênese urotelial. Como os TLR2 e 4 provavelmente atuaram como reguladores negativos da carcinogênese urotelial pode-se concluir que possivelmente a ocorrência das CTC foi sensível ao decréscimo das imunorreatividades para os TLR2 e TLR4 / Abstract: In different cancers a very small population of cells has been recognized as stem cells , since they have the capacity for self - renewal and differentiation. For their mapping in urothelial tumors, several cell surface markers are used to characterize both normal stem cells ( CTU ) and cancer ( CTC ) , foremost among them the surface antigens CD44 , CD117 and CD133 and membrane transporter ATP Binding Cassette type ( ABCG2 ) . Relationship with the signaling of toll-like receptors ( TLRs ) in cancer is still a controversial issue because conflicting data indicate them as negative or positive regulators of carcinogenesis . Thus, the main objectives of this study were to characterize and compare the profiles of urothelial stem cells and correlates them with the expression and signaling of TLRs in cancer of the urinary bladder . Tissues of human bladder urothelial lesions and no other separate tumors with invasive and invasive non- muscle and muscle were selected thirty (30 ) samples of men aged 50-80 years (mean 61 years). Ten of these samples were derived from autopsy bladder of patients without a diagnosis of urothelial injury or urologic disease. The other 20 bladder samples were obtained from patients undergoing transurethral resection (TURP ) and radical cystectomy. After this, divided into 3 groups with 10 samples each and named as follows: Normal Group , Group Non- Muscle Invasive Cancer Group and Muscle Invasive Bladder Cancer . Then, the samples were processed and subjected to histological and immunohistochemical analysis. The observed results are as follows: The imunorreatividades for CD44 and CD133 were significantly intense in group Muscle Invasive Cancer as related to the other groups. The ABCG2 biomarker groups showed intense immunoreactivity in Non- Muscle Invasive and muscle, while in the Normal group immunoreactivity was absent for that biomarker . Weak immunoreactivity for CD117 biomarker was observed both in the Normal group and the groups Non-Muscle Invasive and Muscle. Thus, CTC were positive for CD44/CD133/ABCG2 and occurred only in tumors groups Non- Muscle Invasive and Muscle. Regarding the characterization of normal urothelial stem cells ( CTU ), these were positive for CD44/CD133/CD117 and occurred more frequently in the Normal group in relation to groups and Non-Muscle Invasive Muscle. Therefore, the four receptors were analyzed for possible identifiers recognized as normal stem cells and bladder cancer . Regarding the analysis of toll-like receptors, TLR2 and TLR4 to imunorreatividades were significantly reduced in patients with Cancer and Non- Muscle Invasive Muscle, and the TLR2 immunoreactivity was absent in the latter . Thus, we see that the development of bladder tumors from stem cells cancerous, these cells could be identified with markers and also proposed that the expression of TLR receptors 2 e 4 this cell population was minimal or absent, acting probably as receptors negative in urothelial carcinogenesis. As TLR2 and 4 probably acted as negative regulators of urothelial carcinogenesis can be concluded that most likely the occurrence of the CTC was sensitive to the decrease in imunorreactivities for TLR2 and TLR4 / Doutorado / Fisiopatologia Cirúrgica / Doutor em Ciências