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Caracterização de substâncias fenólicas de resíduos de frutos amazônicos e avaliação para o uso biotecnológicoYamaguchi, Klenicy Kazumy de Lima 26 August 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-08-26 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / The use of natural products has increased in recent years because the
biological activities related to its chemical composition. However, an obstacle to
research is the amount of raw material available for large-scale production. Parallel
to this, the consumption of Amazonian fruits has gained space in national and
international markets and waste from pulp industries are growing proportionally. It
appears that little is known about the chemical composition of these products
generated and the biological activity of its extracts may have, which are usually
discarded in large quantities, resulting in environmental and economic problems. In
the present study we analyzed the composition of phenolic extracts of 19 fruits
Amazon, evaluating the antioxidant activity, antimicrobial and enzyme inhibition
aiming to biotechnological use. The most promising extracts were analyzed by
means of the detection and identification of substances in chromatographic and
spectrometric techniques. The samples were kindly provided in different cities of the
Amazon northern region (Belem and Coari). Extracts were obtained in ethanol and
ethanol: water. The antioxidant, cytotoxic, enzyme, antimicrobial and photoprotective
activities were analyzed by different techniques: chemistry and in cell. The extracts
analyzed in this study, obtained as by-products of the extraction of the pulp showed
up sources of phenolic substances and flavonoidics, besides having significant
biological activity with low cytotoxicity, highlighting the acai, bacuri and piquia waste.
Piquia shell extracts showed free radicals scavenger capacity of ABTS (CS50: 3.93 ±
0.12 μg.mL-1) and DPPH (CS50: 7.81 ± 0.34 μg.mL-1), in cellular assays, with
percentages of 70.69 ± 2.77%, 79.89 ± 6.50% and 79.48 ± 8.6% for shell, pulp and
seed extracts, respectively, low cytotoxicity in human fibroblasts, but high at tumor
strains, and also a high anti-inflammatory potential observed by the inhibition of nitric
oxide production. Different extracts of the açaí (Euterpe oleracea and Euterpe
precatoria) and bacuri extracts (exocarp and mesocarp of the Platonia insignis) have
been optimized on the methodology and the best solvent extraction. The extracts
obtained by cold and hot maceration with ethanol showed most efficient than
ultrasound method. Methodologies analysed showed different proportions of the
substances, but the same profile. The characterization of the extracts was performed
by mass spectrometry using two-dimensional techniques, DESI ionization and HPLC.
The extract of E. oleracea and E. precatoria seeds presented different profiles than is
commonly reported to the pulp, highlighting the presence of procyanidins, flavonoids
and phenolic as crisoeirol, caffeic and coumaric acid. More than 50 ions were
detected in each of the extracts. P. insignis mesocarp was 71, which detects the
presence of ions flavonoids, isoflavones and procyanidins. In extracts of Caryocar
villosum shells were detected and quantified the presence of ellagic acid (1873.63 ±
63.12 μg.g-1) and gallic acid (1712.62 ± 56.79 μg.g-1) as the compounds major. This
study opens the possibility of value adding to what is considered waste due to the
chemical composition and biological activities found, thereby reducing environmental
pollution by waste and contributing to the sustainable use of Amazonian raw
materials. / A utilização de produtos naturais vem aumentando consideravelmente nos
últimos anos devido às atividades biológicas relacionadas á sua composição
química. Porém, um entrave para as pesquisas é a quantidade de matéria prima
disponível para a produção em larga escala. Paralelo a isso, o consumo de frutas
amazônicas vem conquistando espaço nos mercados nacional e internacional e os
resíduos das indústrias de polpa estão crescendo proporcionalmente. Verifica-se
que pouco é conhecido sobre a composição química desses subprodutos gerados e
das atividades biológicas de seus extratos possam ter, sendo estes geralmente
descartados em grandes quantidades, resultando em problemas ambientais e
econômicos. No presente estudo analisou-se a composição dos extratos fenólicos
de 19 frutos amazônicos, avaliando-se as atividades antioxidantes, bem como
inibição enzimática, e antimicrobiana visando o uso biotecnológico. Os extratos mais
promissores foram analisados de forma mais detalhada por meio da detecção e
identificação das substâncias em técnicas cromatográficas e espectrométricas. As
amostras foram gentilmente cedidas em diferentes cidades da região norte (Belém e
Coari) e extraídas em etanol e etanol:água. As atividades antioxidante, citotóxica,
enzimática, antimicrobiana e fotoprotetora foram analisadas por diferentes técnicas
químicas e em células. Os extratos analisados neste estudo, obtidos como
subprodutos da extração das polpas demonstram-se fontes de substâncias fenólicas
e flavonoídicas, além de possuírem significativas atividades biológicas com baixa
citotoxicidade, destacando-se os resíduos de açaí, bacuri e piquiá. Os extratos de
piquiá apresentaram alta capacidade antioxidante, superior ao padrão quercetina,
tanto nos testes in vitro, com CS50 de 7,81±0,34 μm.mL-1 para DPPH, e 3,93±0,12
μm.mL-1 para ABTS, quanto em célula (70,69 ± 2,77%, 79,89 ± 6,50% e 79,48 ±
8,6% paras cascas, polpas e sementes, respectivamente), bem como potencial para
atividade antiinflamatoria. Os extratos de diferentes açaís (Euterpe precatoria e
Euterpe oleracea) e os extratos de bacuri (exocarpo e mesocarpo de Platonia
insignis) foram otimizados quanto à metodologia e o melhor solvente de extração.
Os extratos obtidos por maceração a frio e a quente com etanol apresentaram o
melhor poder extrator das substâncias fenólicas, comparados com os extraídos em
ultrasson. De forma geral, as metodologias testadas apresentaram diferentes
proporções das substâncias, porém o mesmo perfil. A caracterização dos extratos foi
realizada por espectrometria de massas, utilizando técnicas bidimensionais, com
ionização DESI e CLAE. O extrato das sementes de E. oleracea e E. precatória
apresentaram perfis diferentes do que é comumente relatado para a polpa,
destacando a presença de procianidinas, flavonoides e fenólicos como crisoeirol,
ácido cafeico e ácido cumárico. Foram detectados mais de 50 íons em cada um dos
extratos. No extrato do mesocarpo de P. insignis foram 71, onde detectou-se a
presença de íons de flavonoides, procianidinas e isoflavonoides. Nos extratos de
cascas de Caryocar villosum foram detectados e quantificados a presença de ácido
elágico (1873,63 ± 63,12 μg.g-1) e ácido gálico (1712,62± 56,79 μg.g-1) como os
constituintes majoritários. Este estudo abre a perspectiva de agregar valor ao que é
considerado descarte, devido à composição química e às atividades biológicas
encontradas, diminuindo assim a contaminação ambiental por resíduos e
contribuindo para a utilização sustentável de matérias primas amazônicas.
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