Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-07-18T19:50:32Z No. of bitstreams: 1 Felicidade Mota Pereira Avaliação da utilização do teste....pdf: 1069374 bytes, checksum: 6d5e3ef5ace61dfaf117c001157d5cec (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-18T19:50:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Felicidade Mota Pereira Avaliação da utilização do teste....pdf: 1069374 bytes, checksum: 6d5e3ef5ace61dfaf117c001157d5cec (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / A infecção pelo vírus da hepatite C (VHC) é comumente assintomática e apresenta uma elevada taxa de cronicidade, podendo evoluir para cirrose e carcinoma hepatocelular. O diagnóstico da hepatite C é realizado através da pesquisa de anticorpos pelo teste de ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) e confirmado por testes suplementares, tais como o RIBA (Recombinant Immunoblot Assay) e westernblot e teste confirmatório, como a pesquisa do VHC-RNA. O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia do RIBA no diagnóstico da infecção pelo VHC em doadores de sangue com anti-VHC reagente. Foram analisadas 102 amostras com resultado de anti-VHC reagente na HEMOBA, utilizando-se o teste anti-VHC Architect Abbott por quimioluminescência para detecção dos anticorpos anti-VHC, o RIBA III (CHIRON) como teste suplementar para as amostras anti-VHC reagentes e indeterminadas e a Reação em Cadeia da Polimerase (RT-PCR) convencional ou em tempo real (Amplicor Roche) para detecção do VHC-RNA. As amostras com VHC-RNA detectável foram genotipadas por hibridização reversa (LIPA; SIEMENS). Das 102 amostras analisadas no LACEN, 38,2% (39/102) foram reagentes, 57,8% (59/102) foram não reagentes e 3,9% (4/102) foram indeterminadas para o anti-VHC. Os resultados do RIBA foram 58,1% (25/43) positivos, 9,3% (4/43) negativos e 32,6% (14/43) indeterminados. Todas as amostras com resultado de RIBA indeterminado tiveram carga viral indetectável. As bandas predominantes nas amostras indeterminadas foram c33 e c22. Das amostras indeterminadas no RIBA, repetidas após seis meses com nova coleta, 20% (2/10) negativaram e 71,4% (10/14) permaneceram RIBA indeterminado. Destas, (8/10) continuaram indeterminadas com o mesmo padrão de bandas. O VHC-RNA foi realizado em todas as amostras do estudo (102) e foi detectável em apenas 22,5% (23/102). Todas as amostras com VHC-RNA detectável foram RIBA positivo e tinham índex maior que cinco na relação S/CO. Em apenas duas amostras que tiveram resultado de RIBA positivo, o VHC-RNA não foi detectado. As 23 amostras com VHC-RNA detectável foram genotipadas, sendo 78,3% (18/23) do genótipo 1, 17,4% (4/23) do genótipo 3 e 4,3% (1/23) do genótipo 2. A positividade do anti-VHC associou-se com o uso de droga intranasal (< 0,001), com drogas injetáveis (< 0,001)) e ocorrência de DST (< 0,05). Diante dos resultados encontrados, observa-se que o RIBA apresenta um elevado número de resultados indeterminados, sendo necessária a realização do VHC-RNA para a confirmação da infecção pelo VHC. Indivíduos com resultado de anti-VHC índex menor que cinco e resultado de RIBA indeterminado têm grande probabilidade de não apresentarem o VHC-RNA detectável e portanto, de não estarem infectados pelo VHC, mas devem ser acompanhados sorologicamente, de acordo com o critério médico. / The hepatitis C virus (HCV) infection is usually asymptomatic and has a high rate of chronicity, which may progress to cirrhosis and hepatocellular carcinoma. The hepatitis C diagnosis is realized by antibodies research using ELISA test (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) and confirmed by additional serological tests, such as RIBA (Recombinant Immunoblot Assay) and westernblot, and confirmatory test, like HCV-RNA research. The objective of this study was to evaluate the RIBA efficacy in the diagnosis of HCV infection in blood donors with anti-HCV reagent. Were analyzed 102 samples with anti-HCV reagent in HEMOBA using the anti-HCV test Abbott Architect chemiluminescence for detection of anti-HCV antibodies, the RIBA III (Chiron) as a supplemental test for anti-HCV reactive and indeterminate samples and the Polymerase Chain Reaction test (RT-PCR) conventional or realtime (Roche Amplicor) for HCV-RNA detection. Samples with HCV-RNA detectable were genotyped by reverse hybridization (LIPA SIEMENS). Of the 102 samples analyzed in LACEN 38.2% (39/102) were positive, 57.8% (59/102) were negative and 3.9% (4 / 102) were indeterminate for anti-HCV. The RIBA results were 58.1% (25/43) positive, 9.3% (4 / 43) negative and 32.6% (14/43) indeterminate. All samples with indeterminate RIBA results had undetectable viral load. The predominant bands in the indeterminate RIBA samples were c33 and c22. Of the RIBA indeterminate samples, repeated after six months with a new collection, 20% (2 / 10) became negative and 71.4% (10/14) remained indeterminate. Of these, (8 / 10) remained undetermined with the same banding pattern. HCV-RNA was performed in all study samples (102) and was detectable in only 22.5% (23/102). All samples with detectable HCV-RNA were RIBA positive and had more than five in the ratio index S / CO. Only two samples had RIBA positive results with HCV-RNA not detected. The 23 samples with detectable HCV-RNA were genotyped, and 78.3% (18/23) were genotype 1, 17.4% (4 / 23) genotype 3 and 4.3% (1 / 23) genotype 2 . The anti-HCV positivity was associated with intranasal drug use (p<0.001), injectable drugs (p<0.001)) and STDs (p<0.05). Given the results, it is noted that the RIBA has a high number of indeterminate results, requiring the HCVRNA detection for HCV infection confirmation. Individuals with anti-HCV index below five, and indeterminate RIBA results are likely undetectable HCV-RNA and therefore are not infected with HCV, but must be serologically accompanied, according to medical criteria.